广西猪乙型脑炎病毒的分离及初步鉴定     

李茂宁  秦毅斌  卢冰霞  赵武  李斌  梁家幸  肖爱欢  何颖  苏乾莲  梁保忠  刘芳  黄伟坚 《广西农业科学》2011,(9):1151-1156

【目的】了解广西猪乙型脑炎（JE）地方流行毒株特点,为有效防控广西猪JE奠定基础。【方法】对从广西各地猪场采集疑似JE病例猪的脑组织、流产胎儿、死胎、木乃伊胎、公猪精液、猪舍蚊子等靶组织样品进行猪乙型脑炎病毒（JEV）检测,并选择部分阳性样品进行JEV分离鉴定及病毒E基因遗传进化分析。【结果】在采集的465份JE疑似病料样品中,有72份为JEV阳性;通过接种BHK-21细胞、乳鼠及SPF鸡胚,分离获得两株JEV地方分离毒株,分别命名为GP株和LC株;遗传进化分析显示,GP株和LC株之间的核苷酸和氨基酸同源性分别为99.9%和99.8%;两株分离株与疫苗毒株SA14-14-2的核苷酸同源性分别为99.7%和99.9%,氨基酸同源性分别为99.4%和99.6%,且均属GIII型JEV。【结论】广西受检猪群存在较严重的JEV感染,应引起重视并加强防控。  相似文献   

动物戊型肝炎研究进展   总被引：2，自引：1，他引：1  

肖爱欢  梁家幸  秦毅斌  赵武  李斌  刘芳  何颖  黄伟坚 《广西农业科学》2010,41(2):179-182

戊型肝炎（Hepatitis E,HE）是由戊型肝炎病毒（Hepatitis E virus,HEV）引发的一种急性病毒性肝炎,其宿主广,可感染多种动物,但临床症状不明显。文章通过对其病毒形态学、分子生物学、感染宿主、流行状况、诊断、疫苗研制等研究进展进行概述,并结合广西HE的流行特点及其毒株基因型,提出今后应加强广西HE分子流行病学、病原学、病原生态学、疾病传播及感染致病的分子机制、快速特异诊断技术和防控技术等研究。  相似文献   

腰果叶片DNA的提取     

黄伟坚  黄海杰  张中润  王金辉  吴家和  梁李宏 《广东农业科学》2010,37(2):175-176,191

以CTAB法为基础,设计了一种快速分离和纯化腰果叶片总DNA的方法。研究结果表明,该改良方法简便、快速、经济、有效。分光光度法测定与电泳检测分析表明,采用该方法提取腰果叶片总DNA的纯度和完整性良好,OD260/OD230平均值为1.91、OD260/OD280平均值为1.86,可以进行PCR扩增、Southern杂交等分子生物学研究。  相似文献   

哺乳仔猪暴发猪瘟的诊断与分析     

覃一峰  季程远  吴桂杰  黄伟坚 《广西畜牧兽医》2017,33(6)

<正>猪瘟(classical swine fever,CSF)是由猪瘟病毒(CSFV)引起的一种高度传染性疾病,该病在临床上主要分为最急性型、急性型、慢性型和非典型性猪瘟。最急性型和急性型猪瘟主要表现为皮肤和各脏器的出血;慢性型猪瘟的病程一般较长,感染猪只除表现为组织器官出血外,往往还会出现消化系统的溃疡和扣状肿~([1])。非典型性猪瘟的症状与典型猪瘟的症状区别较大,一般表现在母猪流  相似文献   

广西断奶仔猪猪圆环病毒2型的检测   总被引：15，自引：5，他引：10  

黄伟坚  芦银华等 《中国兽医科技》2003,33(1):3-5

对广西16个养猪场的22份断奶仔猪病料用PCR技术检测猪圆环病毒2型（PCV-2），对阳性病进一步检测猪瘟病毒、猪生殖和呼吸系统综合征病毒、伪狂犬病病毒及细菌性病原。结果，从南宁市郊某猪场表现衰弱症状的病猪病料中检测出PCV-2，而这些病料没有检出猪瘟病毒、猪生残和呼吸系统综合征病毒、伪狂犬病病毒及可疑细菌，证实广西存在PCV-2引起的断奶仔猪多系统衰弱综合征（PMWS）。  相似文献   

仔猪腹泻性大肠杆菌病     

黄伟坚 《广西畜牧兽医》1993,(1)

腹泻是仔猪最常见的疾病,产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)已证实是仔猪腹泻的最主要病原之一。哺乳仔猪腹泻病原的调查,由 ETEC 引起的美国占48%,(Bergland,1980),瑞典占74.2%(Soderlend,1988),日本(1987)占41.9%。在我国,江苏占68.9%(崔治中,1980),四川占59.2%(何明清,1988),我们对广西调查结果表明,ETEC 是引起腹泻病的主要病原,占30%以上。本病按发病时间和粪便颜色分为:①1  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒GXA株分离及主要结构基因的克隆和序列分析   总被引：3，自引：5，他引：3  

