鸡传染性喉气管炎病毒gB基因的克隆及其原核表达   总被引：3，自引：0，他引：3  

郑海洲  柏佳宁  边艳青  赵宝华 《中国兽医学报》2005,25(4):343-345

根据鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)的gB基因序列和表达栽体pBV221的多克隆位点，设计了1对引物。以ILTV疫苗株基因组为模板，应用PCR扩增出gB基因片段，然后将其定向克隆于原棱表达载体pBV221中，构建了重组质粒pBV-gB。重组质粒转化到受体菌DH5α中，得到阳性重组菌株DH5α(pBV-gB)。该菌株在温控诱导下，SDS-PAGE电泳可见表达的特异蛋白。ELISA检测证明．表达的蛋白具有较好的反应原性。  相似文献   

嗜水气单胞菌研究进展   总被引：8，自引：0，他引：8  

张翠娟  赵宝华 《中国兽药杂志》2008,42(7):46-50

嗜水气单胞菌属于弧菌科气单胞菌属,在自然界分布广泛,可以感染多种水生及陆生动物并引起不同的疾病,是一种重要的人—兽—鱼共患病病原菌,本文概述了嗜水气单胞菌的分类地位和生物学性状,并对其鉴定方法、致病因子和由其引起的疾病进行了综述。  相似文献   

鹌鹑新城疫抗体不理想的原因分析     

赵宝华  徐文娟  孙旭初 《养禽与禽病防治》2018,(5)

本文针对鹌鹑免疫新城疫疫苗后抗体水平较低、整齐度差和持续性差等不理想的原因进行了分析,认为与疫苗、饲料、饲养管理水平和免疫抑制病等因素相关,对制订科学合理的新城疫免疫程序有参考价值。  相似文献   

褐牙鲆腹水症病原菌的分离鉴定及其灭活疫苗的研制   总被引：2，自引：0，他引：2  

孙祎敏  李楠  宋杰  李晓玥  申红旗  王风敏  李全振  曹杰英  赵宝华 《水产科学》2009,28(11)

从患腹水病褐牙鲆体内分离致病菌,通过生理生化和分子生物学方法进行鉴定;该菌的16S rDNA序列与标准株同源性达99.8%,证明该菌为嗜水气单胞菌.制备灭活疫苗后分别注射小鼠和牙鲆,测定其免疫效果.试验结果表明,用所制备的灭活疫苗免疫小鼠,其保护率达到90%,免疫牙鲆的保护率达到80%;采用渗透压差法浸泡免疫牙鲆在攻毒后发病率仅为6%,攻毒后保护率为85%;通过间接ELISA检测表明受免动物体内产生了较高水平的抗体;剖检及病理切片结果表明免疫过的动物内脏健康无异样,而未免动物肝脏充血,肠腔有积水.说明该疫苗安全有效.  相似文献   

抗A型产气荚膜梭菌α毒素单克隆抗体杂交瘤细胞系中建立与中和效应   总被引：5，自引：1，他引：4  

许崇波  赵宝华等 《中国兽医学报》1999,19(5):464-466

用提取的A型产气荚膜梭菌α毒素包涵体免疫BALB/c小鼠后,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合和克隆化,经间接ELISA筛选,共获得1A8,1C3,1D5,1D8,1F1,1H1和2E37株稳定分泌单克隆抗体（McAb)的杂交瘤细胞株,经鉴定,7株McAb的Ig亚类有IgG1(1D8),IgG3(1A8,1C3和2E3)和IgM（1D5,1F1和1H1）,细胞培养上清和腹水抗体效价分别为1：512-1：1024和1：10^6-1:10^8。尤为重要的是,2E3杂交瘤细胞株分泌的McAb不仅能够中和α毒素的磷脂酸C活性和溶血活性,而且能够对致死性腹腔感染小鼠产生良好的被动保护作用。  相似文献   

鸡闹传鼻并发症 治疗对症效果明     

赵宝华  杨万海  李金明 《今日畜牧兽医》2000,(10)

１９９９年 ６月,我们在畜禽疫病防检过程中,发现城关张某家养的２００日龄蛋鸡１２００只,突然发病。该病传播迅速,在３～５天发病率达到 ８０％,死亡率１％左右,产蛋量下降２０％,个别鸡产软蛋。 主要症状：表现采食量明显减少,鼻腔与窦发炎,流鼻涕或有黄白色干酪样分泌物,堵塞鼻孔。常见从头、流泪、一侧面部眼睑水肿或失明。肉髯发肿。出现明显的呼吸困难,有　音,少数病鸡下痢,粪便黄白色。 病理变化：主要是上呼吸道卡他性支,鼻腔、鼻窦、气管和支气管均有不同程度的充血、水肿,内积黄白色黏液。肝脏有少量的出血点。剖…  相似文献   

