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为筛选出检测猪支原体更为特异、敏感的PCR检测方法,本试验分别以16S rRNA、50S rRNA和膜蛋白OxaA为靶基因进行PCR检测,并从其敏感性、特异性和临床样本检出率等方面进行了比较。结果显示,以膜蛋白OxaA和16S rRNA为靶基因的PCR方法敏感性最高,最小检测DNA量为1.86 fg/μL,而以50S rRNA为靶基因的PCR方法最小检测DNA量为18.6 fg/μL;3种靶基因引物均扩增不出大肠杆菌、猪链球菌、猪肺炎支原体、牛附红细胞体等基因片段,具有较好的特异性;通过对临床60份血液样本的检测结果表明,以膜蛋白OxaA基因设计的引物检出率最高,为25%(15/60),明显高于16S rRNA基因的21.6%(13/60)和50S rRNA基因的18.3%(11/60)。本试验为猪支原体病的诊断及流行病学调查提供了更为敏感、特异的检测技术。 相似文献
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根据GenBank上发表的牛卵形巴贝斯虫CCTη基因序列设计合成2对巢式PCR引物,建立牛卵形巴贝斯虫巢式PCR诊断方法,对该方法的最佳反应条件进行了筛选,并进行了特异性、敏感性及临床样本检测试验。结果表明,建立的巢式PCR方法外引物扩增牛卵形巴贝斯虫基因组片段的长度为1 008bp,内引物为537bp;该方法扩增不出牛瑟氏泰勒虫、弓形虫、犬新孢子虫基因组DNA;最低检测DNA含量为16fg;通过对46份临床样本的检测,该巢式PCR较常规PCR阳性检出率高8.7%。本试验为牛卵形巴贝斯虫病的诊断提供了一种更为特异、敏感的检测技术。 相似文献
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为了解吉林省羊附红细胞体病的流行情况,试验以羊附红细胞体26.0 ku抗原蛋白为诊断抗原,采用ELISA方法对吉林省的乾安、延吉、珲春、龙井4个县市的296份放牧绵羊的血清样本进行了羊附红细胞体抗体的检测。结果表明:在检测的296份血清样本中,以平原为主的乾安县羊附红细胞体抗体的阳性率为40.2%(53/132),以山区为主的延吉、珲春、龙井市羊附红细胞体抗体的阳性率分别为60.9%(39/64)、62.5%(25/40)、61.7%(37/60),平原与山区羊附红细胞体抗体阳性率差异极显著(P<0.01);羔羊与成年羊附红细胞体抗体阳性率差异极显著(P<0.01)。说明吉林省是羊附红细胞体病的流行地区,尤其在山区感染严重。 相似文献
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为建立牛源犬新孢子虫孕鼠感染模型,深入研究牛源犬新孢子虫对孕鼠的致病作用,本试验以雌性BALB/c小鼠为试验动物,分离Vero细胞中培养的牛源犬新孢子虫速殖子,分不同剂量组腹腔接种雌性BALB/c小鼠后,与雄性BALB/c小鼠合笼,每天观察小鼠临床症状和发病情况,观察主要脏器组织的病理变化,应用PCR方法检测孕鼠脑、肝脏、脾脏等脏器组织及胎盘中犬新孢子虫Nc5基因,并测定孕鼠胎盘湿重和胎盘系数。结果显示,感染模型小鼠的最佳攻虫剂量为105个虫体;感染犬新孢子虫孕鼠先后出现精神不振、共济失调等临床症状,并有不同程度死亡;病理学观察模型小鼠脑、肝脏、脾脏等脏器组织出现充血、出血、肿大等病理变化;在模型小鼠脑、肝脏、脾脏等脏器组织及胎盘中检测到犬新孢子虫Nc5基因;随攻虫天数的增加,模型小鼠胎盘重量和胎鼠重量均不断增加,胎盘系数逐步降低,在第12、14、16天时,模型组与对照组相比,胎盘重量和胎盘系数均差异显著(P0.05)。本试验成功建立了牛源犬新孢子虫孕鼠感染模型,为犬新孢子虫致病机制研究奠定了基础。 相似文献
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正一、农机合作社在土地规模经营中的主要模式1.土地托管服务模式这是一种农户与农机合作社以托管合同的方式进行的土地规模经营模式,其主旨是农机合作社对农作物的生产环节进行专业性和全面性的托管服务,实现对农作物提供从种植到收获的全程服务,农机合作社从农户的利润中收取一定机械作业费用。这类托管对象主要为企业原材料生产基地和外出人员较多的村集体。将土地托管出去不仅解除了后顾之忧,同时不用改变土地承包性质,依然达到了规模经营的效果。托管后的土地大部分集中连片,有利于大规模机械化作业,实现了农机作业的最大收益。 相似文献
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为探讨附红细胞体对仔猪免疫水平的影响,选择4头附红细胞体病仔猪和4头健康仔猪,每周采血1次,连续4次,测定T淋巴细胞Ea花环率和B淋巴细胞EAC花环率.比较结果表明,附红细胞体病仔猪的Ea花环率和EAC花环率均明显低于健康仔猪,且差异极显著(P<0.01),表明仔猪患附红细胞体病后,机体的免疫水平明显下降. 相似文献
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猪附红细胞体解离方法的比较 总被引:4,自引:0,他引:4
为建立一种简便易行的猪附红细胞体的解离方法,对同一患有附红细胞体病猪的血液样本进行解离,比较了两种方法对附红细胞体的解离效果.结果表明,应用水浴法解离附红细胞体较化学试剂法解离效果好;再用超声波粉碎,经Sephadex G-200柱层析,即可取得纯度较高、提取量较大的附红细胞体抗原成分.为进一步研究附红细胞体的生物学特性及抗原分析奠定了基础. 相似文献
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