副猪嗜血杆菌tbpB基因的PCR-RFLP分型     

李淑芳  龚玉梅  侯娜  赵成全  赵兴绪  张培君 《中国畜牧兽医》2013,(7):56-61

本研究应用生物学软件Vector NTI对副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)的转铁结合蛋白tbpB进行基因分型研究,通过选择AluⅠ、AvaⅡ和RsaⅠ3种限制性内切酶对15株Hps标准株和12株分离株的tbpB基因进行RFLP分析。经过生物学软件Vector NTI精确分型,标准株得到了11个基因型,其中基因型Ⅰ(AAA)包括血清型1、3和15,Ⅱ(BBB)包括血清型2、9和11;分离株的分型产生了10种基因型,其中6种为新的基因型。这一结果证实了Hps流行株的多样性,说明该方法对于猪革拉泽氏病流行病学规律的研究具有实用意义,同时,需要对更多的分离株做进一步的研究。  相似文献   

副猪嗜血杆菌外膜蛋白pilA基因的克隆与表达     

叶飞  张培君  田德雨  孙慧玲  王宏俊  龚玉梅  贺云霞 《安徽农业科学》2011,(13):7837-7838,7867

[目的]克隆和表达副猪嗜血杆菌菌毛蛋白pilA基因。[方法]对已发表的HPS的pilA序列进行分析,合成引物,并以HPS血清5型基因组为模板,通过PCR扩增HPS的pilA编码基因,获得目的基因片段;构建重组表达质粒,经IPTG诱导表达至大肠杆菌BI21（DE3）中,进行SDS-PAGE与Western blot检测。[结果]表达的重组蛋白分子质量与预期的43 kD一致。[结论]该研究为制备亚单位疫苗和诊断试剂奠定了基础。  相似文献   

来源于植物的短肽LD-1对番茄灰霉病的抑制作用及其抗病性研究     

侯玉霞  龚玉梅  李春林  李斯扬  张永安  朱书生 《植物保护》2008,34(5):75-79

短肽LD-1是从牛心朴子草根中新分离的具有抗菌活性的多肽。本文以番茄灰霉病为供试菌株,研究了短肽LD-1对番茄灰霉病的抑制作用及其抗病性。结果表明:短肽LD-1对番茄灰霉病菌菌丝生长及孢子萌发具有较好的抑制作用。离体试验中,短肽LD-1对番茄灰霉病菌菌丝生长抑制作用的EC50在24、48、72h分别为28.3051、30.2134、32.7427mg/L,对孢子萌发的EC50为16.6919mg/L;活体试验中,短肽LD-1对番茄灰霉病具有较好的防治效果,90mg/L短肽LD-1对番茄灰霉病防治效果达到74.24%。短肽LD-1能导致病菌芽管发育畸形,不能正常发育。短肽LD-1对番茄种子的萌发和根系生长具有明显的促进效果,并且经短肽LD-1处理后的番茄须根发达,须根数目明显增多,促进了番茄的生长发育,提高了抗病性。  相似文献   

副鸡禽杆菌感染对鸡鼻区免疫相关因子的影响     

徐玉智  李淑芳  张培君  龚玉梅  王宏俊 《动物医学进展》2017,38(1)

副鸡禽杆菌是巴氏杆菌科的一种短小革兰阴性菌,也是鸡传染性鼻炎的致病菌。为探讨副鸡禽杆菌感染后靶器官免疫相关因子的变化情况,用副鸡禽杆菌进行人工感染SPF试验鸡,分别在第3天和第6天采集鼻区组织,应用RT-qPCR方法检测了IL-1β、IL-6、IL-8、IFN-γ、IL-4、IL-10、TLR4、TLR5、TLR15、AvβDs 4和AvβDs 10的相对表达量;收集鼻黏膜洗液,检测sIgA水平。结果显示,感染组试验鸡IL-1β、IL-6、IL-8、IFN-γ、IL-4、IL-10、TLR4、TLR5、TLR15、β-防御素4、10相对表达量显著上升;鼻腔黏膜sIgA显著增高。提示前炎因子、趋化因子、Th1细胞因子、Th2细胞因子都参与了对副鸡禽杆菌感染的免疫调控,分泌的sIgA在抗副鸡禽杆菌感染过程中也起到重要作用。本研究探索了副鸡禽杆菌感染后细胞因子及抗体变化,对探寻新的免疫或治疗方法奠定了基础。  相似文献   

一例猪圆环病毒2型和大肠杆菌、溶血葡萄球菌混合感染的诊断   总被引：1，自引：1，他引：0  

徐慧  叶飞  贺云霞  李方正  龚玉梅  张培君 《中国畜牧兽医》2010,37(9):220-222

山东德州某猪场发生猪高热、呼吸系统疾病甚至死亡的疫情。采集病料提取病变组织总DNA或RNA进行猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒、猪瘟病毒的PCR或RT-PCR检测。PCR扩增出353 bp的猪圆环病毒2型特异性条带。同时进行细菌分离培养、生化鉴定等试验,诊断为猪圆环病毒2型和大肠杆菌、溶血葡萄球菌混合感染。  相似文献   

