多杀性巴氏杆菌中recN基因的克隆、原核表达及生物信息学分析     

章泸尹  郑义盈  王成强  安琪  张萌萌  黄海峰  张振兴  李宝宝  朱姝  杨小健  曹瑞勇  聂鑫  杜丽  王凤阳 《中国畜牧兽医》2019,46(3):661-668

试验旨在对多杀性巴氏杆菌recN基因进行克隆和原核表达，并对其表达蛋白进行生物信息学分析。参照GenBank中recN基因序列（登录号：CP003313.1）设计1对引物，通过PCR扩增获得目的基因片段，构建pET-28a（+）-recN重组质粒并转化E.coliDH5α感受态细胞，提取质粒进行酶切鉴定，将鉴定正确的重组质粒转化E.coliBL21（DE3）感受态细胞，经IPTG诱导表达，对融合蛋白进行SDS-PAGE及Western blotting鉴定。结果表明，试验成功克隆了大小约为1 677 bp的recN基因序列，通过诱导表达的His-Tag融合蛋白大小约为66.94 ku，主要以包涵体形式存在。经生物信息学分析，recN蛋白的分子式为C₂₇₃₅H₄₄₂₈N₇₈₆O₈₅₅S₁₆，消光系数为24 785，不稳定系数为43.99，属于不稳定蛋白；理论等电点（pI）为5.62，为酸性蛋白；总平均亲水性为-0.316，与试验表达的包涵体蛋白性质相同，即同为疏水性蛋白；recN蛋白在哺乳动物网织红细胞的半衰期为30 h，在酵母（体内）中的半衰期>20 h，在大肠杆菌（体内）中的半衰期>10 h；二级结构主要以α-螺旋（64.87%）及无规则卷曲（21.00%）为主；经疏水性分析，预测该蛋白有3个高疏水性区域和9个高亲水性区域。本试验结果为进一步探究多杀性巴氏杆菌recN基因的功能提供了参考依据。  相似文献   

变步长的最小二乘递推算法     

黄海峰  张荣标  汪永志 《农机化研究》2004,(2):89-91

针对固定步长的最小二乘递推算法在信号辨识中采集数据量大、辨识速度较慢的缺点,提出了变步长的最小二乘递推算法,在保证同等辨识精度的条件下, 采集的数据明显减少,大大提高了辨识速度。  相似文献   

进出口植物检疫工作的有效开展     

黄海峰 《农民致富之友》2018,(16)

正随着经济社会的不断发展以及经济全球化的发展,各国之间的经济贸易往来不断加强,进出口植物作为进出口物品的一个重要环节,其检疫工作尤为重要。进出口植物检疫工作的有效开展对贸易安全和贸易发展具有重要意义,如何有效地做好进出口植物的检疫工作是各国研究的重要课题。本文将对进出口检疫工作的有效开展进行探究。1我国进出口植物检疫工作的现状当前我国对于进出口植物的检疫工作越来越严格,并出台了相关法律用以规范植物检疫,1982年6月4日由国务院发布了  相似文献   

珠三角农业地质与生态地球化学调查评价信息系统建设   总被引：1，自引：0，他引：1  

楼旭逵  黄海峰  张俊岭 《安徽农业科学》2009,37(5):2298-2301

珠三角农业地质与生态地球化学调查评价信息系统建设旨在通过地理信息系统、数据库等信息技术对多源、异构、海量的农业地质与生态地球化学数据进行有效管理,并以此为基础进行评价：介绍了系统总体设计情况,重点对系统的数据管理与生态地球化学评价两大核心功能进行阐述。  相似文献   

BCC铁中刃型位错与铜沉淀物相互作用的原子尺度模拟     

黄海峰  买买提明·艾尼  高桥昭如  菊池正纪 《沈阳农业大学学报》2009,40(4)

为了从原子尺度弄清楚因辐射损伤而出现的第二相铜沉淀物对位错运动状况的影响,在Osetsky模型和Malerba势能基础上,通过共轭梯度法进行能量最小化,对BCC铁中刃型位错与铜沉淀物的相互作用进行了模拟.再现作用过程的同时,重点探讨了铜沉淀物直径、间距等因素对相互作用的影响,并将模拟结果与连续体理论模型进行了对比分析.结果表明:铜沉淀物直径越大,相互作用越强,位错越难越过沉淀物.而铜沉淀物间距越大,位错越容易越过沉淀物,Malerba势能下的模拟结果相比Ackland势能下的模拟结果与连续体理论模型结果相符得更好.  相似文献   

上海市“198”区域减量化修复效果后评估体系     

徐丰冰  陈太聪  黄海峰 《绿色科技》2019,(14)

指出了为推动上海市低效工业用地减量化,完善"198"地区土地使用性质的安全转变,构建了上海市"198"减量化地块修复效果后评估体系。该体系的主要框架包括决策目标层、中间层和指标层;通过层次分析辅助软件来完成一致性比例检验与每个指标权重,最终累计相加得分值对应的评价等级即可获得减量化地块修复效果后评估的结果。  相似文献   

