羊种布鲁氏菌dhbC基因的克隆、原核表达及生物信息学分析     

李宝宝  聂鑫  杨小健  曹瑞勇  朱姝  黄海峰  张振兴  彭冬梅  李国华  李亚颖  王凤阳  杜丽 《中国畜牧兽医》2017,44(7):1947-1953

试验旨在对羊种布鲁氏菌dhbC基因进行克隆及原核表达,并对其表达蛋白进行生物信息学分析。参照GenBank中布鲁氏菌M5-90株dhbC基因序列信息设计1对引物,通过PCR反应扩增获得dhbC基因片段。将得到的dhbC基因连接到pMD20-T载体,构建pMD20-T-dhbC重组质粒并转化大肠杆菌（E.coli） DH5α感受态细胞,提取质粒进行酶切鉴定。鉴定正确后构建pET28a-dhbC重组质粒,转化E.coli BL21（DE3）感受态细胞。经IPTG诱导表达,表达产物用SDS-PAGE和Western blotting进行分析。运用生物信息学软件DNAMAN及相关在线网站ProtParam、SOPMA及Protscale对dhbC基因编码的氨基酸序列进行生物信息学分析。结果表明,试验成功克隆了大小约为1 093 bp的dhbC基因并进行了蛋白表达,表达的融合蛋白大小约为47 ku,且主要以包涵体形式存在。dhbC蛋白的分子式为C₁₈₆₆H₂₉₆₈N₅₄₄O₅₆₂S₁₅,分子质量为42 496.3 u,理论等电点（pI）为5.81,消光系数为33 835,不稳定系数为36.76,疏水指数为86.19,总平均疏水性（GRAVY）为-0.215。预测在哺乳动物网织红细胞的半衰期为30 h,其二级结构以α-螺旋（41.94%）和无规则卷曲（31.46%）为主。  相似文献   

羊源类鼻疽伯克霍尔德菌BPSS1512基因克隆、原核表达及其蛋白的生物信息学分析     

曹瑞勇  聂鑫  李宝宝  张振兴  黄海峰  李亚颖  彭冬梅  李国华  朱姝  杨小健  杜丽  王凤阳 《中国畜牧兽医》2017,44(8):2234-2240

为克隆羊源类鼻疽伯克霍尔德菌BPSS1512基因,并对其编码的蛋白进行生物信息学分析,以类鼻疽伯克霍尔德菌基因组为模板,参照GenBank中Burkholderia pseudomallei K96243株基因组DNA序列（登录号：NC_006351.1）设计引物,PCR扩增BPSS1512基因,构建重组质粒,SDS-PAGE和Western blotting分析其蛋白表达,DNAMAN等软件对BPSS1512基因编码的氨基酸序列进行分析。结果显示,PCR扩增成功得到1 425 bp的特异性条带,BamHⅠ和Hind Ⅲ双酶切后得到约为5 000和1 500 bp的条带,表明重组质粒pET-28a-BPSS1512构建成功,IPTG浓度为10 mmol/L,诱导时间8 h为最适宜的诱导条件。BPSS1512基因编码的蛋白质分子质量为53 ku,在包涵体中表达;在BPSS1512蛋白二级结构中,α-螺旋、延伸链和无规卷曲分别占24.05%、14.77%、61.18%,并且疏水性区域分布在-2.0~+2.4之间,说明BPSS1512蛋白具有较强的疏水性,本试验结果可为类鼻疽病的防制提供参考依据。  相似文献   

鸽嗉囊胀大的病因及防治     

张振兴 《农村百事通》2011,(21)

能引起鸽嗉囊胀大的疾病很多,如嗉囊炎、嗉囊下垂、嗉囊积食、嗉囊积气和嗉囊积液等,不同的疾病其防治措施也有区别。  相似文献   

糖基化纳米粒子的合成及其在唾液酸结合蛋白检测中的应用     

祁晓晓  李学兵  周绪正  张继瑜  张振兴  吴培星 《中国农业大学学报》2019,24(12):86-95

为实现流感病毒的简便快速检测,建立一种基于糖基化纳米粒子探针的荧光共振能量转移(FRET)检测方法。采用配体交换法,将合成的唾液酸寡糖链修饰到量子点和金纳米粒子表面,制备出了糖基化量子点和糖基化金纳米粒子,并对其理化性质进行了表征。结果表明:这2种纳米材料均具有良好的水溶性和光学特性,可分别作为能量供体和受体探针用于FRET检测体系;建立了一种基于FRET的唾液酸结合蛋白检测体系,麦胚凝集素(WGA),最低可检测浓度为4 nmol/L,证明该体系可快速(5 min)且灵敏地检测这种唾液酸结合蛋白。由于流感病毒表面的血凝素(HA)可特异性识别并结合唾液酸寡糖,本研究为进一步研发基于FRET的简单、快速的流感病毒检测方法奠定了基础。  相似文献   

