苯酚/氯仿抽提法提取牛血与鸡血DNA部分条件的比较研究     

母童  陈佳萍  赵平  顾亚玲  冯小芳  陈亚飞  刘丽元  蒋秋斐  张娟 《黑龙江畜牧兽医》2018,(15)

为了探讨苯酚/氯仿抽提法中加入血液和红细胞裂解液(PBS)的量对DNA提取效果的影响以及找到针对牛血和鸡血最合适的DNA提取条件,试验以安格斯牛和静原鸡为研究对象,采用苯酚/氯仿抽提法提取血液基因组DNA。结果表明:在试验第1步加入200μL鸡血1次,用1 500μL PBS重复裂解2次,可以得到高质量鸡的基因组DNA。当加入鸡血的量过大时,提取的DNA浓度过高且不纯,蛋白质等外源核酸的污染较严重。在试验第1步加入500μL牛血1次,用1 500μL PBS裂解,重复2次,可以得到高质量牛的基因组DNA。苯酚/氯仿抽提法可以节省时间,还可以避免血液的浪费。  相似文献   

奶牛乳脂性状候选基因EEF1D突变位点功能分析     

蒋秋斐  蔡正云  黄增文  冯小芳  张娟  顾亚玲 《浙江农业学报》2020,32(7):1155

提高乳脂含量、提升奶质已成为当前奶牛业研究的重点方向之一。前期经GWAS方法研究发现,EEF1D基因5'非翻译区(5'-UTR)的G/A突变与乳脂率极显著相关,为了进一步对候选基因EEF1D的突变位点进行功能分析,首先通过人工合成获得了EEF1D基因突变型与野生型片段,并在细胞水平上对其开展了功能验证实验。研究发现,EEF1D基因5'-UTR的G/A突变引起Sp3转录起始位点后移33 bp,并且突变型的活性大约是野生型的3倍。研究结果表明,该突变可改变转录因子的转录起始位点,从而使EEF1D的表达上调。  相似文献   

陇东肉牛PON1基因结构与功能的生物信息学分析     

张娟  母童  赵平  冯小芳  吴建平  顾亚玲 《中国畜牧兽医》2018,45(7):1750-1758

为阐明陇东肉牛对氧磷酶1（paraoxonase 1,PON1）基因的结构与功能,本研究运用PCR扩增陇东肉牛PON1基因所有外显子序列并测序,通过Seqman软件完成序列拼接,结合生物信息学方法预测和分析其碱基组成、开放阅读框及编码蛋白的理化性质、原子组成、氨基酸残基数、亲水性和疏水性、分子质量、等电点、二级结构、高级结构等。结果显示,陇东肉牛PON1基因CDS区序列全长1 068 bp,编码355个氨基酸残基,其中数目最多的为亮氨酸（Leu）,数目最少的为半胱氨酸和色氨酸（Cys和Trp）。碱基组成中A+T含量（56.55%）高于G+C含量（43.26%）。与GenBank中牛PON1基因序列（登录号：EU289337）比对分析发现,在PON1基因外显子4、6、8、9中存在突变,但均未导致氨基酸发生变化,为同义突变。PON1蛋白的原子组成是C₁₈₁₀H₂₇₉₆N₄₅₄O₅₃₃S₁₂,分子质量为39.83 ku,理论等电点为5.24,为稳定的水溶性蛋白质。PON1蛋白二级结构中无规则卷曲、延展链、α-螺旋和β-转角分别由159、116、55和25个氨基酸构成,最终形成了以无规则卷曲和延展链为主的混合型。PON1蛋白的疏水性结果表明,第8位苏氨酸（Thr）疏水性最强（最高分值2.878）,第299位脯氨酸（Pro）亲水性最强（最低分值-2.222）。本试验结果为深入研究陇东肉牛PON1蛋白功能及探讨PON1基因突变对甘肃地方肉牛胴体、肉质性状的影响奠定基础。  相似文献   

