禽流感病毒H7亚型血凝素基因的原核表达及鉴定   总被引：5，自引：1，他引：4  

王传彬  多海刚孙明赵铁柱  田克恭 《中国兽医科技》2003,33(12):22-25

参考已发表的禽流感病毒(AIV)H7亚型血凝素(HA)基因序列设计引物，经RT-PCR扩增了AIV-H7亚型的HA1基因片段，再将该片段定向插入到原核表达载体pGEX-4T-2中，转化大肠埃希氏菌。重组表达栽体经酶切和测序鉴定后，用IPTG诱导表达。用Western-blotting和ELISA试验鉴定表达产物的抗原性。结果表明，融合表达蛋白能与AIV H7N1、H7N2、H7N7和H1N1亚型标准抗血清反应，而与H5N1、H9N2等其他13个亚型的抗血清无交叉反应。  相似文献   

H7N2禽流感病毒分离株血凝素蛋白全基因的序列分析     

王传彬 孙明田克恭  金萍王宏伟  遇秀玲陈西钊 《中国兽医科技》2005,35(12):988-993

为进一步分析H7N2禽流感病毒（AIV）分离株血凝素（HA）基因的特性,参照已发表序列设计了1对引物,采用RT-PCR获得了1条约1.7 kb的DNA片段,测序后进行了同源性比较、HA基因系统发育进化树分析和氨基酸编码分析.结果表明,所测的2个分离株的HA基因全长1 664 bp,编码除信号肽以外的HA蛋白的全部544个氨基酸,其中包括HA1的323个氨基酸,HA2的221个氨基酸.2个分离株HA基因核苷酸序列的同源性为99.4%;与GenBank中AIV标准株A/Afri.Star./Eng-Q/983/79（H7N1）的同源性最高,分别为99.4%和99.0%;与美国A/Chicken/NewYork/13142-5/94（H7N2）株同源性很低（仅65.0%）,而与以色列、意大利H7N2 AIV的同源性较高（为96%～97%）;2个分离株在HA基因进化树中均处于H7亚型AIV的欧亚群系分支内.推导氨基酸的序列分析表明,其HA蛋白裂解位点的氨基酸序列为-GR-GLF-,仅包含1个碱性氨基酸（R-）残基,符合低致病力AIV的基因特征.  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒美洲经典株国家核酸标准物质的研制     

原霖  高旭年  董浩  陈亚娜  闫若潜  兰德松  宋晓晖  吴佳俊  杨林  王传彬 《畜牧与兽医》2018,(11)

为了研制猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)美洲经典株国家核酸标准物质,将美洲经典株代表PRRSV VR2332接种Marc145细胞,出现细胞病变后,反复冻融并收集病毒液,并灭活分装。制备后进行均匀性评估、稳定性评估、数字PCR法定值和临床试用。结果表明制备的标准物质的定值为(2. 06±0. 31)×104copies/μL;样品均匀;-20℃稳定保存12个月以上、4℃稳定2个月以上。经全国标准物质管理委员会评审,该制备物达到了国家二级标准物质的要求,可以作为核酸扩增检测的PRRSV美洲经典株核酸标准物质。  相似文献   

云南省泸水市非洲猪瘟疫情流行病学调查     

赵云玲  张文东  赵柏林  王传彬  陈继明 《中国动物检疫》2019,36(6):9-11

2019年2月,云南省怒江傈僳族自治州泸水市发生非洲猪瘟疫情。农业农村部和云南省农业农村厅联合督导组对此起疫情进行了流行病学调查和扩散风险分析。调查分析显示:泔水喂猪引发此起疫情的可能性最大,当地再次发生非洲猪瘟疫情的风险较高,但疫情扩散到疫点之外和野猪的风险较小。督导组由此提出,明确各相关部门防疫责任,继续加大疫情监测和排查力度,加大对餐厨剩余物和猪肉销售点废弃碎肉的监管,禁止泔水喂猪,进一步提升猪场的猪病防控能力。此起疫情对非洲猪瘟防控具有指导意义,对边远贫困地区扶贫攻坚工作和边境动物卫生安全有一定的警示作用。  相似文献   

我国兽医生物安全实验室的现状与管理对策     

刘伟  董昕欣  王传彬  李文京 《中国家禽》2013,35(12)

如何加强兽医实验室的生物安全管理是一个摆放在广大兽医工作者面前的新课题,本文就我国兽医生物安全实验室现状与管理状况进行梳理,提出相应的建议和对策,供有关部门参考.  相似文献   

国外农业供给侧改革经验及其对我国的启示     

王传彬  罗娜 《南方农业》2018,(21)

