应用套入式聚合酶链反应(Nested-PCR)检测蓝舌病病毒的研究     

马洪超  孙淑芳  陶茂辉  尹燕博  郭福生  龚振华  蔡丽娟  蒋正军  丁有胜  黄运生  陈书琨 《畜牧兽医学报》2000,31(2):145-149

本实验建立了一种Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ方法。应用方法检测５株标准株蓝舌病病毒（Ｔ４、Ｔ１０、Ｔ１１、Ｔ１６、Ｔ２０）和５株国内蓝舌病病毒分离株（ＣＦ４、ＡＦ６、Ｚ１、Ｈ１、Ｇ１４）,检测结果均为阳性,而检测相关环状病毒（ＥＨＤ２、ＥＨＤ６、Ｉｂｒａｋｉ）,检测结果均生。研究证明,此方法可检测到３．５ｆｇ的ＢＴＶ－ＲＮＡ,灵敏度较高。该方法成功区分了蓝病病毒和相关环状病毒,比血清学方法更加优势,在临床  相似文献   

RT-PCR检测猪传染性胃肠炎病毒方法的建立   总被引：3，自引：0，他引：3  

吴国平  尹燕博  孙淑芳  郭福生  何后军  龚振华 《中国兽医杂志》2003,39(3):19-20

猪传染性胃肠炎 ( TGE)是一种以严重腹泻、呕吐和脱水为临床特征的高度接触性传染病 ,属于国际兽疫局 ( OIE)法典中 B类疫病必检的猪传染病。TGEV是一种有囊膜的正链 RNA冠状病毒。目前检测 TGEV的方法主要有中和试验、免疫荧光抗体试验、酶联免疫吸附试验和电镜技术 ,这些方法对于检测 TGEV和防制 TGE起到了重要作用 ,但也存在特异性不强、灵敏性差、耗时长等缺点。c DNA探针、RT- PCR近年来已成为国际上用于检测病原微生物的主要方法。由于 c DNA探针与临床样品中非相关核酸有一定的非特异性结合 ,尤其是检测粪便、尿液等…  相似文献   

口蹄疫3ABC蛋白基因的克隆与序列分析的研究     

龚振华  郑增忍  刘俊辉  陆明哲  郭福生  蒋正军  王玉东  张衍海  黄秀梅  李葳  李玉清 《中国动物检疫》2003,20(11):25-27

采用RT—PCR扩增FMDV的3ABC蛋白DNA，将其与pUCm—T栽体连接，构建pUCm—3ABC重组质粒，序列分析表明，pUCm—3ABC重组质粒的插入DNA与多种血清型FMDV的相同DNA区段有较高的同源性，提示可进一步用pUCm—3ABC重组质粒研究FMDV3ABC蛋白的表达抗原。  相似文献   

用聚合酶链反应（PCR）检测对虾杆状病毒   总被引：3，自引：0，他引：3  

郭福生  孙淑芳  徐瑞  吴时友  姚龙涛  徐菊洪 《中国动物检疫》1994,11(6):5-6

用聚合酶苗反应（PCR），对36份养殖中国对虾，13份海水、虾池底泥、饵料生物及其它养殖环境中的甲壳动物进行了杆状病毒检测，共检出带毒虾23份，带毒海水1份。电子显微镜技术证实了检测的可靠性。  相似文献   

鸵鸟新城疫实验病理学研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

尹燕博  单虎  王建琳  刘福辰  田振宇  将正军  郭福生  陆明哲 《中国兽医学报》2008,28(8)

用鸡源新城疫(ND)强毒株F48E9和鸵鸟源新城疫强毒株O-XJ99-12,对不同免疫状态下2~4月龄鸵鸟进行动物试验。动物发病后经剖检、组织切片、病毒分离等方法证实:鸵鸟源和鸡源新域疫病毒(NDV)毒株,经静脉和黏膜感染非免疫鸵鸟,均可引起特征性的鸵鸟ND症状和病变,对鸡胚致病力强的NDV毒株,对非免疫鸵鸟的致病力也强;鸵鸟ND的免疫临界点,HI抗体效价最低为5log2。  相似文献   