抗A型产气荚膜梭菌α毒素单链抗体1A8的基因克隆及序列测定   总被引：6，自引：0，他引：6  

赵宝华  许崇波  朱平 《中国预防兽医学报》2000,22(1):30-33

应用ＲＴ－ＰＣＲ技术,从分泌具有中和活性的抗Ａ型产气荚膜梭菌α毒素单克隆抗体（ＭcＡb）的杂交瘤细胞１Ａ８中,扩增出抗体ＶＨ和ＶＬ基因,用linker（Ｇ１y４Ｓir３） ３基因,将ＶＨ和ＶＬ基因连接成ＳeＦＶ基因,并将其克隆至pＧＥＭ－Ｔ载体中。经核甘酸序列分析证实,ＶＨ和ＶＬ基因及linker基因拼接正确,基因全长７２９bp,经计算机分析,ＶＨ和ＶＬ基因均为新发现的基因序列,符合功能性重排的鼠抗体可变区基因特征。  相似文献   

抗A型产气荚膜梭菌α毒素单链抗体基因的表达   总被引：1，自引：0，他引：1  

赵宝华  许崇波  冯书章  朱平 《中国兽医学报》2000,20(4):367-370

将 2种抗 A型产气荚膜梭菌α毒素单链抗体 ( Sc Fv)基因 Sc Fv-2 E3和 Sc Fv-1 A8克隆至表达载体p UC1 1 9、p HOG2 1和 p ET2 0 b中 ,构建了重组质粒 p UC2 E3和 p UC1 A8、p HOG2 E3和 p HOG1 A8、p ET2 E3和 p ET1 A8后 ,分别转化至受体菌 JM1 0 5、JM1 0 9和 BL2 1 ( DE3 )中 ,得到重组菌株 JM1 0 5( p UC2 E3 )和JM1 0 5( p UC1 A8)、JM1 0 9( p HOG2 E3 )和 JM1 0 9( p HOG1 A8)及 BL2 1 ( DE3 ) ( p ET2 E3 )和 BL2 1 ( DE3 )( p ET1 A8)。 ELISA检测表明 ,经 IPTG诱导后所表达的目的蛋白存在于重组菌株 JM1 0 5( p UC2 E3 )和JM1 0 5( p UC1 A8)及 JM1 0 9( p HOG2 E3 )和 JM1 0 9( p HOG1 A8)的菌培养上清中 ,在重组菌株 BL 2 1 ( DE3 )( p ET2 E3 )和 BL2 1 ( DE3 ) ( p ET1 A8)的胞周质中检测到了 Sc Fv的存在。 SDS-PAGE和薄层扫描分析表明 ,重组菌株 BL2 1 ( DE3 ) ( p ET2 E3 )和 BL2 1 ( DE3 ) ( p ET1 A8)的蛋白表达产物分别占菌体可溶性蛋白的 0 .9%和 0 .7%,其大小约为 2 60 0 0 ,且表达的目的蛋白具有中和磷脂酶 C的活性。  相似文献   

产气荚膜梭菌α-β融合基因的构建与表达研究     

马同锁  李翠莲  赵士豪  张红兵  赵宝华 《安徽农业科学》2006,34(19):4854-4856

应用PCR技术,首先从A型产气荚膜梭菌菌株NCTC64609中扩增出α-毒素保护性抗原基因片段,然后从C型产气荚膜梭菌C58-1染色体基因组中扩增了930 bp的β-毒素基因,并将α-毒素基因和β-毒素基因插入融合表达载体pBV221中,获得了重组质粒pMCPAB,转化受体菌BL21(DE3),得到重组菌株BL21(DE3)(pMCPAB)。对重组菌株诱导的表达产物进行ELISA检测和SDS-PAGE分析,结果表明重组菌株可以高效表达α-β融合蛋白。免疫实验表明,表达产物免疫的小鼠可抵抗α-毒素和β-毒素的攻击。  相似文献   

绵羊痘病毒的检测与遗传进化分析     

赵琳  李萌  罗静  王承民  王玉田  赵宝华  何宏轩 《动物医学进展》2017,38(12):9-14

羊痘是全球最严重的动物传染性痘病。近年来,羊痘病毒在非洲北部和中部、中东、亚洲大部分地区广泛流行,给养殖业带来巨大的经济损失。论文对4只疑似羊痘病毒感染绵羊进行诊断,通过临床观察,病理剖检,病理组织学观察,实验室检测,确定该病为绵羊痘,并对分离的病毒主要基因进行PCR扩增及遗传进化分析,发现此毒株属于亚洲系,且我国流行株基因比较稳定,变异不大。这不仅为绵羊痘病的诊断提供了技术手段,还丰富了我国羊痘病毒感染的流行病学资料,为进一步研究羊痘病毒的变异等提供数据支持。  相似文献