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据GenBank登录的高、低致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(highly and lowly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus,HP/LP-PRRSV)的非结构蛋白2(Nsp2)基因序列设计特异性引物和TaqMan MGB荧光探针,经优化反应条件,建立鉴别HP/LP-PRRSV二重TaqMan MGB实时荧光定量RT-PCR(Real-time fluorescent quantitative RT-PCR)检测方法;对该二重实时荧光定量RT-PCR方法进行了敏感性、特异性和重复性试验;对疑似PRRSV感染临床样品进行了应用检测,同时与建立的HP/LP-PRRSV二重RT-PCR方法进行了对比试验。结果显示,成功建立了鉴别HP/LP-PRRSV的二重实时荧光定量RT-PCR检测方法,HP/LP-PRRSV标准曲线的循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,相关系数分别为0.998和0.997;该方法灵敏度可达101拷贝/μL;特异性高,对HP/LP-PRRSV阳性对照扩增呈阳性反应,而对5个对照病原均呈阴性反应;不同浓度的HP/LP-PRRSV重组质粒分别重复扩增3次,重复结果良好;对25份临床疑似PRRSV感染样品进行了应用检测,阳性检出率为92%,较普通二重RT-PCR方法阳性检出率高。 相似文献
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不同比例复合益生菌对凡纳滨对虾生长、免疫及抗氨氮能力的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
对从凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)肠道中分离出的鲍鱼希瓦氏菌(Shewanella haliotis)、蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)和双壳气单胞菌(Aeromonas bivalvium)3株有益菌株,利用正交设计得到9种复合比例,通过饲料中添加上述9种比例混合的菌体(菌数总量为109 cfu/g)饲喂凡纳滨对虾,经过28 d养殖实验,评价其对凡纳滨对虾生长、免疫指标的影响。随后,利用氯化铵调节水体氨氮浓度至26.67 mg/L,经过16 d的氨氮毒性实验,研究不同比例复合益生菌对凡纳滨对虾抗氨氮能力的影响。研究结果表明,9个复合益生菌实验组的增重率和特定生长率均显著高于对照组(P0.05),并且以3株菌菌数6︰1︰3比例效果较好;不同配比的复合益生菌能够显著提高酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(ALP)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力(P0.05),并表现出了不同的影响效果,其中,3株菌菌数(菌数总量为109 cfu/g,下同)2︰3︰3、4︰2︰3及6︰1︰3比例对ACP活力具有显著促进作用(P0.05),3株菌菌数4:2︰3和6︰1︰3比例对ALP活力具有显著促进作用(P0.05);3株菌菌数2︰1︰1比例对T-SOD活力具有显著促进作用(P0.05);各比例的复合菌对溶菌酶活力的影响不显著(P0.05);氨氮浓度26.67 mg/L条件下,不同比例复合菌组对虾累计存活率显著高于对照组(P0.05),其中以3株菌菌数4︰3︰1和6︰3︰2比例组累计存活率较高,即抗氨氮效果较好。 相似文献
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猪α干扰素的原核表达及抗高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒活性测定 总被引:1,自引:0,他引:1
为了研究高效广谱的基因工程抗病毒制剂,本研究采用PCR技术自猪肝脏总DNA中扩增、克隆猪α干扰素(PoIFN-α)成熟肽基因并亚克隆入pQE30载体进行原核表达,对表达的融合重组猪α干扰素(rPoIFN-α)蛋白通过尿素变性、低浓度蛋白复性液复性、PBS溶液透析等步骤进行纯化,采用细胞病变抑制法分别测定rPoIFN-α蛋白在PK15细胞上抗水泡性口炎病毒(VSV)增殖活性及在Marc-145细胞上抑制高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的增殖活性,以分别评价rPoIFN-α的活性单位及其体外抑制高致病性PRRSV增殖所需的最低浓度。结果表明,克隆的PoIFN-α成熟肽基因全长501bp,编码166个氨基酸;表达的rPoIFN-α蛋白分子量大小20.7ku左右,与预期大小相一致;经纯化后的蛋白纯度在95%以上;纯化的rPoIFN-α蛋白在PK15细胞上抗VSV病毒活性单位为1.4482×10^4IU/mL(5.2×10^6IU/mg),在Marc-145细胞上能完全抑制高致病性PRRSV增殖所需的rPoIFN-α蛋白最低有效剂量为640U/mL(2.3×10^4U/mg)。这些研究结果为新型基因工程抗病毒制剂的开发以及用于高致病性PRRSV性疾病的预防和治疗奠定了基础。 相似文献
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动物微生态制剂研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
长期以来,人们为了提高养殖业生产效益而不顾饲养环境,致使饲养环境不断恶化,各种疾病不断发生,损失惨重。使用抗生素能使许多疾病得到相应的控制,但往往对畜牧业生产和人类产生较大的副作用。首先抗生素作用于病原菌的同时,也对机体有益的菌群构成威胁,以致破坏肠道微生态平衡,造成菌群失调,使机体抵抗力下降而增加对外源性感染的易感性。另外,在抗生素作用下,通过突变与选择使正常微生物对抗生素耐药性增加,同时也使动物机体免疫力下降。滥用抗生素还可破坏生态环境。鉴于以上使用抗生素带来的种种副作用,微生态制剂将逐渐成… 相似文献
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犬巨幼红细胞性贫血病的发病原因主要是机体缺乏维生素B及叶酸造成的 ;临床上表现可视粘膜苍白外 ,血象检查为(红 )细胞偏大 ,畸型 ,嗜中性白细胞分叶核过多。现将我站近期诊治的三例病犬报告如下。1 发病情况 1999年 2月某养犬专业户饲养的 4个月龄圣伯纳犬 2只先后发病 ,出现腹泻、发热、呕吐、沉郁、拒食等症状 ,先后用青霉素、先锋霉素、抗病王等治疗 ,均无效果。2 临床检查 病犬精神沉郁 ,被毛逆立 ,行动迟缓 ,全身乏力 ,消瘦 ,皮肤、眼结膜、口腔粘膜、齿龈苍白 ,呈现明显的慢性病容。体温 37.9~ 38.5℃ ,脉搏 12 4~ 148次 /… 相似文献
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近几年来 ,狐自咬症不断出现 ,我们试用氢化可地松治疗效果较为显著 ,治愈率达 97.5 % ,现将治疗情况总结如下。1 主要症状 患狐表现为神经兴奋性增高 ,啃咬自己的尾部、后肢、髂部、臀部等处 ,咬破皮肤、肌肉 ,严重时咬掉尾尖 ,撕破腹部皮肤、肌肉 ,内脏流出 ,严重感染而死亡。急性病狐持续 2~ 2 0d,死亡率可达 2 0 %。2 治疗方法 当发现狐有自咬症状时 ,首先要防止继续咬伤 ,将上下 4棵犬齿用钳子掐断 ,或用胶合板或自行车旧外胎用铁丝扭住做成套 ,套在病狐颈部用以固定头部 ,使其不能扭转回头自咬躯体后部。静脉点滴氢化可地松 ,… 相似文献
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近年来,水产养殖业发展迅速,但同时也引起了一些负面问题,并受土地、水资源缺乏等因素的制约.分析认为,传统养殖方式是造成现存问题的根本原因,由此提出工业化的新型水产养殖方式,根据其标准化、高度集约和控制排放的特征,论证推行工业化方式的必要性和可行性,并探讨了传统方式向工业化方式发展所需的转变. 相似文献