检测产单核细胞李氏杆菌溶血素的胶体金试纸条制备及初步应用     

江玲丽  高有领  胡兴娟  章先  杨云凯  魏华  方维焕 《畜牧兽医学报》2022,53(6):1841-1848

产单核细胞李氏杆菌为重要的食源性病原菌,本研究旨在建立快速、灵敏、特异的检测方法,提高检测效率和检测通量。李氏杆菌溶血素(LLO)蛋白经原核表达后, 制备单克隆抗体, 测定单克隆抗体的亚型、效价及亲和力。柠檬酸钠法研制LLO胶体金试纸条,并对试纸条的特异性、敏感性、重复性、稳定性及模拟样品进行检测,并初步应用于实际海产品的检测。结果发现,制备的LLO单克隆抗体特异性强、稳定性高、重复性佳、灵敏度较高,亲和力好,亲和力常数为4.25×10⁸ L·mol^－1。人工污染样品试验表明灵敏度与纯细菌培养物基本一致,为3.0×10⁵CFU·mL^-1。将LLO胶体金试纸条应用于500份海产品的实际检测中,产单核细胞李氏杆菌的阳性检出率为2.20% (11/500),略低于国标检测方法(GB4789.30—2010)的2.40%(12/500)和PCR检测方法的2.40%(12/500),三者之间符合率为91.67%。另外缩短检测时间至15 min,检测效率大幅度提高。本研究建立的LLO胶体金检测方法可用于产单核细胞李氏杆菌的快速检测。  相似文献   

鱼类在环境污染物检测中的重要指示作用——水环境中内分泌干扰物的检测     

魏华  吕众 《中国水产》2009,(3):62-63

环境内分泌干扰物广泛存在于自然水体中,影响水生动物生存和人类健康。利用鱼类检测水中内分泌干扰物是一个有效方法。本文介绍了利用鱼类评测水中内分泌干扰物的研究现状,并展望了以鱼类作为对象更加全面的评测内分泌干扰物的前景。  相似文献   

镉诱导鲫肝细胞内Ca²⁺-ATP酶与金属硫蛋白的表达   总被引：1，自引：0，他引：1  

吴婷婷  魏华  郭敏  曹娜  李国鹏 《水产学报》2011,35(6):824-830

研究了镉诱发鲫肝细胞相关的胞内游离钙离子变化,以及Ca²⁺-ATP酶及金属硫蛋白表达量的变化。试验分为对照组、5、10、15、20 μmol/L CdCl₂ 5个组。Ca²⁺用Fura-2/AM方法检测,试验后24 h用荧光倒置显微镜观察细胞内游离钙离子变化;分光光度法检测Ca²⁺-ATP酶;石墨炉—原子分光光度法检测了细胞内镉离子浓度;免疫酶联法(ELISA)检测了金属硫蛋白(MT)含量。结果显示,镉可导致细胞存活率下降,具有一定的毒性。镉离子引起胞内Ca²⁺荧光强度和Ca²⁺-ATP酶活性增加(P＜0.01)。随镉浓度升高,处理组Ca²⁺-ATP酶浓度活性分别是对照组的4.52、6.73、6.68、7.19、6.18倍;暴露24 h后各组细胞内镉离子均有上升,其中5 μmol/L组最高,达(2.045±0.322) μmol/L;各处理组金属硫蛋白(MT)含量增高(P＜0.01),且5 μmol/L低浓度组MT增幅最大,达17.15%。结果提示,镉诱导下细胞内Ca²⁺升高,MT表达量上升,且MT可螯合进入细胞内的镉离子,这种螯合可能是降低镉毒理作用的机制之一。  相似文献   

双酚A对鲫雌激素受体表达和雌二醇水平的影响     

李惠云  刘鹏威  魏华 《上海海洋大学学报》2008,(6)

运用定量PCR技术和免疫荧光法研究了内分泌干扰物双酚A（BPA）对雌鲫的雌激素效应。以不同浓度的BPA[质量分数分别为1mg／kg,50mg／kg,100mg／kg（注射剂量／鱼体重）]对雌鲫进行腹腔注射,然后分别于24h和48h检测肝脏中的仅型雌激素受体（ERct）mRNA表达以及血清雌二醇（E2）水平。结果表明1mg／kg和50mg／kgBPA处理组ERamRNA水平与对照组相比在48h内均没有明显变化;100mg／kgBPA处理组ERamRNA水平在注射后24h显著上调（P〈0．05）,48h时仍维持较高水平。1mg／kgBPA处理组E2水平在24h显著下降（P〈0．05）,48h回升至正常水平;50mg／kg和100mg／kgBPA处理组E2水平在24h显著增加（P〈0．01）,48h时仍维持较高水平。结果表明,BPA具有雌激素样效应,高浓度的BPA能够诱导雌鲫肝脏ERαmRNA表达和血清E2水平的上升。  相似文献   