当前家兔腹泻病要引起高度重视     

王少军  黄海峰  王景存 《北方牧业》2008,(14)

<正>1兔细菌性腹泻1.1沙门氏杆菌病主要发生于幼兔和怀孕25天以后的母兔。急性病例表现为败血症而突然死亡,一般常见为坏死性肠炎、呼吸困难、消瘦和下痢,粪便呈糊状,带泡沫,有时带血。在管理不善、气候变化、卫生条件差、机体免疫力下降时,病原体可大量繁殖,引起该病的  相似文献   

兔葡萄球菌病的防治     

王少军  王景存  黄海峰 《北方牧业》2008,(15)

<正>1临床症状兔葡萄球菌病有多种病型,幼兔多发生败血症,成兔多发生局部皮肤炎性脓肿。败血症型个别病兔不显症状突然死亡。一般病兔体温升高,食欲废绝,精神沉郁。有的仔兔生后2～3天,在皮肤上尤其是腹、胸、颈、颔下和腿内侧的皮肤,  相似文献   

多杀性巴氏杆菌中recN基因的克隆、原核表达及生物信息学分析     

章泸尹  郑义盈  王成强  安琪  张萌萌  黄海峰  张振兴  李宝宝  朱姝  杨小健  曹瑞勇  聂鑫  杜丽  王凤阳 《中国畜牧兽医》2019,(3):661-668

试验旨在对多杀性巴氏杆菌recN基因进行克隆和原核表达,并对其表达蛋白进行生物信息学分析。参照GenBank中recN基因序列(登录号:CP003313.1)设计1对引物,通过PCR扩增获得目的基因片段,构建pET-28a(+)-recN重组质粒并转化E.coli DH5α感受态细胞,提取质粒进行酶切鉴定,将鉴定正确的重组质粒转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达,对融合蛋白进行SDS-PAGE及Western blotting鉴定。结果表明,试验成功克隆了大小约为1 677 bp的recN基因序列,通过诱导表达的His-Tag融合蛋白大小约为66.94 ku,主要以包涵体形式存在。经生物信息学分析,recN蛋白的分子式为C₂₇₃₅H₄₄₂₈N₇₈₆O₈₅₅S₁₆,消光系数为24 785,不稳定系数为43.99,属于不稳定蛋白;理论等电点(pI)为5.62,为酸性蛋白;总平均亲水性为-0.316,与试验表达的包涵体蛋白性质相同,即同为疏水性蛋白;recN蛋白在哺乳动物网织红细胞的半衰期为30 h,在酵母(体内)中的半衰期>20 h,在大肠杆菌(体内)中的半衰期>10 h;二级结构主要以α-螺旋(64.87%)及无规则卷曲(21.00%)为主;经疏水性分析,预测该蛋白有3个高疏水性区域和9个高亲水性区域。本试验结果为进一步探究多杀性巴氏杆菌recN基因的功能提供了参考依据。  相似文献   

羊源类鼻疽伯克霍尔德菌BPSL1467基因克隆、表达及其蛋白生物信息学分析   总被引：1，自引：1，他引：0  

张萌萌  李宝宝  曹瑞勇  黄海峰  张振兴  杨小健  聂鑫  朱姝  王凤阳  杜丽 《中国畜牧兽医》2018,45(9):2401-2408

试验旨在克隆和表达羊源性类鼻疽伯克霍尔德菌（Burkholderia pseudomallei，B.pseudomallea）的BPSL1467基因，并对其表达的蛋白进行生物信息学分析。以羊源类鼻疽伯克霍尔德菌（BPHN1株）基因组为模板，参照GenBank中类鼻疽伯克霍尔德菌K96243标准株BPSL1467基因序列设计引物，PCR扩增获得目的基因片段，将所得片段与pET-28a（+）载体连接，构建pET-28a（+）-BPSL1467重组质粒。将鉴定正确的pET-28a（+）-BPSL1467重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞，通过IPTG诱导表达，SDS-PAGE和Western blotting鉴定表达产物。使用DNAMAN、ProtParam、SOPMA和Protscale相关生物信息学软件对BPSL1467基因编码的氨基酸序列进行分析。结果显示，本试验成功克隆了462 bp的BPSL1467基因，诱导表达重组蛋白大小约为22 ku，主要以包涵体的形式存在。BPSL1467蛋白分子式为C₇₆₃H₁₂₀₉N₂₀₃O₂₁₇S₆，分子质量为16 890.58 u；其不稳定系数为33.95，属于稳定蛋白；理论等电点（pI）为8.85，为碱性蛋白；总平均疏水性（GRAVY）为-0.190，为亲水性蛋白。该蛋白的二级结构中以无规则卷曲和α-螺旋为主。本试验结果为深入研究羊源类鼻疽伯克霍尔德菌的BPSL1467基因的分子作用机理提供了参考依据。  相似文献