排序方式： 共有50条查询结果，搜索用时 15 毫秒
41.
为构建表达猪流行性腹泻病毒(PEDV)S1与GM-CSF融合基因的重组腺病毒,通过FMDV的2A基因序列做为Linker将密码子优化的S1基因和粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)基因连接。构建重组穿梭质粒pShuttle-GM-CSF 2A-S1(m),并将其电转化至含有腺病毒骨架载体pAdEasy-1的大肠埃希菌BJ5183感受态细胞中,通过同源重组制备重组腺病毒质粒pAd-GMCSF2A-S1(m)。重组腺病毒质粒经PacI线性化后转染HEK-293A细胞,获得重组腺病毒rAd-GMCSF2A-S1。间接免疫荧光和Western blot结果显示,S1和GMCSF蛋白在重组腺病毒感染的HEK-293A细胞中获得表达。该重组腺病毒的制备为PEDV重组活载体疫苗的研究奠定了基础。 相似文献
42.
为确定河南开封某猪场发生猪呼吸系统疾病综合征（PRDC）的病原,本研究无菌采集病死保育猪肺脏、心脏和脾脏等组织样品,进行细菌学检验和药敏试验,通过PCR/RT-PCR检测样品中猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪圆环病毒2型（PCV2）、猪流感病毒（SIV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）、猪瘟病毒（CSFV）和猪肺炎支原体（Mhp）等病原,并对核酸阳性病毒性病原的抗原结构基因进行测序和遗传演化分析。结果表明,通过细菌分离培养、形态观察、卫星现象观察和16S rRNA基因鉴定,从病死保育猪体内分离鉴定出1株副猪嗜血杆菌（Hps）,药敏实验表明该菌株对对氨苄西林、阿莫西林克拉维酸、头孢噻呋和四环素几种药物敏感。核酸检测PRRSV和PCV2核酸阳性,分别命名为PRRSV/HN-2019和PCV2/HN11-2019;进一步对PRRSV/HN-2019和PCV2/HN11-2019的结构基因分析发现,PRRSV/HN-2019与与NADC30分支的毒株亲缘关系较近,属于NADC30-like毒株;PCV2/HN11-2019与PCV-2d分支的毒株亲缘关系较近,属于PCV-2d分支。综上所述,本研究确定该猪场存在PRRSV、PCV2和Hps的混合感染,为该猪场下一步的PRDC有效防控提供了参考依据。 相似文献
43.
某鸽场正常存栏美国落地王鸽１３０００余只，其中近１／３为种鸽，其余为乳鸽。采用种鸽笼养，乳鸽高架栖养，青年鸽分散在周围养殖户饲养，开产前回收入场的饲养管理模式。１发病情况从３月至７月下旬，半年间共死亡鸽子近３０００羽。疾病主要发生在青年鸽群和乳鸽群，也见种鸽发病的现象。病鸽表现精神沉郁，羽毛松乱，减食或食欲废绝；早期拉灰白色稀便，后期拉黄绿色稀便；部分病鸽关节肿胀，呈跳跃式运动；在疾病后期部分病鸽见神经症状，表现头颈歪斜、运动失调。病程约５～７天。剖检病死鸽：主要病变为出血性肠炎，肠粘膜肿胀，呈… 相似文献
44.
45.
46.
47.
鸡马立克氏病(MD)琼脂扩散试验(琼扩)抗原大多数都是含羽髓的羽毛经浸提挤压制成。为探讨更简便的方法,我们将MD的病、死鸡皮肤打碎,离心制成MD琼扩抗原,取得满意效果,现报告如下。1 材料和方法1.1 抗原和血清:MD琼扩抗原和阳性血清、 相似文献
48.