农业供给侧改革是实现农业现代化的必经之路,世界各国农业在转型过程中都实施了调整农业产业结构、优化要素投入结构、提高农民收入等供给侧改革,并且取得了很好的效果。基于此,通过对典型国家农业供给侧改革经验的梳理和总结,针对具体国情提出适合我国的农业供给侧改革政策。  相似文献   

苏北农村产业科技扶贫的组织模式与路径选择     

王传彬 《南方农业》2019,(8)

新时期,农业科技是精准扶贫的源动力、瞄准器和助推器,科技扶贫已成为推动贫困地区可持续发展的根本途径。基于此,从对苏北科技扶贫组织模式的实地调查资料入手,对新时期我国科技扶贫的现状、存在的问题进行了实证研究,指出"企业+科技型农民股份合作社"模式是苏北农村科技扶贫的发展方向,为苏北地区乃至江苏省科技扶贫组织模式和利益机制的完善提供经验支持。  相似文献   

小反刍兽疫病毒双抗原夹心时间分辨荧光免疫测定方法的建立     

孙雨  宋晓晖  董浩  赵柏林  曲萍  蒋菲  杨天意  张晨  杨林  王传彬 《动物医学进展》2019,40(4):1-8

通过优化大肠埃希菌密码子、优化表达条件等方法,在大肠埃希菌表达系统中成功获得了可溶性的N蛋白与NH融合蛋白。进一步基于纯化的可溶性N蛋白与NH融合蛋白建立了小反刍兽疫病毒双抗原夹心时间分辨荧光免疫测定方法。该方法敏感性高,特异性强,能够特异性的检测羊血清中的小反刍兽疫病毒抗体,与其他相关疫病病原无交叉反应;重复性试验组内与组间变异系数均小于10%。对292份临床血清样品进行检测,与法国IDVET竞争ELISA试剂盒比较,阳性样品符合率为92.47%,阴性样品符合率为97.26%,总的符合率为94.86%。该方法与传统的ELISA方法相比,具有敏感性、特异性相当,操作简单、快速,具有较高的推广应用价值。  相似文献   

小反刍兽疫病毒N蛋白抗体与H蛋白抗体在羊体内代谢消长规律的研究     

孙雨  宋晓晖  肖颖  李秀梅  王睿男  吕园园  蒋菲  辛盛鹏  杨林  王传彬 《中国草食动物科学》2019,(6):43-47

为研究小反刍兽疫病毒N蛋白抗体与H蛋白抗体在羊体内的代谢消长规律,试验通过建立小反刍兽疫N蛋白双抗原夹心ELISA抗体检测方法、H蛋白阻断ELISA抗体检测方法与血清中和抗体试验方法,分别检测了羊免疫疫苗后体内N蛋白抗体与H蛋白抗体在每个免疫阶段的代谢消长变化。结果表明:羊免疫小反刍兽疫疫苗后,血清内的N蛋白抗体与H蛋白抗体在6~8周时血清抗体效价较高,对应的羊体内中和抗体效价为1∶512,且效价至少可以持续到10周以上,2种抗体具有一定消长代谢规律的相关性。该研究结果也为以N抗原与H抗原为基础建立相应的抗原捕获ELISA方法、竞争ELISA检测方法、间接ELISA检测方法以及双抗原夹心ELISA检测方法奠定了一定的理论依据。  相似文献   

基因2型牛病毒性腹泻病毒RT-PCR检测方法的建立和初步应用   总被引：1，自引：0，他引：1  

任敏  焦海宏  蒋颖  刘振华  王传彬  朱国强 《中国预防兽医学报》2008,30(9)

根据已发表的牛病毒性腹泻病毒基因1型(BVDV-1)和2型(BVDV-2)5非编码区(5-UTR)的序列,分别设计了针对BVDV-1型、BVDV-2型以及针对BVDV-1和BVDV-2两型的特异性引物和通用引物,以标准参考株BVDV-1 NADL株和BVDV-2890 株为对照,建立了分别能检测BVDV-1、BVDV-2和BVDV-1/BVDV-2的RT-PCR 检测方法.在此基础上,进一步对疑似BVDV-2感染牛的临床病料组织(脾、淋巴结、心肌、血液等)检测结果表明,在所检测的18份样品中,BVDV-2阳性8份(44%).经RT-PCR鉴定为阳性的组织病料,进一步通过MDBK 细胞进行病毒分离,病毒分离率为100%;结合感染细胞病变观察,间接免疫荧光试验RT-PCR和序列测定鉴定,所分离的病毒均为BVDV-2.上述研究表明,该RT-PCR检测方法敏感、特异;并证实我国牛群已存在BVDV-2的污染或感染.  相似文献