淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒实时荧光RPA快速检测方法的建立     

熊炜  陈鸿军  魏晓锋  王艳  胡建华  黄忠荣 《中国动物检疫》2019,36(6):92-95

针对淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(lymphocytic choriomeningitis virus,LCMV)基因保守序列,设计特异性引物和荧光探针,建立了LCMV实时重组聚合酶等温扩增(real-time recombinase polymerase amplification,real-time RPA)检测方法。该检测方法具有良好的特异性,与LCMV同步检测的其他鼠病毒均未出现交叉反应;该检测方法具有与RT-PCR一样的高敏感性;通过对LCMV感染鼠组织样本和LCMV阴性鼠血清样本的检测,证实建立的实时荧光RPA方法具有良好的稳定性和可靠性。与现有的核酸检测方法相比,该实时荧光RPA检测方法在核酸上样20 min内即可判读结果,可满足啮齿类动物LCMV快速检疫需要。  相似文献   

非洲猪瘟病毒CRISPR/Cas9敲除技术研究进展   总被引：2，自引：0，他引：2  

任名  郭晓宇  邬静  李金祥  朱鸿飞  陈鸿军 《中国动物传染病学报》2018,(4)

非洲猪瘟(african swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起的一种急性、烈性、高度接触性传染病,严重危害着全球养猪业。目前尚无商品化ASFV疫苗用于ASF的防控。传统ASFV疫苗研究存在不同程度的局限性。通过建立ASFV的CRISPR/Cas9基因敲除技术平台,将为非洲猪瘟病毒基因功能研究提供便捷的工具。  相似文献   

鸡群发生呼吸道疾病的原因     

Jurgen Emele  陈鸿军 《中国家禽》2002,24(7):33-38

长期以来,鸡群中发生的呼吸道疾病是一类大型的、在经济上占有重要地位的疾病.Jordan把该类疾病描述为"主要出现呼吸道的临床症状和/或大体病变,而不伴有其他器官和组织病变".有效控制该病的先决条件是对其致病因子、流行病学、病理学和诊断学方法的了解.  相似文献   

环境低温及L—精氨酸对肉鸡腹水综合征的影响   总被引：3，自引：0，他引：3  

陈鸿军  韩博 《中国家禽》2001,23(18):8-10

本试验用高能日粮饲养400只1日龄AA肉鸡,14日龄时保优淘弱,随机分组,其中100只为正常温度(20℃)对照组,150只为低温(11℃)试验组,100只为低温(11℃)试验鸡日粮添加1%L-精氨酸组,用单因子低温诱发肉鸡腹水综合征,并于不同时间用红细胞压积、腹水心脏指数和腹水阳性率作为常规指标来判定肉鸡腹水综合征.结果表明,环境温度为11℃(13.5～8℃)的条件下,低温试验组肉鸡复制出腹水综合征动物模型,累计腹水综合征发生率为9.33%,显著地高于正常对照组3%(p＜0.01);低温试验肉鸡日粮添加1%L-精氨酸使腹水综合征发生率为3%,与低温试验组比较差异显著(p＜0.01).试验显示,L-精氨酸可降低肉鸡腹水综合征的发生率.  相似文献   

提高禽饲料利用率的营养学方法   总被引：1，自引：0，他引：1  

D Narahan  陈鸿军  胡清海 《中国家禽》2001,23(11):26-28

RAPD技术具有操作简便快捷、检测面广、样品用量少、灵敏度高的优点。RAPD技7l专不仅应用于动物遗传变异及遗传多样性检测，而且还被应用于群体遗传关系的分析，数量性状位点的连锁分析等方面。本文从7个方面综述了RAPD技术在家禽育种中的应用。  相似文献   

鸡败血支原体mga0553编码基因的克隆与表达     

高继业  高勤学  陈鸿军  李继祥  丁铲 《中国家禽》2008,30(24)

