寨卡病毒SYBR GreenⅠreal-time PCR方法的建立及应用     

于宁  刘宇梦  李成辉  李卓昕  汪伟  孙文超  鲁会军  金宁一 《中国动物传染病学报》2021,(1)

为建立一种针对寨卡病毒的快速诊断方法,本研究根据寨卡病毒的3’端保守基因序列,设计合成1对引物,建立了检测寨卡病毒的荧光定量PCR方法。结果显示:所建立的检测方法的Ct值与标准品在1.41×10^1~1.41×10^10^ copies/μL具有良好的线性关系,相关性为1,斜率为-3.502;灵敏性结果显示,该方法的检测限度为1.41×10^1 copies/μL,是普通PCR的10000倍;特异性结果显示,对CHIKV、DENV和JEV无特异性扩增,特异性强;重复性试验结果显示,组内和组间变异系数均小于1%,重复性好。本研究建立的SYBR Green I real-time PCR检测方法,可用于寨卡病毒感染的快速诊断。  相似文献   

正交设计优化青蒿SRAP-PCR反应体系及引物筛选     

石紫薇  梁妍  姜婷婷  梁剑平  贾宁  辛志君  陆锡宏  周翔  李雪虎 《分子植物育种》2020,(10):3303-3310

为了建立青蒿的SRAP最佳扩增体系,并筛选出SRAP多态性引物,本研究以青蒿叶片DNA为模板,采用正交试验设计,以Mg^2+、dNTP Mix、Taq DNA聚合酶、引物和DNA模板5种因素5个水平,对青蒿SRAP反应体系进行研究。结果表明,青蒿SRAP-PCR最佳反应体系为:引物0.6μmol/L、Mg^2+2.0 mmol/L、模板DNA 5.1 ng、Taq DNA聚合酶2.0 U、dNTPs 0.25 mmol/L,总体积为25μL。各因素对扩增反应均有不同影响,其中引物浓度的影响最大,dNTPs的影响最小。运用该体系对不同种质资源的青蒿进行验证,证明该体系稳定可靠,并在30个引物组合中筛选出了25对扩增条带清晰,多态性丰富的引物组合。这一结论为今后利用SRAP标记技术进行青蒿分子遗传学研究提供了科学依据。  相似文献   

同期排卵处理母牛体温和活动量变化规律及效果分析     

田宏志  陈晓丽  李欣  李茹意  王栋 《畜牧兽医学报》2020,51(7):1619-1627

为探究同期排卵处理母牛体温和活动量变化规律及不同同期排卵技术处理效果，指导同期排卵技术优化。本研究自动监测了18头20月龄左右同期排卵（GnRH-PG-GnRH）处理荷斯坦母牛和17头产后40~60 d预同期排卵（PG-PG-GnRH-PG-GnRH）处理荷斯坦母牛的体温和活动量，应用自动检测系统进行母牛发情监测。结果发现，同期排卵处理母牛发情时阴道温度平均升高（0.43±0.20）℃，持续（12.37±2.73）h；活动量平均升高（18.28±18.61）倍，持续（11.00±1.68）h；排卵时阴道温度平均下降（0.20±0.10）℃，持续（11.00±1.68）h。自动化发情监测显示，同期排卵处理母牛7头发情并排卵；预同期排卵母牛GnRH处理前全部发情排卵。两种同期排卵处理，虽可改变母牛性周期进程，促进母牛性周期同步化，但均难以使母牛性周期完全同步。因此，将同期排卵-定时输精和发情鉴定技术科学结合才能取得更好的繁殖效果。  相似文献   

番茄褪绿病毒在湖南省首次发生   总被引：1，自引：0，他引：1  

王雪忠  张战泓  郑立敏  唐鑫  史晓斌  刘勇 《中国蔬菜》2018,1(8):27-31

2016年7月在湖南省蔬菜病害调查中发现,4种茄科蔬菜表现出叶脉间褪绿、叶片黄化等症状,疑似被番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,To CV)感染,同时叶片背面聚集了大量烟粉虱。采用To CV热激蛋白(heat shock protein 70,HSP70)序列的特异性引物对采集的番茄、茄子、辣椒、马铃薯样品和烟粉虱样品进行RT-PCR检测,均扩增出目标条带,且扩增序列与北京番茄To CV分离物(KC887999.1)部分序列相似度为99.0%,确认采集样品被To CV感染。4种茄科蔬菜To CV的感染率达70%~100%;发病叶片上烟粉虱的带毒率为66.7%~87.5%;鉴定出烟粉虱的生物类型为MED烟粉虱。这是湖南省首次确认该病毒,需要引起关注和加强防范。  相似文献   

