RNAi介导的百合抗CMV和LMoV的载体构建     

冯亚言  冯慧颖  徐雷锋  杨盼盼  李雅男  袁素霞  明军 《中国农学通报》2016,32(22):127-132

为获得高效的RNAi(RNA interference)表达载体,培育百合抗病毒新种质,选取感病百合叶片为试验材料,同源序列比对后选取CMV 2b基因271 bp和LMoV cp基因428 bp作为靶基因片段。首先采用RT-PCR方法对感病植株进行病毒检测,确定其带有CMV和LMoV病毒;之后提取感病植株叶片总RNA,反转录得到cDNA,设计带有不同酶切位点的引物,以反转录得到的cDNA为模板,PCR扩增获得目的片段,产物回收纯化后,转化大肠杆菌,重组克隆。将各自的反向片段、正向片段顺次连接到载体pFGC5941上,经多次双酶切、连接、转化后,采用冻融法将构建好的载体转入农杆菌EHA105并进行重组鉴定。酶切结果表明已成功构建了分别抗CMV、LMoV的RNAi植物表达载体pFGC5941-C2和pFGC5941-L2,PCR扩增结果表明表达载体已成功转入农杆菌中。所构建的载体及获得的工程菌与预期的完全一致,获得含载体的农杆菌可以直接应用于百合转基因抗病毒育种工程中。  相似文献   

苯甲酸与二甲酸钾对獭兔生长性能、胃肠内容物pH和养分表观消化率的影响     

上官明军  李燕平  党文庆  詹海杰  曹亮  樊爱芳  任克良 《中国畜牧杂志》2024,(1):314-318

试验旨在研究饲粮中添加不同配比苯甲酸和二甲酸钾对獭兔生长性能、屠宰性能、胃肠道内容物pH和养分表观消化率的影响。选取35日龄健康獭兔200只,按照体重和性别随机分为4组,每组50个重复,每个重复1只。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别在基础日粮中添加1.0%二甲酸钾+0.2%苯甲酸（试验Ⅰ组）、0.8%二甲酸钾+0.3%苯甲酸（试验Ⅱ组）、0.6%二甲酸钾+0.4%苯甲酸（试验Ⅲ组）。预试期5d,正试期56 d。结果表明：试验Ⅰ组和试验Ⅱ组末重、平均日增重均高于对照组（P<0.05、P<0.01）,耗料增重比均低于对照组（P<0.01）;试验Ⅲ组平均日增重高于对照组（P<0.05）,耗料增重比低于对照组（P<0.05）;全净膛重、半净膛重、全净膛率、半净膛率、胃和盲肠内容物pH各组间均差异不显著;试验Ⅰ组粗蛋白质、粗脂肪和中性洗涤纤维的表观消化率均高于对照组（P<0.05、P<0.01）。由此可见,獭兔饲粮中添加二甲酸钾和苯甲酸可以提高獭兔平均日增重、降低耗料增重比,提高獭兔对饲粮中粗蛋白质、粗脂肪以及中性洗涤纤维的表观消化率。本试验条件下,獭兔饲...  相似文献   

柠檬色百合实时荧光定量PCR内参基因筛选     

梁蕤  徐雷锋  毕蒙蒙  王静  唐玉超  郝泽慧  刘一洁  杨盼盼  明军  杜方 《中国农业大学学报》2023,28(2):59-73

为筛选柠檬色百合(Lilium leichtlinii)实时荧光定量PCR稳定的内参基因,以柠檬色百合不同发育时期花被片、根、茎、叶和鳞片为试验材料,测定比较总类胡萝卜素含量;使用RT-PCR和荧光定量PCR检测9个候选内参基因(AP4、Actin、β-TUB、CYP、eIF、GAPDH、RH2、UBC和18S)特异性及表达水平,利用geNorm、NormFinder、Bestkeeper、ΔC_T程序和RefFinder网站综合评估候选内参基因表达稳定性;选用八氢番茄红素酶基因PSY对内参基因稳定性进行验证,最终确定合适且稳定的内参基因。结果表明：1)柠檬色百合花被片发育过程中Actin和AP4为9个候选内参基因中最稳定的内参基因,UBC为最不稳定的内参基因。2)柠檬色百合不同器官间eIF和AP4为候选内参基因中最稳定的内参基因,18S为最不稳定的内参基因。3)在柠檬色百合花被片发育过程和不同器官间,以筛选出最稳定的内参基因为参照计算所得PSY基因表达情况与实际测得总类胡萝卜素含量变化趋势一致;以筛选出最不稳定的内参基因作为参照计算所得PSY基因表达情况与总类胡萝...  相似文献   

‘美人’梅与其近缘种亲缘关系的AFLP研究   总被引：16，自引：1，他引：16  

明军  张启翔  毛庆山  晏小兰 《园艺学报》2002,29(6):588-589

 以美人梅型的4 个品种以及部分近缘种为试材, 运用AFLP 银染法, 采用引物组合E-ACT/M-CAT, E-GA/M-CTC , E-ACT/M-CCA , E-ACT/M-CAC , 扩增得到420 个位点的6 300 条带数据。使用NTSYSpc 2. 1 t 软件, 分别采用DICE , SM和Jaccard 匹配系数, SAHN Clustering 进行不加权成对算术平均法(UPGMA) 聚类分析, 得到了‘美人’梅与近缘种的亲缘关系依次为梅、紫叶李、李、山桃、桃花、山杏和杏的结果, 与形态学、遗传育种学的相关结论相符。  相似文献   

