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为了比较鸭坦布苏病毒(duck Tembusu virus, DTMUV)E蛋白结构域Ⅰ-Ⅱ(EDⅠ-Ⅱ)与结构域Ⅲ(EDⅢ)的反应原性和免疫原性,试验将重组质粒pET-EDⅠ-Ⅱ[EDⅠ-Ⅱ基因插入表达载体pET-30a(+)构建的重组质粒]和pET-EDⅢ[EDⅢ基因插入表达载体pET-30a(+)构建的重组质粒]分别转化至大肠杆菌(E.coli)Rosetta(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导后,对表达产物进行SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定,采用亲和层析法纯化重组蛋白EDⅠ-Ⅱ和EDⅢ,通过Dot-blot试验和间接ELISA试验比较二者的反应原性;将重组蛋白EDⅠ-Ⅱ和EDⅢ免疫小鼠,通过测定免疫小鼠血清中特异性抗体、病毒中和(VN)抗体和细胞因子(IL-6、IFN-γ)水平比较两者的免疫原性;将DTMUV分离株感染重组蛋白EDⅠ-Ⅱ和EDⅢ免疫小鼠,采用实时荧光定量PCR方法检测小鼠肺脏、肝脏和脑组织中DTMUV RNA相对表达水平,比较重组蛋白EDⅠ-Ⅱ和EDⅢ对免疫小鼠的保护力。结果表明：含重组质粒pET-EDⅠ-Ⅱ和pET-EDⅢ诱导4 h的菌体蛋... 相似文献
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五味子乙醇提取物对肉仔鸡抗氧化功能和血液生化指标的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
[目的]研究中草药五味子作为饲料添加剂对肉仔鸡抗氧化功能和血液生化指标的影响。[方法]以五味子乙醇提取物、五味子乙醇提取物和女贞子水提取物配伍及黄霉素作为饲料添加剂,测定肉鸡血清、心脏、肝脏和肾脏组织中过氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽还原酶(GR)活性与丙二醛含量以及血清生化指标。[结果]五味子乙醇提取物及五味子乙醇提取物与女贞子水提取物配伍均能在不同程度上提高肉鸡抗氧化能力。[结论]结果为五味子在肉鸡饲养中的应用提供了参考。 相似文献
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猪瘟是由猪瘟病毒引起的猪一种急性或慢性、热性和高度接触性传染病,是目前危害我国养猪业最严重的传染病,尽管我国成功研制了最好的猪瘟疫苗,并且在猪瘟的防治方面发挥了积极作用,但目前猪瘟疫苗免疫效果却往往不尽如人意,其中免疫程序不合理是主要原因.因此,我们应用3种免疫程序对不同规模猪场仔猪的免疫效果进行了监测,旨为不同规模猪场提供比较科学、合理的免疫程序,以提高猪瘟的防控水平.
1 试验材料
1.1 检测试剂盒 猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒,购自武汉科前动物生物制品有限责任公司. 相似文献
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仔猪蛔虫病是由猪蛔虫感染猪引起的一种常见肠道寄生虫病,主要寄生在猪的小肠中,可导致仔猪生长缓慢,甚至成为僵猪,严重时还可以造成死亡,给养猪业造成严重危害。笔者将一些断奶仔猪生长缓慢、呼吸困难、 相似文献
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口蹄疫病毒VP2基因的原核表达及抗原性检测 总被引：3，自引：0，他引：3
将口蹄疫病毒VP2基因连接到原核表达载体pPROEX^TM HTb上，获得重组质粒pPR-VP2。将此质粒转化感受态菌DH5α中，经终浓度为1．0mmol／L的IPTG诱导，1h～6h依次收集菌液，SDS-PAGE电泳分析，在4h后表达量可达到高峰。经过软件分析，表达产物占总菌体蛋白的23．1％，大小为33Ku左右。根据Ni-NTA纯化系统说明操作，获得较纯的VP2融合蛋白。以牛抗O型口蹄疫病毒血清为第一抗体，通过Western blot和Dot ELISA鉴定，纯化后的VP2融合蛋白可以与牛抗O型口蹄疫病毒血清发生特异性反应。 相似文献
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本研究采用PCR-SSCP技术,对100只淮南麻鸭的IGF-Ⅰ基因的单核苷酸多态性进行研究,发现存在1个多态性位点,表现出3种基因型(AA、AB和BB)。经适合性χ2检测,该位点处于Hardy-Weinberg平衡状态。方差分析结果显示,淮南麻鸭初生至4周龄体重,3种基因型差异不显著,而之后的5周龄至9周龄体重为AA和AB型差异显著,AA型和AB型均明显优于BB型,9周龄时AA基因型比AB和BB基因型分别重88.71g和142.18g。证实该位点A等位基因可能与淮南麻鸭的体重呈正相关。 相似文献
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本研究旨在获得重组伪狂犬病病毒（PRV）gE蛋白及其多克隆抗体。利用PCR方法从PRV感染猪的肺脏、脑和扁桃体混合组织中扩增PRV gE基因,连接至克隆载体pMD18-T（pMD-gE）后进行测序与进化树分析。以pMD-gE为模板,利用PCR方法扩增其膜外结构域部分基因（gE-outside）,将其连接至原核表达载体pET-30a（+）,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,构建重组质粒pET-gE-outside。将重组质粒pET-gE-outside转化大肠杆菌RosettaTM（DE3）pLysS感受态细胞,经IPTG诱导后,通过SDS-PAGE和Western blotting进行表达产物的分析与鉴定。经亲和层析技术纯化重组PRV gE蛋白并免疫小鼠,通过间接ELISA和Western blotting分别进行三免3周血清中鼠抗PRV gE多克隆抗体效价的测定和鉴定。PCR和测序结果表明,本研究成功克隆了PRV gE基因,与国内2011年以后流行毒株属于相同分支。SDS-PAGE和Western blotting结果证实,PRV gE-outside基因在原核表达系统获得正确表达,分子质量约为55 ku,且可与猪抗PRV多克隆抗体发生免疫反应。经亲和层析纯化的gE-outside蛋白浓度为1.23 mg/mL。将其免疫小鼠,三免3周的小鼠血清中鼠抗PRV gE-outside多克隆抗体效价为1：204 800,并可与gE-outside蛋白发生免疫反应。综上,本研究制备了重组PRV gE蛋白和鼠抗PRV gE蛋白多克隆抗体,可为PRV感染机制研究及建立快速、高效免疫学检测技术提供技术指导和材料。 相似文献
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