坏死梭杆菌白细胞毒素研究进展     

冯二凯  陈立志  刘晓颖 《动物医学进展》2009,30(7):68-71

坏死梭杆菌白细胞毒素(Lkt)是一组对反刍动物白细胞特别是多形性白细胞(PMNs)有特异性毒性作用的细胞外毒素,被认为是坏死梭杆菌感染动物的主要毒力因子。白细胞毒素的物理稳定性较低,高温或极端pH环境中都能使白细胞毒素活性丧失。研究发现,白细胞毒素开放阅读框(ORF)全长9 726bp,由3个基因(lktB、A和C)组成,结构基因是第2个基因(lktA)。白细胞毒素对白细胞的毒性作用有剂量依赖性,并且溶血活性较低,不能在豚鼠猪皮肤上形成皮肤坏死症状。  相似文献   

坏死梭杆菌外膜蛋白基因的克隆与表达     

徐晶  陈立志  刘晓颖  冯二凯  汪孙杰  曹阅 《中国畜牧兽医》2013,40(6):57-60

依据GenBank中登录的坏死梭杆菌外膜蛋白(outer membrane protein,OMP)基因序列,设计1对引物进行PCR扩增OMP片段并克隆至pET-28a中,构建原核表达重组质粒pET-28a-OMP。将pET-28a-OMP转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态中,表达含2个His的重组蛋白。SDS-PAGE和Western blotting分析结果表明,该重组蛋白分子质量为93 ku,为包涵体表达,具有反应原性。本试验结果为坏死梭杆菌OMP免疫机制的研究提供了基础数据。  相似文献   

翘嘴红鲌成鱼养殖模式与技术     

陈立志  陆正年  常泰 《科学种养》2010,(4):40-40

翘嘴红鲐俗称翘嘴鲐、太湖白鱼等,营养丰富且可入药,市场需求量日趋增大。为有效保护和合理开发这一名贵品种,近几年我们进行了翘嘴红鲐的苗种繁育和商品鱼养殖研究,积累了一定的经验,现将翘嘴红鲐的成鱼养殖技术介绍如下,供养殖者参考。  相似文献   

重庆南山景区林木黑翅土白蚁为害调查     

陈静  陈立志  杨世璋  康勇  张岚 《西南园艺》2013,(11):28-29

采用随机抽样法,对重庆市黑翅土白蚁为害比较普遍而严重的南山进行调查。结果显示,黑翅土白蚁为害的主要树种有：樟树、桉树和马尾松等7种,其中以樟树受害最严重,受害率达70．12％。调查还发现,黑翅土白蚁来源多样,存在寄主差异性、地区差异性和气候差异性等为害特点。  相似文献   

致病性鹿源坏死梭杆菌分离鉴定   总被引：6，自引：0，他引：6  

王克坚  张洪英  陈立志 《中国预防兽医学报》2000,22(2):84-87

应用厌氧培养技术,从患坏死杆菌病鹿的病变坏死组织和脓汁中仞出一种主要的病原菌,通过细菌形态学、染色反应、培养特性、生化试验、血清学反应等鉴定方法,确定该病原分离株为严格厌氧性坏死棱杆菌,分型鉴定为Ａ、ＡＢ和Ｂ型;实验动物感染证明Ａ和ＡＢ型坏死梭杆菌为致病性菌株。  相似文献   

贪食迈阿密虫(M.avidus)对4种海水养殖鱼类组织匀浆液的趋化性     

林能锋  陈立志  曾红 《福建畜牧兽医》2021,(2):11-13

通过对贪食迈阿密虫(M.avidus)对4种养殖鱼类组织匀浆液的趋化特性进行研究,以探讨贪食迈阿虫对养殖鱼类的侵染特点.试验结果显示,贪食迈阿密虫对大黄鱼、大菱鲆、黄姑鱼、鲈鱼的眼、脑、脑脊液匀浆液有强烈的趋化效果(P＜0.01),对皮肤黏液、鳃、肝、肌肉、肾组织匀浆液的趋化性较弱(P＞0.05);对不同鱼类组织匀浆液...  相似文献   