我国森林分类经营存在问题与改革方向探讨   总被引：1，自引：0，他引：1  

龚玉梅  倪嶷  谷振宾 《林业资源管理》2008,(6)

从理论和实践两方面探讨了我国森林分类经营面临的问题,认为应该重视森林经营而非分类,从森林经营实践中探索森林经营模式,改革公益林和商品林管理体制,完善森林分类经营所需的市场和补偿机制等条件。  相似文献   

鸡传染性鼻炎二价油乳剂灭活疫苗的保存期检验     

苗得因  张培君  龚玉梅  冯文达  冯杉  苗得荣 《动物医学进展》2001,22(3)

应用3批鸡传染性鼻炎二价油乳剂灭活疫苗进行了保存期检验,结果表明,二价苗在4～8℃保存12个月和18个月后免疫鸡群,鸡群对A、C型强致病力菌株的保护率在二免后4周左右分别为100%和88.5%,血清SPA、阻断ELISA和HI抗体阳性检出率较高,但疫苗保存18个月后所免疫鸡的血清C型HI抗体效价的几何平均数有显著的下降.因此,该二价苗的保存期以12个月为宜.  相似文献   

五种市售鸡传染性鼻炎灭活疫苗免疫效力比较     

孙惠玲  苗得园  陈晓峰  张培君  龚玉梅  唐桂运  Anne-Lise  Saint-Ger 《中国预防兽医学报》2005,27(6):544-548

本研究对国内市场上几个主要鸡传染性鼻炎灭活疫苗生产厂家生产的灭活疫苗免疫鸡只进行血清HI抗体水平测定和攻毒,比较不同公司所产疫苗效力的效力差异,并评估A、C型二价灭活疫苗两次免疫鸡群对国内B型分离株:DL-1株和最近从免疫失败鸡场分离到的SD-1株的交叉保护作用,分析免疫失败的原因.结果表明:A、D、E公司的疫苗免疫两次后,A型HI抗体阳性率分别为92.5%、100%和95%,滴度分别为33.9、55.1和59.9,攻毒保护率都是100%.C型HI抗体阳性率分别为72.5%、38.5%和77.5%,滴度分别为11.4、2.7和27,攻毒保护率分别为80%、70%和80%.而B和C公司的疫苗免疫两次后A型HI抗体阳性率分别为59.4%、77.1%,抗体滴度分别为5.4和21.8,攻毒保护率分别为50%和66.7%;C型HI抗体阳性率分别为54.1%和51.4%,抗体滴度分别为6.1和6.8,攻毒保护率分别为38.3%和50%.在五个疫苗产品中,以A、D、E的保护效力较好,B、C产品效力较差.另外,A、C型二价灭活疫苗免疫后不能对B型菌的攻击提供保护,其A、C型HI抗体阳性率、抗体滴度与对B型菌攻毒保护率无相关性.  相似文献   

副猪嗜血杆菌病研究进展   总被引：1，自引：0，他引：1  

叶飞  贺云霞  徐慧  孙慧玲  王宏俊  龚玉梅  张培君 《动物医学进展》2011,32(2):101-104

副猪嗜血杆菌(HPS)是猪上呼吸道的一种常见病原菌.在一定的条件下,可引起猪的格拉瑟病(Glasser's disease),常与猪流感病毒并发,引起断奶前后仔猪以多发性浆膜炎、关节炎、脑膜炎等为特征的临床症状,给养猪业带来很大的损失.为了更加全面的了解该病原菌,论文就近年来副猪嗜血杆菌病的病原学、流行病学、致病机理、...  相似文献   

副猪嗜血杆菌aroA基因自杀载体的构建   总被引：1，自引：0，他引：1  

贺云霞  徐慧  叶飞  孙慧玲  王宏俊  龚玉梅  黄秀芬  张莉  张培君 《黑龙江畜牧兽医》2011,(13)

为了构建副猪嗜血杆菌aroA基因插入突变自杀载体,试验采用自杀质粒介导的同源重组方法首先构建了自杀质粒pSD,根据副猪嗜血杆菌aroA基因设计PCR特异性引物,上游引物5'末端加BamHⅠ位点,下游引物5'末端加SalⅠ位点,PCR扩增aroA基因后连接到T载体,经酶切位点分析发现在aroA中有1个HindⅢ位点,将氯霉素表达盒通过该位点,构建T-aroA-cm载体,再通过BamHⅠ和SalⅠ将aroA-cm定向克隆到自杀质粒pSD中。结果表明:成功获得aroA基因插入突变自杀载体。说明进一步进行同源重组,从而构建副猪嗜血杆菌aroA基因插入突变株。  相似文献