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本研究通过对鸡败血支原体(MG)强毒株黏附素GapA的N端(98aa-322aa)高变区作为免疫原免疫小鼠.利用Bac-to-bac系统构建GapAN重组杆状病毒,感染Sf9昆虫细胞,以作为检测抗原,筛选获得5株抗GapAN端的单克隆抗体:3D4、5810、185、1D7和4B3。经部分免疫学特性鉴定,5株单抗具备良好的免疫反应性,并且在免疫荧光试验及Western-blot检测过程中发现这些单抗针对的抗原表位存在明显差异,这些单抗的成功制备为下一步深入研究MG的黏附特性奠定了基础。 相似文献
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低温及L—精氨酸对肉用鸡腹水综合征的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
用高能日粮饲养400只1日龄AA肉用鸡,14日龄时保优淘弱,随机分为3组,其中100只为常温(20℃)对照组;150只为低温(11℃)试验组;100只为低温(11℃)及日粮添加10g/kgL-精氨酸试验组,用单因子低温诱发肉用鸡腹水综合征,并不于同时间用红细胞压积、腹水心脏指数和腹水阳性率作为常规指标来判定肉用鸡腹水综合征,结果表明,低温组复制出肉鸡腹水综合征动模型,其发病率为9.33%,对照组为3.00%,与低温组比较差异极显著(P<0.01);L-精氨酸组腹水综合征发病率为3.00%。与低温组比较差异极显著(P<0.01)。 相似文献
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目前在美国,爆发禽痘疾病有多种原因,即使家禽已被免疫也不例外。最近的一个报道中,伊利诺伊州立大学的DeokiTripathy博士指出:导致发病的一个最主要的致病因素是病毒基因组组成的改变。在家禽疾病中,REV和MDV都是免疫抑制性疾病,常导致抗禽痘免疫力的降低。特别在家禽遭受各种应激,如换羽、一些细菌或IBV等非相关性疾病的继发感染时。禽痘病毒基因组较大,由此引起了一些研究,包括在痘病毒基因组中插入网状内皮增生症(REV)或马立克氏病(MDV)的基因组,会导致禽痘的发生。这些研究成果表明,在野生状态下,病毒的遗传物… 相似文献
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转化型人参皂苷抗MDV及诱导肿瘤细胞凋亡的作用初探 总被引:2,自引:3,他引:2
以转化型人参皂苷的8个组,按12.5μg·mL-1的剂量,在体外鸡胚成纤维细胞上进行抗MDV-RB1B强毒株空斑减数试验和诱导肝癌7402细胞株、大鼠脑胶质瘤细胞C6株细胞凋亡试验,用光学显微镜观察、琼脂糖凝胶电泳检测分析DNA损伤。结果表明:转化型人参皂苷6、7号组,在感染阻断、增殖抑制、直接杀灭3种方式的抗MDV空斑减数率都达到阿昔洛韦(ACV)抗MDV空斑减数率的80%,转化型人参皂苷4、6号组对MDV-RB1B株的直接杀灭作用与ACV的杀灭作用相同;转化型人参皂苷8号组诱导肝癌7402株细胞48h后,有60%的瘤细胞凋亡,对大鼠脑胶质瘤C6株细胞也有诱导凋亡的作用。 相似文献
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从上海市不同区县采集352份犬猫鼻液、痰液、尿液及宠物饲料样品进行检测,以16s rRNA、IS6110、Rv3878、IS1081、ESAT-6和CFP-10等为目的基因设计引物,结果显示:非健康犬猫样品DNA中,ESAT-6和CFP-10基因检出率分别为43%和38.6%,而致病性分枝杆菌特异的引物Rv3878、IS6110和IS1081基因不能被检出;而在健康犬猫样品DNA中,所有基因的检出率均很低。本研究提示:犬猫可能携带有非结核分枝杆菌,并且患病的犬猫被非结核分枝杆菌污染的几率较健康犬猫更大。 相似文献
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鸡败血支原体GapA高变区在大肠杆菌中高效表达 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究通过对鸡败血支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)强毒株黏附素GapA的N端(98aa~322aa)和C端(820aa~1 115aa)2个高变区进行克隆,并进行原核表达,制备获得抗GapA多抗,结果显示,GapAN获得高效表达,制备获得的抗体对MG黏附真核细胞有一定的抑制作用,这说明GapA对MG的黏附有着非常重要的影响.这一抗原成分的成功表达和抗体的制备为研制特异性单抗和筛选GapA缺失型突变株奠定了坚实的基础;并且利用不同毒株在GapA N端功能区的基因序列的明显差异,使基于该抗体建立新型快速的免疫学方法以鉴别MG强弱毒株亦将成为可能. 相似文献
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非洲猪瘟病毒pS273R蛋白水解酶单克隆抗体制备 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究旨在制备非洲猪瘟病毒(ASFV) S273R蛋白的特异性单克隆抗体。本研究以原核表达的非洲猪瘟病毒重组S273R蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合获得杂交瘤细胞。结果显示:基于纯化的S273R蛋白建立的间接ELISA方法对杂交瘤细胞进行筛选和亚克隆,获得了4株可稳定分泌抗ASFV S273R蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并通过免疫印迹(Western blot)和免疫荧光试验(immunofluorescence assay,IFA)测定了其免疫特性。4株单克隆抗体亚类均为IgG1型,轻链均为κ链。本研究获得的非洲猪瘟病毒S373R蛋白单克隆抗体可为进一步研究ASFV pS273R的生物学功能及基因缺失毒株的鉴别诊断和疫苗开发提供技术储备。 相似文献
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设计1对引物对鸡败血支原体R株mga0553基因进行PCR增,并通过双酶切定向克隆到原核表达载体pET-32a(+),获得重组质粒pET-32a-mga0553.重组质粒经诱导表达并取表达产物进行分析,结果显示,mga0553基因获得了融合表达.Western-blotting证实,表达产MGA_0553与MGF阳性血清具有免疫反应性;生长抑制试验表明,鼠抗MGA_0553血清对MG细胞的增殖具有抑制作用;间接免疫荧光染色检测结果显示:MG细胞呈现较强的绿色荧光.研究结果表明mga0553基因编码蛋白MGA_0553是MG的一种膜相关蛋白. 相似文献