应用RT-PCR方法快速检测水泡性口炎病毒   总被引：2，自引：0，他引：2  

王海霞郑增忍  龚振华张彦明孙淑芳  李葳李玉清  蒋正军郭福生 宫云浩 《中国动物检疫》2004,21(3):24-26

针对水泡性口炎病毒(VSV)的两种血清型设计了2对引物，建立RT-PCR方法，用于检测VSV。VSV接种细胞出现明显的细胞病变，经RT-PCR检测为阳性，而检测口蹄疫、猪水泡病均为阴性，说明引物具有较好的特异性。  相似文献   

己烯雌酚完全抗原的合成和多克隆抗体的制备   总被引：3，自引：0，他引：3  

曲志娜  刘爽  路平  雷利辉  陈德坤  李葳  孙淑芳  张衍海  郑增忍  郭福生  蒋正军 《中国兽药杂志》2005,39(1):6-11

采用混合酸酐法,将己烯雌酚与牛血清白蛋白或卵清蛋白偶联形成完全抗原.经紫外分光光度计扫描鉴定,并通过聚丙烯酰胺电泳实验,推算出牛血清白蛋白与DES-HS的结合比是1:25～1:30.以己烯雌酚-牛血清白蛋白为抗原免疫家兔,制备出多克隆抗体,经酶联免疫吸附试验和琼脂扩散试验进行鉴定,并采用酶联免疫吸附方法进行效价测定,抗血清效价均超过了1:10 000.  相似文献   

用RT—PCR检测新城疫病毒的研究   总被引：3，自引：1，他引：2  

龚振华  马育芳  蒋正军  尹燕博  李葳  蔡丽娟  孙淑芳  郭福生  马洪超 《中国动物检疫》1998,15(2):5-8

用反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测新城疫病毒（ＮＤＶ）。研究结果表明ＲＴ－ＰＣＲ可检测出Ｆ４８Ｅ９株、Ｌａｓｏｔａ株、Ⅰ系疫苗株、Ｌ株、ＳＹ１株等５株ＮＤＶ尿囊液为阳性,其敏感性可测至１０－３倍稀释尿囊液病毒。ＲＴ－ＰＣＲ还能直接检测出发病鸡气管中的ＮＤＶ。  相似文献   

用PCR技术检测牛胎儿弯曲杆菌     

秦贞奎  杨维长  侯艳梅  郭启祥  郭福生  宫云浩 《中国动物检疫》1993,(6):15-17

在国内首次用PCR技术检测牛胎儿弯曲杆菌(Campylobacterfetus),试验结果表明,灭菌生理盐水中的胎儿弯曲杆菌胎儿亚种或性病亚种均可检出;而空肠弯曲杆菌、葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌等均为阴性。本法特异性和灵敏度很高,甚至可检出样品中的一个菌体。应用前景良好。  相似文献   

抗PRRSVGP5和M蛋白独特型抗体替代抗原诱导机体产生中和抗体的研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

周作红  管远红  龚振华  李葳  刘俊辉  王玉东  郭福生  郑增忍  蒋正军 《中国动物检疫》2007,24(7):23-24

制备猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗独特型抗体(Ab2),探讨Ab2替代抗原对机体免疫调节作用的研究。用纯化的PRRSV-GP5(GP5-Ab1)蛋白和抗PRRSV-M(M-Ab1)蛋白单抗免疫大白兔,当免疫血清琼扩效价达1:16以上,加强免疫后心脏采血分离血清,分别纯化兔抗PRRSV-GP5IgG(GP5-Ab2)和抗PRRSV-MIgG(M-Ab2)血清,分别用GP5-Ab2、M-Ab2以及GP5-Ab2与M-Ab2混合型三种分别免疫未免PRRS疫苗的小猪,同时设PRRS弱毒苗、灭活苗和空白组作对照,免疫后21d采集猪血清,间接ELISA检测免疫Ab2和PRRS疫苗的猪血清全为阳性,空白组仍然为阴性。经细胞中和试验证明免疫Ab2及PRRS疫苗的猪血清都具有中和抗体,说明Ab2在体内具有替代PRRSV的作用诱导机体产生具有中和效应的中和抗体,从而起到保护机体免受PRRSV的感染作用,为猪繁殖与呼吸综合征病新型疫苗的研究提供了新的思路。  相似文献