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941.
小球隐孢子虫子孢子表面蛋白CP15/60基因的克隆和序列分析 总被引:3,自引:0,他引:3
将小球隐孢子虫子孢子表面蛋白(CP15/60)编码区基因克隆及测序,并对其抗原决定簇进行分析。抽提牛源小球隐孢子虫孵囊基因组DNA,用聚合酶链反应(PCR)扩增编码CP15/60的基因,然后将其克隆到p MD18-T载体中,用双脱氧链末端终止法测DNA序列。结果,用PCR扩增获得了CP15/60的编码区基因,并测定了该基因编码区序列。与GebBank比较,核苷酸序列同源性为:98.9%;推导出的氨基酸序列同源性为:99.3%。 相似文献
942.
AIM: To determine the effects of recombinant human interleukin-10(rhIL-10) on proliferation of vascular smooth muscle cells(VSMC) by TNF-α and PDGF-BB and neointimal hyperplasia after rat carotid arterial injury.METHODS: Rat aortic VSMC was cultured and treated with rhIL-10 with or without tumor necrosis factor-α(TNF-α) and platelet-derived growth factor-BB (PDGF-BB), respectively.Proliferation of VSMC was quantified by colormetric assay.Cell cycle analysis was performed by flow cytomertry.SD rats were treated with recombinant human IL-10(rhIL-10) for 3 days after carotid arteries injury.Neointima to media area ratio at the site of arterial injury was measured at 28 days after balloon injury.RESULTS: Compared to control,both TNF-α and PDGF-BB stimulated VSMC proliferation. rhIL-10 alone had no effect on VSMC growth.With TNF-α or PDGF-BB stimulation,rhIL-10,at dose as low as 10 μg/L,inhibited VSMC growth( P <0.05) for both cases.Cell number in G 0/G 1 phase of PDGF-BB and rhIL-10 co-treatment group was higher than those of PDGF-BB treatment alone( P <0.01) by flow cytometry analysis.The same results were observed in TNF-α and rhIL-10 co-treatment group( P <0.01).Compared with the arterial injury group,neotima/media area ratio of recombinant human IL-10 group was reduced at 45%( P <0.01).CONCLUSIONS: The anti-inflammatory cytokine rhIL-10 inhibits TNF-α and PDGF-BB-induced VSMC proliferation,respectively.These results suggest the possibility that recombinant human IL-10 as a potential therapeutic approach prevents neointimal hyperplasia. 相似文献
943.
AIM: To study the effect of bFGF on cell proliferation, secretion of type I collagen and expression of integrin β1 in human kidney fibroblasts(KFB). METHODS: The KFB was cultured and stimulated by bFGF in vitro. The proliferation and collagen I secreting of KFB, the expression of integrin β1 were measured by MTT, ELISA and flow cytometer, respectively. RESULTS: bFGF(25-50 μg/L) could obviously stimulate the cell proliferation(P< 0.05), promote the secretion of collagen I(P< 0.05) and enhance the expression of integrin β1(P< 0.05) in human kidney fibroblast. CONCLUSION: bFGF could induce renal interstitial fibrosis by promoting cell proliferation, secretion of collagen I and integrin β1 expression of KFB. 相似文献
944.
鹅呼肠孤病毒GRV1株分离鉴定及其σC基因特征性分析 总被引:2,自引:0,他引:2
从患运动障碍的雏鹅肝脏和脾脏分离到一株鹅源呼肠孤病毒,该病毒经琼脂扩试验可与番鸭呼肠孤病毒(MuscovyDuckReovirus,MDRV)的抗血清发生交叉反应,推测其为呼肠孤病毒,命名为GRV1。参考GenBank禽呼肠孤病毒(AvianReovirus,ARV)和番鸭呼肠孤病毒小外壳蛋白(minorcoreprotein)σC蛋白基因序列设计合成了一对引物,病毒RNA经RT-PCR扩增,产物为810bp,与预期的目的片断大小一致,测序结果表明σC基因在280~1089区间是一个开放性阅读框架,编码269个氨基酸的蛋白,GC含量为49.88%,等电点为6.497,分子量为29.4Ku。核苷酸序列经DNAStar(6.0)软件分析,与法国番鸭呼肠孤病毒89026株核苷酸同源率为93.0%,与鸡呼肠孤病毒σC基因同源率仅为21%~25%,同源性分析表明鹅呼肠孤病毒与番鸭呼肠孤病毒可能来自同一祖先,建议将鹅呼肠孤病毒连同番鸭呼肠孤病毒归属为正呼肠孤病毒属第二个亚群中不同于禽和内尔森贝海湾呼肠病毒的独立基因群。由蛋白质分析软件Anthepro5.0和MultiCoil软件分析表明,抗原区多位于N末端,没有跨膜区,σC为三股螺旋结构,这是我国第一次在鹅体内分离到呼肠孤病毒,同时也是第一次在数据库中提供σC的序列。 相似文献
945.
