表达口蹄疫病毒P1基因的重组伪狂犬病病毒TK/gG-/PgG-P1的构建     

金梅林  李祥敏  钱平  郭东春  徐卓菲  陈焕春 《中国兽医学报》2004,24(6):525-527

为了构建口蹄疫与伪狂犬病二价基因工程疫苗株 ,将口蹄疫病毒 (FMDV) P1基因插入到伪狂犬病病毒 (PRV)通用载体 p Pg G- uni中 ,得到 PRV转移载体 p Pg G- P1。将转移载体与 Eco R 线性化后的 PRV弱毒疫苗株 TK- /g G- / lac Z 基因组 DNA共转染 PK- 15细胞 ,转染产物经多次空斑纯化和 PCR鉴定 ,获得了纯化的重组 PRV TK- /g G- / Pg G- P1,重组病毒基因组 DNA经酶切鉴定进一步表明 ,FMDV的 P1基因已成功地整合到 PRV弱毒疫苗株的基因组中。Western blot试验表明 ,FMDV P1基因在重组 PRV中得到表达。该研究为进一步研制口蹄疫与伪狂犬病二价基因工程疫苗奠定了坚实的基础  相似文献   

H5N1亚型禽流感病毒核蛋白基因的克隆及分子进化分析     

王振国  金宁一  马鸣潇  金扩世  张洪勇  尹革芬  葛淑敏 《中国预防兽医学报》2004,26(6):436-438

用RT-PCR法,以1株h5N1亚型禽流感病毒RNA为模板,扩增了NP全基因cDNA.将cDNA克隆于pMD18-T载体,并对其进行测序.测序结果表明所克隆的1542个核苷酸的片段包含了核蛋白完整阅读框架,其中编码区为1497个核苷酸,编码498个氨基酸.将其序列与6株A型流感病毒NP基因序列进行比较,各毒株之间NP基因核苷酸序列同源性为92.5%～95.9%,编码的氨基酸同源性为97.0%～98.4%.本研究通过分子进化分析揭示了各毒株间的亲源关系.  相似文献   

三江白猪线粒体DNA-RFLP的分析     

杨隽李馨  耿忠诚 《黑龙江畜牧兽医》2004,(3):11-13

采用22种限制性内切酶分析了三江白猪线粒体DNA的多态性。结果表明：在60头个体中检出30种限制性态型．归结为7种基因单倍型；其间的差异来自少数限制性位点的突变。单倍型间平均遗传距离为0．35%，群体遗传多态程度为0．044％。三江白猪遗传多样性非常贫乏，说明三江白猪与地方种猪起源于一个共同祖先，在品种形成早期受到创立者效应的制约。  相似文献   

应用聚合酶链式反应(PCR)技术检测野猪的氟烷基因   总被引：2，自引：0，他引：2  

袁子国耿忠诚  靳锐迟兆江  李修明刘丽丽 陈建华 《黑龙江畜牧兽医》2005,(5):14-16

猪应激综合征(Procine Stress Syndrome,PSS)是指猪在应激因子的作用下发生恶性高热综合症(Malignant Hyperthermia Syndrome，MHS)。试验随机选取18头纯种野猪提取基因组DNA进行聚合酶链式反应，扩增得到RYR。基因特异片段，经过HhaⅠ酶切阳性鉴定可断定这18头猪的RYR1基因都没有发生突变，因此不存在猪应激综合征问题。  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒缺失变异株的基因组特征   总被引：51，自引：1，他引：51  

高志强  郭鑫  杨汉春  陈艳红  查振林 《畜牧兽医学报》2005,36(6):578-584

对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)分离株HB2(sh)／2002的全基因组序列进行了测定与分析。该毒株基因组全长为15373nt(不包括PolyA尾)，与国内外美洲型PRRSV分离株全序列相似性介于88．7％～95．1％之间。序列分析表明，该毒株是1个天然存在缺失的变异毒株，其ORFla的Nsp2存在编码12个氨基酸的连续36个核苷酸的缺失，ORF、3存在编码1个氨基酸的3个核苷酸的缺失。这是国内外首次发现PRRSV存在缺失变异现象，研究结果补充和丰富了PRRSV毒株的基因组信息数据，为深入研究该毒株的遗传与变异及其与生物学特性的关系奠定了基础。  相似文献   

猪附红细胞体和弓形体病继发猪瘟的诊断与防制     

金巍  金升藻  李鹏  刘国平 《畜牧兽医杂志》2005,24(4):63-64

2004年2月至3月，湖北剂州某市八宝、中洲、老城、胡家岗和荆闸等乡镇自然村多家个体养猪专业户在断奶仔猪中爆发一种以体温高、贫血、黄疸、精神沉郁，先便秘后拉稀为特征的传染病。医治不见好转，先后死亡450多头。于3月中旬和下旬分2批将病猪送到我院进行诊断，经剖检、实验室检验和动物试验，最后确诊为猪附红细胞体和弓形体病继发猪瘟，采用超量免疫及综合防制措施，使本病得到了有效的控制。  相似文献   