中国荷斯坦奶牛EEF1D基因的SNPs检测及其与产奶性状的关联分析     

张娟  母童  蔡正云  顾亚玲  刘丽元  杨雪瑶  温万  孙东晓 《中国畜牧兽医》2018,45(4):961-969

试验旨在研究中国荷斯坦奶牛真核生物翻译延伸因子1D（eukaryotic translation elongation factor 1 delta,EEF1D）基因的多态性及其与产奶性状的相关性。利用Sequenom MassARRAY SNP分型技术对宁夏地区1 252头中国荷斯坦奶牛EEF1D基因的多态性进行了检测,并对其多态位点不同基因型和组合基因型与产奶性状进行了关联分析。结果显示,EEF1D基因的5'侧翼区存在2个SNPs位点,即EEF1D-1和EEF1D-3;经检测发现,EEF1D-1存在2种基因型,EEF1D-3存在3种基因型。χ²检验表明,中国荷斯坦奶牛在EEF1D-1位点偏离Hardy-Weinberg平衡状态（P < 0.05）,在EEF1D-3位点未偏离Hardy-Weinberg平衡状态（P > 0.05）;EEF1D-1和EEF1D-3位点多态信息含量（PIC）分别为0.10和0.28,分别呈现低度多态和中度多态。在试验群体中,EEF1D-1位点对乳脂率和乳蛋白率性状的效应均达到极显著水平（P<0.01）,对305 d产奶量性状的效应达到显著水平（P<0.05）;EEF1D-3位点对305 d产奶量、乳脂率和乳蛋白率性状的效应均达到极显著水平（P<0.01）;EEF1D基因的优势基因型组合GG-AG和GG-GG个体乳脂率均显著高于GG-AA组合个体（P<0.05）。说明EEF1D基因可以作为影响中国荷斯坦奶牛产奶性状的候选基因用于标记辅助选择。  相似文献   

微卫星DNA技术在肉羊杂种优势利用中的研究     

顾亚玲  王新燕  吴宗山 《畜牧与兽医》2009,41(5)

将宁夏地区普遍饲养的5个品种169只羊的4个微卫星座作为侯选标记,对其多态性进行遗传检测,结果5个品种在4个位点均表现多态。根据各位点基因频率计算出品种间的遗传距离,其中萨福克与小尾寒羊的遗传距离最大(0.249 1);宁夏滩羊与小尾寒羊之间的遗传距离较小(0.124 7)。选择遗传距离远、中、近3组作杂交组合试验比较,结果表明:萨寒F1、特寒F1和滩寒F1组羔羊增重分别比小尾寒羊提高48.75%,33.75%和11.25%,萨寒F1组羔羊的增重、日均增重差异极显著高于滩寒F1组和对照组(P<0.01),萨寒F1与特寒F1组差异显著(P<0.05)。料重比以萨寒F1组最低,表现出明显的杂交优势。此结果表明通过群体间遗传距离的大小可以预测杂种优势的高低。  相似文献   

生长激素基因多态性与滩羊生长性状关联性研究     

顾亚玲  马丽娜  许斌  李颖康 《安徽农业科学》2010,38(19):10088-10089

[目的]探讨生长激素基因多态性与滩羊生长性状关联性,以提高滩羊整体生长速度和经济效益。[方法]选取69只宁夏滩羊为研究对象,运用PCR-RFLP技术,对已证实控制绵羊生长速度的主效基因生长激素（GH）基因进行检测,统计各基因型与滩羊初生重、二毛重、3月龄及6月龄体重之间的关联性。[结果]共检测到2种GH基因型,即AB和BB型,基因型频率分别为0.3481和0.6519,A等位基因频率为0.1811,而B等位基因频率为0.8189。通过关联性统计分析,AB基因型与滩羊生长性状的关联性达到极显著水平（P〈0.01）。[结论]AB基因型是影响滩羊生长速度的优势基因型。  相似文献   

安格斯牛体重和体尺性状生长曲线拟合与相关性分析     

冯小芳  蒋秋斐  封元  王瑜  陈亚飞  母童  黎明  周子航  蔡正云  张娟  顾亚玲 《浙江农业学报》2022,34(1):50-59

为充分了解安格斯牛生长发育规律,指导饲养管理和提高品种选育,以安格斯牛为研究对象,通过Logistic、Gompertz和Von Bertalanffy 3种曲线模型对0～18月龄安格斯牛体重和体尺性状进行生长曲线拟合分析,并选出最佳生长曲线模型,利用该模型计算体重和体尺的相对生长(R)和绝对生长(G)情况,并对各性状...  相似文献   