2020年云南省鸡呼吸系统疫病病因分析     

张振兴  李占鸿  王斌  宋建领 《家畜生态学报》2024,(3):68-74

为了分析云南省2020年度鸡呼吸系统疫病病因,分别在昆明、红河、曲靖、大理、楚雄、昭通等地111个养鸡场采集疑似发生呼吸系统疫病鸡肺脏、脾脏、喉气管等组织混合样品111份。采用PCR检测方法对疑似样品进行副鸡禽杆菌、鸡毒支原体(MG)、滑液囊支原体(MS)、新城疫病毒(NDV)、传染性支气管炎病毒(IBV)、传染性喉气管炎病毒(ILTV)、禽流感病毒(AIV)、鼻气管鸟杆菌(ORT)等传染性疾病病原核酸检测,对部分核酸样品进行测序验证。结果表明,副鸡禽杆菌、MG、MS、NDV、IBV、ILTV、ATV、ORT的检测阳性率分别为18.92%(21/111)、10.81%(12/111)、5.41%(6/111)、4.50%(5/111)、2.70%(3/111)、39.64%(44/111)、9.00%(10/111)、18.92%(21/111);混合感染占32.43%(36/111),2种、3种和4种病原混合感染分别占18.92%(21/111)、11.71%(13/111)和1.80%(2/111)。由此可见,云南省2020年度鸡呼吸系统疾病由多种原因引起,其中以副鸡禽杆菌、ILT...  相似文献   

非洲猪瘟的风险防控及综合防控举措     

张振兴  王斌  郭亮  宋建领 《中国畜禽种业》2022,(2):129-130

2007年以来,非洲猪瘟在全球多个国家发生,2018年8月首次传入我国,传入后仅3个月就已造成我国生猪产业直接或间接损失达到几十亿元,给我国生猪产业带来了灾难.本文通过对非洲猪瘟传入我国的潜在风险点进行分析,为非洲猪瘟疫情防范工作提供可行性建议,为各养殖场做好非洲猪瘟综合防控工作提供参考.  相似文献   

鸡减蛋综合症（EDS_（76））病毒的研究Ⅱ．GC~2株蛋白性质的研究     

罗怡珊  李天宪  冯锋  赵林  姜平  张振兴 《畜牧兽医学报》1995,(6)

ＧＣ２株提纯后经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析得到１３条多肽，分子量范围从１１２０００～１８０００道尔顿，ＧＣ２株抗原与标准株比较为同一抗原性．  相似文献   

兔病防治技术问答(三)     

张振兴 《经济动物学报》1992,(4)

<正> 十八、伪结核耶新氏菌病曾发生过多次,应如何防制? 答:兔伪结核耶新氏菌病是由伪结核耶新氏杆菌引起的一种慢性传染病,曾在我国浙、沪、豫等地兔群中流行过。实验兔群颗粒饲料中缺乏青绿饲料时能增强易感性。 病原 伪结核耶新氏菌形态多样,球杆状、杆状、常呈两极着色。在22℃培养时菌落为S型,表面光滑、湿润、细小圆形、半透明,菌体有鞭毛能运动;37℃培养的菌落为R  相似文献   

竹枝引起创伤性心包炎导致牛死亡     

张春棠  张振兴  宋宝治 《畜牧与兽医》1984,(4)

<正> 我场一头93号母牛,20月龄,1983年1月配种,是第一胎妊娠的母牛,于1983年7月11日深夜一点钟突然死亡于运动场内。解剖主要病变是:瘤胃内充满气体,网胃前下方偏右侧有一长达约9.5厘米、直径1毫米的竹枝穿出网胃,刺破膈肌、心包膜直达心脏内约0.5厘米。  相似文献   

水貂致病性大肠杆菌的血清型、溶血性和耐药性     

张振兴  高素兰 《经济动物学报》1984,(2)

<正> 水貂大肠杆菌病是国内普遍存在的一种急性传染病,多发生于40—60日龄的幼貂群,发病率和死亡率都较高,临床上主要表现下痢、痉挛。迄今,对水貂致病性大肠杆菌研究的报道不多,有关其血清型的调查分析更少。近几年来,我们在江苏部分地区的自然病例中分离到一些水貂致病性大肠杆菌菌株,并对其血清型、溶血性和耐药性进行了鉴定检测。现将结果报告于下。  相似文献