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对黑龙江省几家实验动物中心使用的饲料进行了微生物污染检验。取样后第1d细菌总数为1.11×103~8.74×103个/g饲料,符合要求;取样后第7d细菌总数为1.02×105~7.00×106个/g饲料,超出规定标准约1个数量级。霉菌检验结果,取样第1d霉菌数为1.00×102~2.50×102个/g饲料,超出规定标准;取样后第7d,霉菌数(3.10×102~4.10×103个/g饲料)明显增加。大肠杆菌及沙门氏菌检验结果,取样后第1d,大肠肝菌数为0~3×101个/g饲料,取样后第14d全部超标。取样14d后沙门氏菌阳性率为40%,沙门氏菌阴性的料样,厌氧菌检出率为50%,说明黑龙江省实验动物饲料微生物污染比较严重,在目前实验动物饲料生产不规范的情况下,饲料的贮存最好不要超过7d。 相似文献
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为研究H9N2亚型禽流感病毒(AIV)对海兰白鸡的感染和传播特性,将80只4周龄海兰白鸡随机分为8组,每组10只,其中感染组5只,同居组5只,采用100~107EID50/0.4 m LH9N2 AIV以滴鼻和点眼方式攻毒,24 h后放入同居组。感染14 d内每天进行临床观察,采集咽拭子和泄殖腔拭子用于病毒分离,感染后7、10、14 d测定HI抗体滴度。结果表明:4周龄海兰白鸡感染H9N2 AIV后未出现明显的临床症状;感染剂量为100~101EID50/0.4 m L的感染组和同居组均未分离到病毒;感染剂量为102~103EID50/0.4 m L的感染组排毒期为2~6 d,同居组排毒期为4~6 d;感染剂量为104~107EID50/0.4 m L感染组排毒期为1~6 d,同居组排毒期为2~8 d;感染剂量为102~107EID50/0.4 m L感染组和同居组鸡分别于感染后7和10 d开始产生抗体,第14天感染组和同居组鸡的平均抗体滴度分别为(7.8±1.4)log2和(6.7±1.1)log2。结果显示该毒株使4周龄海兰白鸡全部感染的最低感染剂量为103EID50/0.4 m L,以106EID50/0.4 m L感染鸡,能刺激感染组与同居组产生较高的HI抗体,表明106EID50/0.4 m L H9N2亚型AIV能在海兰白鸡体内建立有效感染和传播。 相似文献
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本研究旨在获得伏马毒素B1特异性适配体并利用其和胶体金的作用建立伏马毒素B1的快速检测方法。通过非固定靶标的指数富集配体系统进化技术筛选获得伏马毒素B1的适配体,并用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法测定所获适配体的亲和力和特异性,建立基于适配体的胶体金快速定量检测方法。结果表明:筛选得到的伏马毒素B1适配体F102亲和力解离常数为(42.1±4.0)nmol/L;建立的胶体金检测方法简便、快速、特异性强;样品检测结果与液相色谱结果的相对误差低于15.7%。因此,本研究利用筛选得到的适配体建立了可用于谷物和饲料中伏马毒素B1含量的快速定量检测方法。 相似文献
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用鸡副嗜血杆菌国际标准株(HPGA-221、C668)分别接种1-10个家系的BWEL-SPF鸡6日龄鸡胚,观察攻毒后16-30小时鸡胚死亡的情况。结果,第5、7、8家系死亡率为100%;1、4、6家系死亡率为90%;2、3、9、10家系死亡率为80%-85%,10个家系HPG平均死亡率为90.5%。对照组(HWL-SPF鸡胚)平均死亡率为90%。从而评估BWEL-SPF鸡群每个家系对鸡副嗜血杆菌(HPG-A221、C668)的敏感性。 相似文献
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鸡IL—2基因的克隆及序列测定 总被引:4,自引:0,他引:4
根据已发表的鸡白细胞介素-2(IL-2)基因序列设计引物,用RT-PCR方法从新翅疫病毒感染的雏鸡脾淋巴细胞培养物中扩增出鸡的IL-2基因cDNA,并进行序列测定,为进一步表达鸡IL-2并深入研究其功能奠定了基础。 相似文献
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应用RT-PCR方法扩增鹅源星状病毒(goose astrovirus,GoAstV)HLJ01株的ORF2基因,将扩增产物克隆至pET32a原核表达载体,并在大肠埃希菌BL21进行表达。通过SDS-PAGE分析表明,重组菌诱导后得到大小约为106 ku的ORF2蛋白,与理论值相符。将诱导表达的蛋白经镍亲和层析柱纯化后免疫小鼠制备多克隆抗体,并测定其抗体效价。Western-blotting结果显示,ORF2蛋白可被鼠抗GoAstV阳性血清识别。序列分析表明,该毒株与其他鹅源星状病毒参考毒株的核苷酸相似性介于37.8%~99.3%之间,HLJ-1801分离株与已发表的8株鹅源星状病毒毒株位于同一分支,表明其属于一种新型星状病毒成员。利用原核表达系统成功高效地表达了GoAstV ORF2蛋白,融合蛋白以包涵体形式存在。本试验成功获得了纯化的ORF2重组蛋白和小鼠抗GoAstV多克隆抗体,为进一步研究ORF2蛋白对星状病毒感染的诊断试剂的研发奠定了基础。 相似文献
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2012年猪嵴病毒流行病学调查及3D基因的遗传变异分析 总被引:1,自引:0,他引:1
为了解猪嵴病毒(PKV)的流行及变异情况,本研究根据PKV的3D基因保守区域核苷酸序列设计一对特异性引物,并利用RT-PCR方法对2012年来自24个省市84个猪场的病料样品共计236份进行3D基因的检测。结果显示:在236份病料中,共有63份为PKV阳性,阳性率为36.69%;而在检测的84个猪场中,共有36个猪场显示PKV阳性,猪场阳性率为42.85%。此外,对2012年分离的9个PKV部分3D基因进行测序分析,并与GenBank中登录的人、牛、猪以及鼠等嵴病毒株相关序列进行遗传变异分析。结果表明9个PKV 3D基因与国内外其他PKV株无论是在核苷酸水平上还是在氨基端水平上均具有较高的同源性,表明PKV的3D基因具有较高的保守性,可以作为病原检测的靶基因。 相似文献
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