设计1对引物对鸡败血支原体R株mga0553基因进行PCR扩增,并通过双酶切定向克隆到原核表达载体pET-32a（＋）,获得重组质粒pET-32a-mga0553。重组质粒经诱导表达并取表达产物进行分析,结果显示,mga0553基因获得了融合表达。Western—blotting证实,表达产物MGA_0553与MG阳性血清具有免疫反应性;生长抑制试验表明,鼠抗MGA0553血清对MG细胞的增殖具有抑制作用;间接免疫荧光染色检测结果显示：MG细胞呈现较强的绿色荧光。研究结果表明mga0553基因编码蛋白MGA_553是MG的一种膜相关蛋白。  相似文献   

商品肉鸡胃肠道完整性的挑战     

李言彬  郑志明  陈鸿军 《猪业科学》2004,21(10):63-64

鸡的胃肠道早期发育得很不完善,若饲养管理不当,日后很多问题会发生。如果采取综合防制措施,损失将会大大减少。 为达到最佳生产性能(通常用一些参数来反映,如生长率、饲料转化率等),商品肉鸡的生产已变得非常精细。为了达到最佳的生产业绩,诸如禽舍建设、畜牧生产实践、疾病防  相似文献   

鸡毒支原体烯醇化酶的可溶性表达及检测     

沈欣悦  陈鸿军  陈丹清  于圣青  丁铲 《中国兽医寄生虫病》2010,18(3):26-31

烯醇化酶参与支原体糖酵解、细胞黏附及免疫调节等多种生命活动,对其开展功能研究有助于了解鸡毒支原体黏附及感染机制。本研究通过重叠PCR克隆获得鸡毒支原体烯醇化酶,经原核表达获得可溶性融合蛋白rMGEno,将纯化产物免疫BALB/c小鼠后制备获得特异性多抗。通过Western blot和ELISA检测发现,烯醇化酶在鸡毒支原体不同强弱毒株中高度保守,表达产量高,在鸡毒支原体参试各毒株的细胞膜中均有分布。这一表达产物的成功制备为深入研究鸡毒支原体烯醇化酶的生物学功能奠定了基础。  相似文献   

MDV CVI988/Rispens弱毒株VP22基因克隆和序列分析   总被引：3，自引：1，他引：3  

陈鸿军  秦爱建  丁铲  苗晋锋  张鑫宇  何秀苗  金文杰  刘岳龙 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》2003,24(4):5-8

血清I型马立克氏病病毒(MDV-1)的UL49h基因编码病毒被膜蛋白VP22在病毒的复制和传播过程中具有非常重要的作用.根据已发表的MDV-1 GA株的序列,从CVI988/Rispens弱毒株感染的鸭胚成纤维细胞中扩增VP22基因片段,结果获得大小为732 bp的PCR产物.将PCR产物克隆T载体并测序分析,结果发现,与经典强毒GA株相比,弱毒株CVI988的VP22存在3个定点突变和一个缺失性突变.缺失的位点亲水性强,并位于VP22主要的抗原决定簇区.结果证明强毒株与弱毒株的VP22存在明显差异,为利用CVI988 VP22的蛋白传导域传导目的蛋白奠定了理论基础.  相似文献   

非洲猪瘟病毒TaqMan探针法荧光定量PCR检测方法建立     

任名  牛婷婷  于婉琪  孙海伟  邬静  陈鸿军 《中国动物传染病学报》2020,(3):42-48

为建立一种快速、准确的非洲猪瘟病毒(ASFV)分子检测方法,以2018年8月分离的SY18毒株P72基因序列(GenBank登录号:MH713612.1)为参考毒株,人工合成质粒标准品,命名为pcDNA3-P72,基于该毒株P72基因序列,在1627~1876 bp处设计一对特异性引物和TaqMan探针,优化反应体系及条件,本研究成功建立了基于P72基因的TaqMan探针qPCR方法,并与OIE的特异性引物和TaqMan探针进行灵敏度、稳定性和特异性比较.结果显示:本研究建立的qPCR检测方法,标准曲线线性关系良好,R^2值可达到0.9932,灵敏性最低能检测到10 copies/μL,与OIE引物扩增灵敏度相当,比普通PCR方法高100倍.该方法重复性良好,批内和批间变异系数均小于1%.这一方法为我国非洲猪瘟疫情的快速确诊提供了必要的分子诊断工具.  相似文献