溴氰菊酯对克氏原螯虾的氧化胁迫效应   总被引：3，自引：1，他引：2  

魏华  吴楠  沈竑  成永旭  吴婷婷 《水产学报》2010,34(5):733-739

为了解溴氰菊酯对克氏原螯虾的毒性及致毒机理,采用24h换水式生物试验研究了溴氰菊酯对克氏原螯虾的96h急性毒性,分光光度法检测了6、12、24和48h后0.01、0.02和0.04μg/L溴氰菊酯对肝胰腺超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力和丙二醛(MDA)的含量等氧化胁迫相关指标的影响。结果表明,24、48和96h的半致死浓度分别为0.1560、0.0993和0.0562μg/L,安全浓度为5.62ng/L;在整个暴露过程中,溴氰菊酯各个处理组都引起了氧化胁迫相关指标的变化。SOD和CAT活力的变化趋势相同,都呈抑制-诱导-抑制的变化规律,MDA含量则一直高于对照组。暴露6h后,0.01μg/L浓度组MDA含量极显著高于对照组(P<0.01),0.04μg/L浓度组MDA含量约为对照组的1.98倍(P<0.05);暴露12h后,MDA仍保持较高水平,0.02μg/L浓度组MDA含量约为对照组的1.76倍(P<0.05);暴露24h后,各浓度组CAT活力分别比对照组上升了70.98%、73.05%和66.67%(P<0.01);暴露48h后,0.01、0.02μg/L浓度组的SOD活力分别下降了...  相似文献   

竹荪—水稻高效耕作模式及配套栽培技术     

全祖和  颜有明  陈桂荣  李正美  祝雪芳  黄丽  魏华 《福建稻麦科技》2021,39(1):20-22

2020年福建省南平市建阳区小湖镇塘楼村进行竹荪—水稻高效耕作模式示范,结果竹荪和水稻的每667m2产量分别为59.35 kg和650.0 kg,竹荪—水稻栽培模式每667m2经济效益9469元.总结南平市建阳区的竹荪—水稻高效耕作模式及丰产配套栽培技术.  相似文献   

羽叶薰衣草在深圳地区的育苗与栽培管理技术     

田大翠  郭明鑫  宋一凡  魏华  李璐  胡晓龙  李朋远  李勇 《现代农业科技》2020,(22)

从羽叶薰衣草的植物学特征特性、标准化育苗流程、种植地块选择、整地、起垄、铺管、覆膜、定植、水肥管理、整形修剪和病虫害防治等方面详细介绍了羽叶薰衣草在深圳地区的育苗与栽培管理技术,以期为羽叶薰衣草在深圳的应用提供技术支持。  相似文献   

玉米赤霉烯酮降解酶基因（ZEN-jjm）的克隆、表达及活性分析   总被引：3，自引：0，他引：3  

程波财  史文婷  罗洁  彭福中  万翠香  魏华 《农业生物技术学报》2010,18(2):225-230

玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)是世界上污染范围最广泛的一种镰刀霉毒素,能导致人或动物不孕、流产等症状,损害内脏器官并促进癌细胞的生长.本文通过设计1对特异性引物,从粉红螺旋聚孢霉(Gliocladium roseum)中克隆获得大小为795 bp的DNA片段(ZEN-jjm),通过构建E. coil原核表达载体进行表达.经HPLC检测证实,IPTG诱导后的细胞裂解上清能在3 h内完全降解液体中1μg/mL的ZEN.序列分析结果表明ZEN-jjm与zhd101存在9个碱基的差异,ZEN-jjm编码的ZEN降解酶与文献报道的乳糖水解酶存在3个氨基酸的差异,但ZEN毒素降解实验证实二者活性相似.  相似文献   

水环境中的Ca2+浓度对中华绒螯蟹早熟和存活的影响     

魏薇  魏华 《淡水渔业》2005,35(3):10-12

报道了水环境中不同的Ca2+浓度对一龄扣蟹性早熟率和存活率的影响。结果显示:(1)一龄扣蟹性早熟率随着水环境Ca2+浓度的增加而上升,当水环境Ca2+浓度超过161.6mg/L时反而下降;(2)存活率的变化趋势正好相反,随着水环境中的Ca2+浓度的上升而下降,当Ca2+浓度超过161.6mg/L时存活率又上升。(3)当水环境中的Ca2+浓度低于161.6mg/L时,扣蟹平均性早熟率与Ca2+浓度呈线性正相关关系,相关系数R2=0.94,扣蟹平均存活率与Ca2+浓度呈线性负相关关系,相关系数R2=0.99。  相似文献   

新生仔猪感染肺炎克雷伯氏菌的检验报告     

朱彦华  龙怡伶  高冬琳  牛亚丹  魏华 《湖北畜牧兽医》2016,(3):30-31

对一例肺炎克雷伯氏菌感染引起实验用新生仔猪死亡的实验室检验过程进行了介绍。  相似文献