黄伟坚  蒋小红  陈樱  罗廷荣  刘芳  余克伦  连慧香  温荣辉  陆芹章 《畜牧与兽医》2006,38(8):8-11

近来,广西一些养殖场频繁发生以母猪流产、死胎、木乃伊、仔猪呼吸道症状等为特征的流行性传染病,怀疑为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染所致。本研究从病猪中采集材料,经RT-PCR检测为阳性后,接种于Marc-145细胞,经过6代盲传,发现典型的细胞病理变化(CPE),经鉴定为PRRSV,命名为GXA株,其毒价为105.33TCID50/mL。参考VR-2332和CH-1a株基因序列,设计了3对特异性引物,分别对GXA株的E、M、N基因同时进行了RT-PCR扩增、克隆和测序。应用DNAstar生物学软件拼接得到GXA株的E、M和N3个基因片段共长为1473bp。同源性分析表明,GXA株与VR-2332、MLV和BJ-4的同源性为99.7%～100%,而与欧洲型代表株LV的同源性只有66.4%。表明GXA与VR-2332、MLV及BJ-4株亲缘关系比较密切,与欧洲型代表株LV亲缘关系最远,属于美洲型毒株,有可能来源于疫苗株。  相似文献   

广西地区水牛群牛星状病毒分子流行病学调查     

李名洋  方庆励  黄伟坚 《中国畜牧兽医》2020,47(9):2926-2934

试验旨在了解2019年广西地区牛星状病毒（bovine astrovirus,BoAstV）在水牛群中的流行情况及毒株序列特征,并进行遗传进化分析。从2019年广西南宁、贵港、北海、横县、灵山5个地区15个水牛场共采集297份水牛粪便样品,使用Trizol法抽提样本总RNA后,利用半巢式RT-PCR方法对收集到的粪便样品进行检测,并将阳性样品连接到pMD18-T载体进行测序,对测序结果进行同源性分析及系统进化树构建。结果显示,BoAstV感染的水牛场阳性率为40.00%（6/15）,样品总阳性率约为11.11%（33/297）,1~180日龄犊牛感染率最高为18.75%（27/144）;有19株BoAstV ORF1b基因测序成功,核苷酸序列同源性为53.9%~99.3%,氨基酸序列同源性为12.1%~98.5%。遗传进化分析发现,广西地区流行的BoAstV主要分为4个亚群：第一亚群是NNC-286、HX-3、HX-4和NNA-14,与新型的神经嗜性的牛星状病毒BoAstV NeuroS1和BoAstV BH89/14等Mamastrovirus 13亚群的序列之间有较高的亲缘性;第二亚群是NNA-12、NNA-13、NNA-17、NNA-11,与水牛星状病毒（buffalo astrovirus）亲缘性较近,属于水牛星状病毒分支内;第三亚群是HX-1、HX-5、HX-6和BH-C22,与经典的牛星状病毒毒株BoAstV B170-HK亲缘性较近;第四亚群包含NNA-7、NNA-15、NNA-6、NND-S2、NND-S16、NNC-296与BH-C14,与广西BoAstV地方流行毒株的亲缘性较近。不同基因型BoAstV感染了广西不同地区的水牛群体,本试验在广西地区发现了类神经嗜性BoAstV毒株感染水牛的情况,为进一步全面了解该病毒的流行病学和生物学特性提供参考。  相似文献   

5个腰果高产无性系农艺经济性状比较     

黄伟坚  梅新  梁李宏  张中润 《热带农业科学》2007,27(2):26-28

以5个腰果高产无性系FL30、GA63、CP63-36、HL2-13、HL2-21为材料,在田间试验和连续3 a观测记录数据的基础上,对其农艺经济性状进行比较.结果表明：FL30性状优良,可作为主栽品种（系）大面积推广种植;HL2-21具有抗风性能,适宜在滨海地区种植;其他无性系不宜大面积推广种植.5个无性系遗传上存在明显差异.  相似文献   

广西猪丹毒杆菌分离鉴定及生物学特性研究     

薛辉  秦树英  於庆雄  邓萍  刘芳  韦祖樟  陈樱  黄伟坚 《养猪》2014,(6):97-100

试验收集2013年6月至2014年2月广西南宁、桂林、柳州、玉林、贵港、钦州等6个市送检的疑似猪丹毒发病的材料,用鲜血琼脂平板对病料进行细菌分离,37℃恒温箱培养24~48 h,观察分离细菌的菌落形态,并进行革兰氏染色观察,初步确定其为革兰氏阳性的细小杆菌。为进一步确定分离出的是否为猪丹毒杆菌,试验进一步纯化细菌,提取细菌DNA用16S rRNA随机引物进行扩增,将扩增出来的目的片段连接到p MD18-T载体上,进行克隆、酶切鉴定及序列测定;最终将测序获得16S rRNA序列在NCBI上进行BLAST,结果表明试验最终分离出5株猪丹毒杆菌,为进一步确定分离出来猪丹毒杆菌的生物学特性,试验做了进一步深入研究：药物敏感性试验、小白鼠攻毒试验、耐药基因的检测、免疫攻毒保护性试验。  相似文献