奶牛分子育种技术研究进展     

蒋秋斐  罗晓瑜  洪龙  温万  田佳  张娟  李欣  韩丽云  史远刚  顾亚玲 《中国畜牧兽医》2016,43(10):2694-2700

分子育种技术是在DNA水平上直接进行选择,通过对随机分布于整个基因组的分子标记的多态性进行比较,更加全面地了解研究对象的多态性,可以获得更大的信息量,选种的准确性也更高,进而提高奶牛生产效率和经济效益。作者从奶牛分子育种技术的角度入手,阐述了数量性状基因的定位、分子标记辅助选择、转基因育种以及全基因组关联分析这几方面的研究难点、存在问题和研究进展,指出分子育种技术在奶牛育种及改良过程中具有非常重要的作用,进一步研究并应用分子育种技术,不仅可以加速我国奶牛核心群的全面建设,而且对培育种公牛也是非常必要的手段。  相似文献   

中国荷斯坦牛DGAT2基因第4外显子与产奶性状的关联分析     

赵国丽  李鹏  马秋萌  宫艳斌  韩元  顾亚玲  史远刚 《中国奶牛》2011,(14):5-7

本试验以宁夏地区8个公牛家系的各8头女儿共计64头中国荷斯坦母牛为研究对象．利用AB13730测序仪对DGAT2基因Exon4进行了基因型检测后发现三个突变位点474bp（C／G）、48lbp（G／A）、621bp（C／T）,各个位点发现有两种基因型,分别为CC型、GC型,GG型、GA型,CC型和CT型,基因型频率分别为0．484、0．516,0．687、0．313,0．484和0．516。通过SAS软件（8．02）对4个产奶性状与DGAT2基因Exon4的关联分析表明．474bp（C／G）CG型305d产奶量和乳脂率显著高于CC型（P〈0．05）,乳蛋白率、体细胞数影响不显著（P〉0．05）;481bp（G／A）GA型305d产奶量显著高于GG型,与乳脂率、乳蛋白率、体细胞数无显著的相关性（P〉0．05）;621bp（C／T）CT型305d产奶量、乳蛋白率、体细胞数都显著高于CC型（P〈0．05）,乳脂率影响不显著（P〉O．05）。  相似文献   

血液生化指标在养鸡业杂种优势利用中的研究   总被引：6，自引：1，他引：5  

顾亚玲  陈卫民  张惠茹  闫宏 《中国畜牧杂志》2003,39(1):36-37

采用聚丙烯酰胺凝胶和聚丙烯酰胺浓度梯度凝胶对宁夏地区普遍饲养的 7个品种 5 6 0只商品蛋鸡血清脂酶 - 1(Es- 1)、转铁蛋白 (Tf)、白蛋白 (A1b)和前白蛋白 (Pa)多态性进行了遗传检测 ,结果表明 7个品种在上述 4个座位均表现多态 ,并据其基因频率计算出品种间的遗传距离。其中海兰与北京红鸡的遗传距离最小 (0 .0 0 75 ) ,海兰与迪卡次之(0 .0 2 5 4 ) ,海兰与芦花较远 (0 .116 )。根据遗传距离 ,选择了遗传距离中等、较远的两组作杂交组合试验进行比较。对其后代及纯种进行生产性能测定 ,并对平均产蛋率、杂种优势率进行比较。结果表明 :各杂交组合生产性能几个指标均优于纯种平均值 ,就两个杂交组合而言 ,以海兰×芦花为优 ,其平均产蛋率、高峰期产蛋率较海兰×迪卡高出 1 6 9和 2 7个百分点 ,平均产蛋率杂种优势分别为 8.37%、4 .5 1% ,前者较后者高出 3.86个百分点。此结果表明 ,通过群体间遗传距离的大小可以预测杂种优势的高低。  相似文献