人工诱发鸡新城疫的攻毒条件的比较研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

周秀红  祁克宗  朱良强  潘鑫 《水禽世界》2005,(8):10-12

将4周龄淮南麻黄鸡80羽随机平均分成4组：口鼻接种组、皮下接种组、肌肉接种组和空白对照组，分别用不同稀释度的NDV攻毒，观察攻毒结果并统计死亡情况。结果不同攻毒途径的致病性有差异，肌肉注射致病性最强，皮下注射次之，滴鼻滴口最弱。不同攻毒途径所需的攻毒剂量各不相同，滴鼻滴口所需的剂量最大，皮下注射次之，肌肉注射量最小。本文对造成不同攻毒途径致病性差异的原因进行了深入探讨。人工诱发新城疫，建议采用注射途径。  相似文献   

日粮铜源及其水平对猪下丘脑生长抑素分泌的影响   总被引：5，自引：1，他引：5  

杨连玉  杨文艳  李家奎  郑鑫  王哲  张乃生  王兴龙  欧阳红生  张永亮 《中国兽医学报》2005,25(2):198-200

选用军牧 1号断乳仔猪 75头 ,随机分为 5组 ,采用完全随机化设计进行生长试验 ,研究了 2种铜源 (硫酸铜、蛋氨酸铜 )、3个添加水平 (5、12 5、2 5 0 mg/ kg)的日粮对猪生长及生长抑素分泌的影响 ,同时研究了下丘脑儿茶酚胺的变化与生长抑素的关系。结果表明 :日粮中添加 12 5 m g/ kg(P <0 .0 1)、2 5 0 mg/ kg(P<0 .0 5 )硫酸铜 ,12 5 mg/ kg(P<0 .0 1)、2 5 0 mg/ kg(P<0 .0 5 )蛋氨酸铜 ,可显著提高仔猪增重 ;而上述添加 5 mg/ kg硫酸铜组猪下丘脑生长抑素含量为 2 2 5 .74 ng/ g组织 ,显著高于 12 5 mg/ kg(P<0 .0 5 )、2 5 0 mg/ kg(P<0 .0 5 )硫酸铜组和 12 5 mg/ kg(P<0 .0 1)、2 5 0mg/ kg(P<0 .0 1)蛋氨酸铜组。下丘脑生长抑素含量与去甲肾上腺素、多巴胺含量呈负相关关系 (P<0 .0 5 )。据此认为 ,高剂量铜通过调节儿茶酚胺代谢抑制下丘脑生长抑素分泌 ,是其促生长调控的途径之一  相似文献   

猪2型圆环病毒核酸疫苗免疫效应研究   总被引：9，自引：0，他引：9  

宋云峰  肖少波  金梅林  张松林  陈焕春 《畜牧兽医学报》2005,36(10):1049-1054

PCR扩增PCV2 ORF2和BVP22基因。将ORF2基因克隆入真核表达载体pCDNA3．1（＋），构建了pCORF2作为核酸疫苗免疫小白鼠。同时将具有蛋白转导功能的BVP22基因分别克隆到ORF2基因的上游和下游，使二者融合表达，命名为pCORF2BVP22和pCBVP220RF2。分4组肌肉免疫BALB/c小白鼠，分别注射pCDNA3．1（＋）、pCORF2、pCORF2BVP22和pCBVP220RF2，共免疫2次，间隔2周，分别于首免后2周和二免后4周采血，ELISA法检测体液抗体。同时为在体外验证ORF2和BVP22基因的真核表达，将ORF2和BVP22基因分别克隆入pEGFP-N1载体，构建了pNORF2和pNBVP22，转染Hela细胞后在荧光显微镜下观察到了ORF2和BVP22在体外的瞬时高效表达。结果显示，通过两次免疫后，各疫苗组均产生了针对ORF2的体液抗体，同时证明BVP22可增强核酸疫苗的免疫效果，其中以BVP22在ORF2上游效果更好。本研究为防制猪2型圆环病毒感染提供了较为理想的侯选疫苗。  相似文献   

猪伪狂犬病基因缺失疫苗的制备、安全性、免疫原性、保存期测定及区域试验   总被引：3，自引：1，他引：3  

何启盖  方六荣  吴斌  刘正飞  吴美洲  肖少波  金梅林  陈焕春 《畜牧兽医学报》2005,36(10):1055-1063

为了提供有效的伪狂犬病疫苗，用鸡胚成纤维细胞扩大培养了PrV HB-98突变株（TK^-/gG^-/LacZ^＋），研制了伪狂犬病基因缺失疫苗，并对该疫苗经肌肉接种、经口等免疫途径的最小免疫剂量进行了测定，同时也对4批疫苗的安全性、效力、免疫期和保存期进行了检测；同时将4批疫苗用于免疫23个猪场的母猪、新生仔猪和育肥猪进行区域试验。测定结果表明，疫苗经上述两种途径接种对不同阶段猪的最小免疫剂量均为10^5.0 TCID50；10倍免疫剂量的疫苗对初生仔猪、15日龄仔猪和妊娠母猪是安全的，免疫猪能抵抗强毒的攻击；疫苗在4℃和-20℃下分别可保存6个月和12个月。对伪狂犬病毒抗体阴性的70日龄商品猪和种猪的免疫期为6个月。田间试验表明，4批猪伪狂犬病基因缺失疫苗安全有效，并可用于仔猪发病时的紧急接种。为猪伪狂犬病基因工程疫苗的制备与应用提供了有力的依据。  相似文献