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为筛选建立小反刍兽疫病毒N蛋白双抗原夹心ELISA抗体检测方法的抗原原料,本研究通过优化大肠杆菌密码子、优化蛋白表达与纯化条件等方法,分别在pET-30a与pET-32a两个不同原核表达载体中成功获得了可溶性的小反刍兽疫核衣壳蛋白(N)。分别对重组大肠埃希氏菌pET-30a-(N)-BL21(DE3)株与pET-32a-(N)-BL21(DE3)株种子批的P7代与P20代进行蛋白诱导表达与抗原提取纯化,共获得6批小反刍兽疫病毒pET-30a-(N)蛋白与pET-32a-(N)蛋白,并对蛋白的浓度、纯度、抗原性和特异性进行检验。结果表明两个纯化后的重组抗原与羊小反刍兽疫病毒阳性血清有明显反应,具有较好的反应性,而与羊痘病毒阳性血清、羊口蹄疫病毒阳性血清、山羊关节炎/脑炎病毒阳性血清等特异性血清均无交叉反应,具有较好的特异性。本研究结果为今后以N蛋白为基础建立相应的抗原捕获ELISA方法,竞争ELISA检测方法、间接ELISA检测方法以及双抗原夹心ELISA抗体检测方法打下了坚实的基础。 相似文献
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2008年9月,全国畜牧总站的辛盛鹏被中组部、团中央和农业部选派作为第九批博士服务团成员,背上行囊,满怀豪情,赴西藏挂职。他逐渐克服了高原反应后,积极投身到工作中,圆满在西藏挂职一年。期间西藏农牧厅的领导多次找他谈话,诚恳地要求他再工作一年,看着领导饱含深情的渴望眼神,他动了心,答应了,又延期一年作为第十批博士服务团成员。由于他突出的工作表现和工作业绩,2010年5月,农业部党组又安排他作为第六批援藏干部领队,在西藏继续工作三年。这样,辛盛鹏连续在西藏工作了五年。近日,他援藏工作结束时,心情久久不能平静,在返回北京的前夜写下了下面这首诗,从中我们可以体会到他对西藏的深情和怀念。 相似文献
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用鸡新城疫(ND)弱毒株接种鸡胚,用鸡产蛋下降综合征(EDS)B92毒株接种鸭胚,分别收获ND鸡胚尿囊液毒和EDS鸭胚尿囊液毒,用福尔马林灭活二者混合后,加入油相中,制成ND-EDS二联油乳灭活疫苗。经实验该疫苗稳定性、安全性良好,保存期较长(14个月),且免疫性好,在小区域试用中,很好的预防了鸡新城疫和鸡产蛋下降综合征。 相似文献
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