本研究将GHRH基因克隆到塞姆利基森林病毒(SFV)复制子质粒型表达载体pCMV-Rep-lacZ,构建了真核表达载体pCMV-Rep-GHRH。采用脂质体介导将表达质粒pCMV-Rep-GHRH转染293细胞,经RT-PCR、IFA、Tricine-SDS-PAGE和Western Blot检测,证明表达质粒pCMV-Rep-GHRH在293细胞中正确地表达了GH-RH多肽分子。本研究还利用放免法检测质粒载体转染细胞培养上清中GHRH浓度,初步比较了RNA复制子载体pCMV-Rep-GHRH和普通载体(pIRES-GHRH和pcDNA3-GHRH)的表达效率,结果表明,转染48 h,RNA复制子载体表达GHRH的含量显著高于普通载体,分别比pIRES-GHRH和pcDNA3-GHRH高出36.12%(P<0.05)和67.94%(P<0.05)。结论:构建的真核表达载体pCMV-Rep-GHRH能够在真核细胞293中表达GHRH多肽分子,且表达水平显著高于普通载体,为下一步更好地调控动物生长以提高动物生产性能奠定基础。 相似文献
946.
利用A型魏氏梭菌滤液处理100倍浓缩的IBV-M41株病毒液,成功研制出IBV血凝抗原,HA效价为1∶256~1∶1024,且仅与IBV阳性血清发生反应,而不与其它标准阳性血清反应。建立了IBV的血凝抑制(HI)反应条件,以梅里亚公司和荷兰GD公司生产的IBV商品血凝抗原作为对照,对免疫鸡和SPF鸡血清进行了抗体测定,检测结果无明显差异,且HI检测结果与IDEXX诊断试剂盒的结果符合率为94.2%。研究表明:本实验所建立的方法敏感性高、特异性强,适合于SPF鸡监测和IB疫苗免疫效果检测。 相似文献
947.
948.
超临界CO2 萃取西番莲籽油及其成分分析 总被引:1,自引:0,他引:1
采用正交试验方法研究了超临界CO2 萃取西番莲( Passiflora edulis Sims. ) 籽油的技术体系,并用气相色谱—质谱联用仪对西番莲籽油的化学成分进行了分析。结果表明, 超临界CO2 萃取西番莲籽油的最佳工艺条件为: 萃取压力30MPa, 萃取温度45℃, 分离温度40℃, 萃取时间70 min, 在此条件下油脂萃取率为28.4%。GC - MS分析的结果显示, 西番莲籽油的主要成分是脂肪酸和不饱和烃类。饱和脂肪酸以棕榈酸为主, 不饱和脂肪酸主要是亚油酸和亚油酸乙酯, 占脂肪酸总量的75.8%; 不饱和烃类主要是角鲨烯, 含量为17.4%。 相似文献
949.
本试验旨在探究不同能量水平对湖羊瘤胃发酵特性和微生物组成的影响。选取湖羊公羊48只(体重为(17.77±1.15) kg)随机分为2组:1)对照组(C组),代谢能ME=8.83 MJ·kg-1;2)高能组(H组),ME=10.84 MJ·kg-1。每组6个重复,每个重复4只羊。试验期105 d,其中预试期15 d,正试期90 d。试验结束后,采集瘤胃液测定瘤胃发酵参数,同时对微生物细菌V3-V4区进行16S rRNA高通量测序以检测瘤胃微生物组成。结果显示:1) H组和C组在瘤胃pH、总挥发性脂肪酸、乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸及乙丙比、氨态氮和微生物菌体蛋白浓度差异均不显著(P>0.05);2)物种多样性结果显示,H组的Chao 1、Observed species、PD whole tree和Shannon指数均显著低于C组(P<0.05);3)物种注释发现,拟杆菌门(Bacteroidetes)和厚壁菌门(Firmicutes)占比最高,但两者的相对丰度在H组和C组间差异均不显著(P>0.05),H组的瘤胃球菌属(Ruminococcus)和厌氧弧菌属(Anaerovibrio)相对丰度均显著高于C组(P<0.05)。在本试验条件下,提高日粮能量水平对瘤胃发酵特性影响不显著,但是会降低瘤胃微生物的丰富度和均匀度,并改变部分菌属的相对丰度。 相似文献
950.