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为开发一种安全有效的布鲁氏菌疫苗,解决现有A19、S2和M5等弱毒疫苗存在较强毒力可感染人,且无法通过血清学方法将其免疫抗体与野毒感染抗体进行鉴别区分的问题,本试验将含有噬菌体PhiX174裂解酶基因E的质粒转化至A19疫苗株,构建菌影疫苗(A19-BG)菌株,并检验其遗传稳定性及对小鼠的安全性、免疫效果和保护效果。结果显示,构建成功的A19-BG菌株传代20代仍稳定,热诱导48 h后可完全灭活,菌体穿孔明显。A19-BG疫苗免疫小鼠7 d后免疫部位无不良反应,14 d后脾脏无可见病理变化,与空白对照组相比脾脏重量无显著差异(P>0.05)。一免和二免后14 d,免疫小鼠的布鲁氏菌抗体、白细胞介素4(IL-4)和γ干扰素(IFN-γ)水平持续升高,产生了良好的体液和细胞免疫反应。布鲁氏菌2308强毒株攻毒免疫小鼠,免疫保护率可达87.5%,保护效果良好。结果表明,构建的A19-BG疫苗具有良好的稳定性、安全性、免疫效果和保护效果,有望成为一种极具潜力的布鲁氏菌新型疫苗。 相似文献
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为获得高蛋白含量和良好免疫原性的抗原,利用杆状病毒表达体系进行猪圆环病毒2型(PCV2)重组Cap蛋白表达,采取正交试验设计确定三因素(High five细胞浓度、病毒感染量、蛋白表达时间)的最佳组合,对重组病毒株vBac-SP-PCV2的表达条件进行优化,利用His Bind蛋白质纯化试剂盒对表达产物进行纯化,纯化蛋白作为标准蛋白用于Western blotting中蛋白质定量分析和蛋白免疫原性检测。结果显示:2.0×10^6/mLHigh five细胞浓度、1.5MOI病毒感染量、蛋白表达时间168h为重组PCV2-rCap蛋白表达的最佳条件,表达产物纯化良好,并能被PCV2多克隆抗体识别,免疫豚鼠可诱导产生高水平PCV2抗体。研究表明纯化PCV2-rCap蛋白可作为标准蛋白用于后续表达蛋白的定量分析和PCV2亚单位疫苗研发候选抗原。 相似文献
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根据培养物的生长速度和含菌量方面筛选适合猪肺炎支原体CJ株生长的猪血清。配制改良Friis培养基时分别添加6种不同生产厂家的猪血清,由6种不同厂家猪血清配制的改良Friis培养基培养猪肺炎支原体CJ株。从生长时间可知,由厂家1的猪血清配制的改良Friis培养基更适宜猪肺炎支原体CJ株的生长。从测定的含菌量测定结果可知,由厂家1的猪血清配制的改良Friis培养基培养猪肺炎支原体CJ株的含菌量较高。结果表明,由厂家1的猪血清配制的改良Friis培养基培养猪肺炎支原体CJ株的生长时间短且含菌量高。 相似文献
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脾淋源猪瘟活疫苗使用的脾淋组织毒生产繁琐,家兔热型判定中测温次数多,工作量大。通过统计、对比,试验在大量测定取得基础体温的基础上,使用48 h、72 h两个时间点测温的方法,进行热型判定,与规程[1]要求生产方法比较,取得较好的一致性,并对最终产品进行效力对比,结果无差异。 相似文献
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评价某国产和某进口猪支原体肺炎灭活疫苗在新疆规模猪场的田间免疫效果,为规模化猪场合理选择疫苗提供数据参考。选择新疆某规模化养猪场猪只1 832头,随机分为3组,分别是国产疫苗组 (第Ⅰ组)、进口疫苗组 (第Ⅱ组)和对照组 (第Ⅲ组),记录疫苗免疫后猪只的临床症状、成活率、日增重、屠宰肺部病变评分等指标,进行免疫效果评价。结果显示:国产和进口2种疫苗的安全性均良好,注射部位无红、肿等不良反应,免疫猪只的精神和食欲正常。免疫组仔猪平均咳嗽次数较对照组明显减少,差异显著 (pagenumber_ebook=81,pagenumber_book=79<0.05),但是国产疫苗组和进口疫苗组2个免疫组之间差异不显著 (pagenumber_ebook=81,pagenumber_book=79>0.05);国产疫苗组、进口疫苗组仔猪成活率分别为91.80%、91.20%,对照组仔猪成活率为89.20%;国产疫苗组、进口疫苗组仔猪的日增重分别比对照组高39 g、32 g;国产疫苗组、进口疫苗组和对照组猪的肺部病变评分分别为3.05±1.05、3.65±1.04和6.87±2.12,免疫组与对照组差异显著 (pagenumber_ebook=81,pagenumber_book=79<0.05),但免疫组之间差异不显著 (pagenumber_ebook=81,pagenumber_book=79>0.05)。某国产和某进口猪支原体肺炎灭活疫苗安全性和免疫效果相当。 相似文献
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通过猪肺炎支原体CJ株接种3种猪肺炎支原体培养基后的生长活性研究发现,与其他2种培养基相比,接种改良Friis培养基培养2~3 d含菌量可达到1.0×109~10CCU/m L,具有生长迅速、含菌量高的特点,可用于猪肺炎支原体CJ株的培养。 相似文献