9型猪链球菌广东株的分离鉴定和基因序列分析   总被引：2，自引：1，他引：1  

李丽  黄良宗  谢博  张海龙  顾万军 《中国畜牧兽医》2018,(4)

为了解9型猪链球菌广东分离株毒力因子基因型、基因变异和进化情况,本试验采集发病猪脑脊液、关节液、脾脏、肝脏、淋巴结进行细菌分离培养和生化鉴定,采用PCR方法鉴定其血清型及部分毒力基因,对cps9D、gdh、gapdh与orf2基因进行序列测定和分析,并构建系统发育树。结果显示,分离菌镜检为革兰氏阳性链状球菌,在鲜血琼脂平板中呈β溶血,可发酵大多数糖类,能成功扩增cps9D基因,含重要的保守基因gdh及毒力基因gapdh和orf2,表明分离菌株为9型猪链球菌。分离菌株cps9D、gdh、gapdh、orf2基因核苷酸序列与GenBank上国内外参考菌株的同源性分别为95.9%~100.0%、98.6%~99.8%、98.7%~99.6%和95.5%~99.9%,说明分离菌株与国内外其他9型猪链球菌毒株核苷酸同源性都较高,且与国内外的流行毒株基本一致,未发生太大的变异。系统发育树表明,分离株与国内外来源不同的猪链球菌分离株同源性高,亲缘关系密切。  相似文献   

七种免疫调节剂对鸭接种禽流感疫苗后体液免疫应答的促进作用   总被引：2，自引：0，他引：2  

司兴奎  陈建红  张济培  顾万军 《养禽与禽病防治》2007,(10)

为筛选出对鸭接种禽流感疫苗后具有免疫促进作用的免疫调节剂,对接种禽流感H5亚型油乳灭活疫苗后的鸭分别注射或投喂禽源干扰素、人源干扰素、黄芪多糖、益生素、人参皂苷、赐力健及增免散7种免疫调节剂,观察禽流感疫苗特异性的体液免疫的促进作用。研究结果表明,饲喂人参皂苷或注射禽源干扰素对接种禽流感疫苗的试验鸭有明显的促进作用,其中人参皂苷在首免后3周发挥促进作用,而禽源干扰素约在首免后5周表现出一定的促进作用。  相似文献   

副猪嗜血杆菌的分离鉴定   总被引：10，自引：0，他引：10  

冼琼珍  黄耿森  王淑敏  顾万军  黄良宗  林雪玲 《中国兽医杂志》2006,42(3):27-29

副猪嗜血杆菌病是由副猪嗜血杆菌（HPS）引起猪的以纤维素性浆膜炎、多发性关节炎和脑膜炎为特征的传染病。随着养殖规模的不断扩大和引进国外种猪，副猪嗜血杆菌病在我国猪场的病发率逐年上升。HPS血清型复杂，目前已知15个血清型，但各国各地流行的血清型不尽相同，且各型之问缺乏交叉保护，因此分离HPS地方菌株，了解其流行血清型，对地区预防和控制HPS有着重大的临床意义。由于HPS对培养条件较为苛刻，临床病料分离培养HPS有一定的难度，目前国内分离HPS报道不多，本文对广东地区疑似副猪嗜血杆菌病病料分离并鉴定了3株副猪嗜血杆菌，报道如下。  相似文献   

珠江三角洲地区猪传染性胸膜肺炎病原诊断及血清学调查   总被引：2，自引：0，他引：2  

王淑敏  冼琼珍  顾万军 《黑龙江畜牧兽医》2001,(12):29-30

近年来 ,在珠三角地区的一些猪场 ,发生猪急性、亚急性死亡 ,病理解剖呈现坏死性纤维出血性肺炎 ,伴有纤维素性胸膜肺炎 ,少数猪只伴有关节炎、心内膜炎和不同部位的脓肿等病变。采取肺、气管分泌物、肺病变部位及病灶 ,用ＳＢＡ培养基、巧克力培养基分离培养进行病原学诊断 ,遂进行血清学调查。现报告如下。1　材料与方法1.1　病料采取病死或急宰病猪、气管、肺分泌物、胸腔漏出液、有病变肺及肺部结节。 6头猪、2 3份病料。来自于三个养猪场。1.2　培养基ＳＢＡ培养基 ,巧克力琼脂培养基 ,2 %尿素琼脂培养基 ,糖发酵培养基 (乳糖、木糖、…  相似文献   