坏死梭杆菌致家兔肝脓肿模型的建立     

孟祥玉  韩坤  于莹  陈立志 《动物医学进展》2019,40(5):18-21

采用梅花鹿源坏死梭杆菌HNFnf分离株以不同浓度菌量于家兔耳缘静脉注射,尝试建立家兔感染坏死梭杆菌肝脓肿模型。通过观察家兔临床症状、剖检病变和病理组织学观察,建立了坏死梭杆菌分离株家兔感染模型。攻毒家兔7 d内全部死亡,死亡前家兔表现为采食减少、喜卧、后肢无力、消瘦等。尸体进行病理剖检可见明显病理变化,肺脏表面大量出血,且伴有结节样病变;肝脏质地较软,出现均匀的灰黄脓肿;脾脏严重肿大,呈暗紫色;肾脏多处出血斑;严重的肠道胀气,膀胱积尿。病理组织学观察可见肾脏近曲小管与远曲小管之间有少量的粉红色纤维素渗出;肝脏中形成明显的染色深蓝的脓肿结构,其周围有大量细胞核深染的炎性细胞浸润,肝脏肝小叶固有结构消失,肝细胞脂肪变性;肺泡和支气管内有大量红染的纤维素渗出。采取耳缘静脉攻毒方式,该细菌对家兔的最低致死量为1.2×10¹⁴ CFU。  相似文献   

生物反应器中PRRSV TJM株在Marc-145细胞上最佳增殖条件研究     

于竞杰  陈立志 《中国兽药杂志》2016,50(9):1-5

为了在Marc-145细胞上获得更高滴度的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)TJM株,对细胞培养条件、细胞接种量、微载体的用量以及病毒培养时间等条件进行了优化。结果表明,利用生物反应器悬浮培养Marc-145细胞在血清为金源康且含量为10%、培养基为DMEM、细胞接种密度为20~30细胞/球、微载体为5 g等条件下生长状态最好;病毒最佳培养时间为27~36 h,病毒增殖效果好且能够达到最高的病毒滴度。本试验为微载体培养条件下大规模生产PRRSV-TJM株疫苗奠定了一定理论基础。  相似文献   

坏死梭杆菌白细胞毒素基因的BSBSE片段的原核表达及抗血清制备     

张秀华  陈立志  赵利芳  刘晓颖  路伟 《中国预防兽医学报》2008,30(11)

本研究以国内分离的牛源坏死梭杆菌F4基因组DNA为模板,应用PCR方法扩增BSBSE片段,克隆到pMD18-T载体上,鉴定并测序正确后,构建pET32a-BSBSE表达质粒,转化E．coli BL21（DE3）经IPTG诱导、SDS—PAGE检测重组蛋白表达、Western blot检测重组蛋白反应原性。以该重组蛋白免疫兔制备抗血清,经间接ELISA检测抗血清效价。结果表明,PCR扩增得到1100bp的BSBSE片段,以此片段构建了pET32a—BSBSE表达质粒,经诱导后获得了目的蛋白表达,以Western blot检测该重组蛋白证明为本研究的目的蛋白,并且与抗体具有反应原性。以间接ELISA检测该重组蛋白免疫兔制备的抗血清效价达10^5。研究结果将为坏死梭杆菌毒力因子（1kt）的深入研究奠定了物质基础。  相似文献   

貉源肺炎克雷伯菌的分离鉴定及药敏试验     

韩坤  吕娇  于莹  王洋  王雅文  许皓  陈立志  冯二凯  白雪  闫喜军 《中国畜牧兽医》2019,(4)

为确定河北昌黎地区某养殖场貉呼吸道疾病引起死亡的病因,本研究从送检的貉病料肺脏中分离到1株革兰氏阴性短杆菌,并对分离株进行形态学观察、16S rRNA序列测序及全自动细菌生化鉴定仪鉴定,在此基础上完成了分离株的分型、人工感染小鼠试验及药敏试验等。结果显示,该分离株为非K1/K2型肺炎克雷伯菌,并将其命名为CLKp18;该分离株的16S rRNA基因序列与GenBank中登录的多株肺炎克雷伯菌参考株同源性均高达99%。Vitek全自动细菌鉴定仪结果表明,该菌株与肺炎克雷伯菌鉴定标准相似度为99%。人工感染小鼠试验结果显示,试验组小鼠在攻毒后6 h开始出现临床症状。无菌取出死亡小鼠的肺脏、肝脏、脾脏及肾脏,划线涂板,均可分离到该菌,表明该分离株感染小鼠后,能侵入到小鼠体内多个组织器官,引起不同程度的病变,尤以肝脏和肺脏病变较为明显,对小鼠的半数致死量(LD_(50))为2.17×10~7 CFU。药敏试验结果表明,该菌对单环内酰胺类、氯霉素类、氨基糖苷类、四环素类、磺胺类及大部分头孢类耐药,但对阿米卡星、阿莫西林/克拉维酸、头孢他啶和亚胺培南敏感。本研究结果确定了引起本次貉呼吸道症状疾病的致病菌为非K1/K2型肺炎克雷伯菌,且该分离株有较强的致病性和多重耐药性。本研究为临床治疗由该菌引起的貉肺炎提供了参考依据。  相似文献