本研究对河南省部分地方发生黄牛、山羊蓝舌病的临床症状观察,流行病学调查,发现扶沟县练寺乡69头黄牛中有3头病牛患有明显蓝舌病临床症状,发病率为4.3％。并进行了病毒毒分离培养及提纯浓缩,将病毒用磷钨酸负染色,电子显微镜观察。 同时对扶沟县练寺乡周寨、河套、双庙,西华县红花乡黄庄村等地黄牛、山羊也进行了血清学调查,共检查黄牛188头,琼扩阳性者10头,阳性率为5.3％,;检查山羊91头,琼扩阳性者8头,阳性率为8.7％。从而首次证实了河南省黄牛、山羊有蓝舌病病毒和感染流行。 用感染病毒的鸡胚尿囊液经聚乙二醇(PEG)提纯浓缩病毒,研究成功蓝舌病的单扩溶血试验,方法简便,准确性和重演性高,便于大规模畜群的普查应用。 相似文献
49.
塞内卡病毒A（SVA）是新近发现的一种能够引起猪特发性水疱病及新生仔猪死亡为主要临床特征的病原微生物。该病呈世界性分布,给多个国家的养猪业造成了一定的经济损失。鉴于目前国内外尚无可用SVA商品化疫苗和抗病毒药物上市,本研究拟在实验室前期对SVA研究的基础上建立稳定表达绿色荧光蛋白报告基因的重组病毒,为体外高通量筛选具有抗SVA活性药物提供一种简单快速有效的工具。本研究在pEGFP-C1载体EGFP基因末端引入猪捷申病毒1型的2A基因,构建EGFP-P2A融合基因过度质粒,随后分别设计带有同源臂的克隆引物,通过同源重组技术将EGFP-P2A基因插入SVA毒株CH/HeN-2018基因组2A和2B基因间,并经测序鉴定,成功构建重组载体pSVA-EGFP。将pSVA-EGFP转染PK-15细胞,盲传至P2代,获得致使感染细胞病变明显、病变时间稳定的重组SVA荧光毒rCH/HeN-2018-EGFP。通过绿色荧光观察、RT-PCR和生长曲线测定,评估了重组毒株rCH/HeN-2018-EGFP和亲本毒株生长特性。并进一步通过药物细胞毒性试验和病毒感染试验对rCH/HeN-2018-EGFP作为潜在抗SVA药物筛选工具进行评价。结果表明,rCH/HeN-2018-EGFP与亲本毒株wtCH/HeN-2018和rCH/HeN-2018在PK-15细胞中具有相似的生长特性,且遗传稳定,在P10代能够稳定表达绿色荧光,插入的EGFP-P2A基因没有出现突变现象。抗SVA病毒感染试验结果表明,用终浓度20 μmol·L-1的姜黄素和110 μmol·L-1黄芩苷预处理PK-15细胞2 h,通过观察荧光细胞的数量直观判断两种药物均能够抑制rCH/HeN-2018-EGFP在细胞中的复制,其中黄芩苷抑制效果极显著。随后在亲本毒株wtCH/HeN-2018感染试验进一步证实了黄芩苷对SVA病毒复制抑制的效果。本研究所构建的携带EGFP基因的重组SVA毒株能够高效稳定地表达绿色荧光蛋白,可以作为一种工具报告病毒应用于抗SVA药物和蛋白的筛选过程。 相似文献
50.
1992～1993年,我们对河南省7地市共15群鸡的送检血清检查鸡产蛋下降综合症(EDS76)抗体,结果14群为EDS76抗体阳性,鸡群抗体阳性率为10～92%,HI滴率达2~3～2~10.从一群产蛋率突然下降和蛋壳褪色及质量改变为特征的鸡群中分离出一株产蛋下降综合症病毒.该毒株已适应鸭胚并引起部分鸭胚死亡,感染的鸭胚有明显病变,尿囊液HA价达2~(13)以上,分离病毒的HA特性能被标准EDS76抗血清(哈尔滨兽研所研制)抑制,与标准EDS76抗血清在琼脂凝胶中形成肉眼可见的沉淀线.用研制的EDS76油乳剂灭活苗给开产前的鸡进行预防接种,可起到良好的保护作用. 相似文献