不同保鲜膜对草莓果实贮藏品质的影响     

马欣  宗静  韦强 《北方园艺》2018,(13):120-124

以草莓"红颜"为试材,以PVC(聚氯乙烯)膜为对照,研究了PE(聚乙烯)膜、PHM(多层PE系)膜、纳米银膜、PVDC(聚偏二氯乙烯)膜等5种保鲜处理在(4.0±0.6)℃贮藏条件下对草莓果实失重率、硬度和可溶性固形物、维生素C、可溶性糖含量及感官品质的影响。结果表明:相较于PVC保鲜膜,PVDC膜与PHM膜能够较好的保持草莓果实的贮藏品质。其中PVDC膜包装可以有效地减少果实水分散失,保持草莓的硬度以及果实可溶性固形物含量;PHM膜包装可以较好的保持草莓果实可溶性固形物、维生素C、可溶性糖含量,维持果实的营养成分。  相似文献   

小麦条锈菌夏孢子在不同温度下离体处理后的致病力研究     

黄瑾  张勃  孙振宇  贾秋珍  曹世勤  骆惠生  王晓明  金社林 《甘肃农业科技》2018,(3):39-42

以小麦条锈菌高感品种铭贤169为试验材料,设置了-50、-45、-40、-35、-30、-25、-20℃7个不同温度梯度,研究了小麦条锈菌夏孢子离体处理后的致病力。结果表明,在-35~-20℃低温下,条锈菌夏孢子可存活10 d,接种寄主小麦后病叶率2.36%~74.39%,平均严重度0.13%~4.21%;-40℃下可存活8 d,病叶率1.23%~2.78%,平均严重度0.01%~0.29%;-50℃下可存活6 d,病叶率1.04%~1.39%,平均严重度0.01%~0.17%。随着处理温度的降低,夏孢子致病力逐渐下降。在相同温度下,随着夏孢子离体处理时间的延长,致病力亦呈逐渐下降趋势。  相似文献   

Molecular Mechanism of Induction on Apoptosis of Human Esopha- geal Cancer HCE-4 Cells by Active Components from Astragalus membranaceus     

Chang LIU  Chenghao JIN  Hao WANG  Jiaru WANG  Jinqian LI  Wanting XU  Xianji PIAO  Yang LIU  Yi ZHANG  Yinghua LUO  Yiqin WU 《Medicinal Plant》2018,(1):63-66

  相似文献   

青稞粮草双高新品种藏青27的选育与栽培技术     

靳玉龙  周珠扬  白婷  强小林 《大麦与谷类科学》2017,34(3)

选育粮草双高型青稞新品种,既是西藏自治区粮食安全保障的要求,也是种植区农户种养结构改善的需要。藏青27以中晚熟高秆大粒丰产型新品种藏青320为母本,用中熟中秆大穗多粒的美国大麦品种做父本杂交,1987年形成杂交组合,2016年通过西藏自治区作物品种审定后推广。该品种在西藏全区多点生产比较示范中,平均产量为326.7 kg/667 m~2,比对照喜拉19号增产15.8%,丰产性较好。本文从选育过程、不同海拔种植地的播种期、播种管理、栽培等方面进行了阐述,以期为该品种的大面积推广提供参考。  相似文献   

超高效液相色谱—串联质谱法检测鸡血液样品中喹诺酮类药物残留     

超高效液相色谱&#x  串联质谱法检测鸡血液样品中喹诺酮类药物残留 《畜牧与饲料科学》2019,40(11):13-16

旨在建立鸡血液样品中多种喹诺酮类药物残留的超高效液相色谱—串联质谱方法。样品经乙腈提取,经Waters Acquity UPLC BEH C₁₈色谱柱分离,以甲醇和0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,电喷雾正离子（ESI⁺）模式电离,MRM扫描模式检测。经方法学验证,该方法的线性关系、回收率、精密度均符合要求。应用超高效液相色谱—串联质谱法建立了鸡血液样品中多种喹诺酮类药物同时检测的方法,实现了动物血液样品中12种喹诺酮类药物同时定性、定量分析。  相似文献   

以球果量、雄花量等数量性状对油松优良无性系的再选择   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘梅  安守芹  吕馨  王永红 《内蒙古林业科技》2001,(Z1):6-9

本研究对油松无性系种子园 2 2个无性系的球果量和雄球花量进行观测调查 ,并对数据进行处理。通过无性系内和无性系间的方差分析、聚类分析和秩序排序法对各无性系进行分类和排序。研究结果表明 :无性系间球果量和雄球花量的差异极显著 ,而无性系内差异不显著。并筛选出 1 61 #,6#,2 9#,63 #,78#5个球果数量大 ,占总数的 46% ,雄花量高 ,占总数的 5 7.6%的无性系为优良无性系  相似文献