不同毒力鸭肝炎病毒对雏鸭肝脏抗氧化功能的影响   总被引：10，自引：1，他引：9  

王丙云  赵海全  冯军  陈至胜  黄兴国  计慧琴  李妍秀  顾万军 《中国兽医学报》2002,22(5):450-452

用不同毒力株鸭肝炎病毒感染雏鸭复制病理模型 ,研究雏鸭感染病毒性肝炎后肝脏抗氧化功能的变化。将 16 0只刚出壳的北京鸭 ,经 1周适应性饲养后 ,随机均分为对照组、弱毒株组、中毒株组和强毒株组。在攻毒组的每只雏鸭背部分别肌肉注射 0 .3m L弱毒株、中毒株和强毒株的稀释液。攻毒后 1、3、5、7d剖杀雏鸭 ,采集其肝组织 ,测定鸭肝组织中过氧化氢酶 (CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH- Px)及超氧化物歧化酶 (SOD)的含量。结果表明 ,中毒组和强毒组的 CAT含量在攻毒后 1d便显著或极显著低于对照组 ,但弱毒株组在攻毒后的 5 d才显著低于对照组。攻毒后1d,雏鸭肝组织中 SOD含量开始下降 ,3d后显著或极显著低于对照组。攻毒后 5 d,各攻毒组雏鸭肝组织中的 GSH-Px的含量亦显著降低。这些抗氧化酶含量的降低 ,说明感染鸭肝炎病毒后雏鸭清除自由基的能力下降 ,自由基参与了鸭病毒性肝炎的发病过程。  相似文献   

猪细小病毒分子生物学及防制研究进展     

黄良宗  梁金华  顾万军  罗满林 《黑龙江畜牧兽医》2003,(9):64-65

猪细小病毒(porcine parvovirus，PPV)是目前危害养猪业的一种严重的繁殖障碍性疾病．综述了PPV生物学特性、基因组结构和诊断技术及疫苗研制等方面的研究进展。  相似文献   

体细胞多位点基因打靶技术的研究     

唐冬生  田允波  顾万军  施家琦 《广东畜牧兽医科技》2002,27(4):32-35

利用多拷贝序列作为靶位点进行多位基因打靶技术的研究，通过显微切割，菌落杂交，Southern杂交等方法获得人类D、G组染色体短臂多拷贝序列（DGMS），然后利用DGMS的构建含Neo/TK基因正负选择系统的基因打靶载体，采用电穿孔，G418和GCV筛选进行Neo基因的基因打靶，并经PCR、FISH定位，Neo基因表达等证实Neo基因定点整合到D、G组染色体短臂且表达，最终建立了一种有效的，多个安全位点的基因打靶技术，该技术可应于体外细胞和动动植物的转基因，甚至人类的基因治疗。  相似文献   

番鸭细小病毒ＭＤＰＶ—Ｑ株ＶＰ２蛋白基因的克隆与序列测定   总被引：3，自引：0，他引：3  

娄华  白挨泉  顾万军  杨德威  贺东升  刘福安 《中国预防兽医学报》2001,23(1):4-7

根据genebank中番鸭细小病毒（ＭＤＰＶ）的基因序列，设计了一种引物ＬＨＭＰ７／ＬＨＭＰ８，同时在这２条引物中分别加入２种限制性核酸内切酶SacⅡ和KpnⅠ的酶切位点，使扩增后的ＤＮＡ片段的两端，分别含有这２种酶的酶切位点。应用ＰＣＲ技术扩增了ＭＤＰＶ－株的ＶＰ２蛋白基因片段。将扩增后的ＶＰ２蛋白基因重组到pMD18-T质粒载体上，并插入片段进行序列测定，测定结果表明，我国分离的ＭＤＰＶ－Ｑ株基ＶＰ２蛋白基因序列与国外分离株的同源性达９７．９％。  相似文献   

猪源嗜麦芽窄食单胞菌16 S rRNA基因的克隆和序列分析   总被引：6，自引：0，他引：6  

张浩吉  谢明权  张健騑  覃宗华  蔡建平  顾万军 《中国兽医科技》2004,34(6):3-5

从临床病猪无菌采集抗凝血，抽提全血基因组DNA，用能够扩增大多数真细菌16 S rRNA基因的通用引物，扩增出长度为1502bp的嗜麦芽窄食单胞茵的16 S rRNA基因；该基因与国外报道的嗜麦芽窄食单胞茵部分临床和环境分离株核苷酸序列的同源性达99％以上。证实嗜麦芽窄食单胞菌可感染猪。  相似文献   

猪胸膜肺炎放线杆菌的分离及PCR诊断方法的建立   总被引：14，自引：3，他引：14  

梁金华  刘镇明  顾万军  王淑敏  冼琼珍  黄良宗 《中国预防兽医学报》2004,26(1):36-38

APXⅣA基因是新发现的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)的RTX毒素基因,本文通过PCR方法从APP标准血清1型及临床分离到的3株野毒株中扩增出长为442 bp的部分APXⅣA基因,而从其它引起猪呼吸道疾病的细菌中无法扩增出此片段.通过玻板凝集试验鉴定这三株野毒株为血清1型APP.所建立的PCR方法能检测的DNA量最高敏感度为28pg.表明本文所建立的对猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的PCR诊断方法具有较高的特异性和敏感性.  相似文献