对节白蜡多年生枝干扦插研究   总被引：2，自引：1，他引：2  

明军  廖卉荣 《湖北林业科技》1997,(4):13-16

报道了对节白蜡3～8a生粗大枝干的不同药剂处理对扦插生根的影响。实验表明：该种对生根剂反应敏感，其中NAA200ppm速蘸等处理明显促进扦插生根。扦插苗适用于制作观赏用盆景的桩坯。  相似文献   

醋糟对育肥羊生产性能、屠宰性能及营养物质消化率的影响     

王芳  张变英  上官明军  武霞  樊爱芳  樊君 《黑龙江畜牧兽医》2019,(10)

为了研究醋糟对育肥羊生产性能、屠宰性能及营养物质消化率的影响,试验选择体重20 kg左右、健康状况良好的本地羊×小尾寒羊杂交育肥羊96只,随机分成4组,均饲喂精粗比为1∶1的日粮且精饲料均相同,对照组粗饲料为黄贮玉米秸秆,试验1组、试验2组、试验3组粗饲料分别以10%、20%、30%醋糟替代黄贮玉米秸秆。预试期8 d,正试期96 d。结果表明:在育肥羊日粮中以10%、20%、30%醋糟替代黄贮玉米秸秆对始重、末重、平均日增重无显著影响(P0.05),仅试验1组平均日采食量和料重比极显著升高(P0.01)。以20%、30%醋糟替代黄贮玉米秸秆的试验2组、3组屠宰率均显著提高(P0.05),且试验2组净肉率最高。1～3组干物质表观消化率均显著降低(P0.05);粗纤维表观消化率试验1组、试验2组显著降低(P0.05);粗蛋白表观消化率试验2组有所提高,但差异不显著(P0.05)。总能消化率以20%醋糟替代黄贮玉米秸秆的试验2组效果最好。说明在育肥羊日粮中以20%醋糟替代黄贮玉米秸秆效果最好,可以在生产中进行推广和应用。  相似文献   

基于EST信息的百合SSR标记的建立   总被引：19，自引：6，他引：13  

杨素丽  明军  刘春  穆鼎  李名扬 《园艺学报》2008,35(7):1069-1074

依据已知的百合EST（expressed sequence tags）序列信息,开发新的SSR(simple sequence repeats)标记,在NCBI的EST数据库1 688 EST中检索到98条含有101个SSR的序列, SSR的检出率为5.98%,其中三核苷酸重复类型占主导地位,出现频率为2.84%。EST-SSR的重复基元共搜索到47种,其中三核苷酸重复基元类型最为丰富,大约占重复基元类型总数的一半。利用部分EST-SSRs序列共设计23对SSR引物, 以铁炮百合‘Snow Queen' DNA为模板,对引物进行筛选,其中18对引物有扩增产物,占所设计引物总数的78.26%;进一步用这些引物在5个杂种系列13个百合品种进行多态性测试,显示多态性的引物占可扩增引物的66.7%。本研究结果证明了基于百合EST信息建立SSR标记是一种有效而又可行的方法。  相似文献   

赏食兼用百合京鹤高效组培再生体系的优化     

祁先宇  张文亮  杨盼盼  徐雷锋  明军 《中国蔬菜》2022,(8):57-62

百合是重要的高档蔬菜和观赏花卉,基于鳞片的高效组织培养再生体系是百合种球规模化生产繁育的基础。本试验首次使用草甘膦为诱导分化剂,优化赏食兼用百合品种京鹤鳞片外植体的组培再生体系。结果表明：京鹤鳞片不定芽最佳诱导培养基为MS + 1.0 mg · L^-16-BA + 0.1 mg · L^-1 NAA + 2.5 mg · L^-1草甘膦 + 30 g · L^-1蔗糖,诱导系数为6.46,显著高于常规诱导培养;最佳继代增殖培养基为MS + 0.5 mg · L^-16-BA + 0.1 mg · L^-1 NAA + 30 g · L^-1蔗糖,增殖系数为4.01;最佳鳞茎膨大培养基为MS + 90 g · L^-1蔗糖;最佳生根培养基为1/2MS + 0.3 mg · L^-1 NAA + 30 g · L^-1蔗糖,生根系数为23.59。  相似文献   

百合资源抗棉蚜性鉴定及遗传多样性分析     

周俐宏  石慧  杨迎东  崔玥晗  杨盼盼  徐雷锋  明军 《东北农业大学学报》2021,52(6):24-33

鉴定百合资源抗棉蚜性和分析其遗传多样性,可为百合抗蚜及进一步抗病毒病育种提供重要亲本资源,提高百合抗蚜育种效率.连续3年,利用人工蚜虫接种和蚜量比值法鉴定60份百合资源(11份野生种、49份品种),荧光SSR标记分析遗传多样性.60份百合资源根据蚜量比值法可分为5级,12份资源为高感材料,6份资源为感虫材料,4份资源为中抗材料,7份资源为抗虫材料,31份资源为高抗材料.6对SSR引物共检测出35个主要等位变异,每个位点平均5.8个;多态性信息含量为0.5663～0.8940,平均0.7472;基因多样性指数变化为0.491～0.848,平均0.647;Shannon多样性指数为1.3759～2.5319,平均1.9231.不同抗蚜级别种质间遗传距离变化为0.1309～0.5403,平均0.3306,遗传一致度变化为0.5826～0.8773,平均0.7267.其中,感虫组和高感组资源遗传距离最小(0.1309),遗传一致度最大(0.8773),亲缘关系较近.UPGMA聚类分析结果表明,高抗百合组和中抗百合组资源聚为一类,高感百合组和感虫百合组资源聚为一类.个体间聚类,5组百合资源在多个组群中均出现.通过试验研究,建立百合种质资源抗棉蚜评价体系,明确部分资源抗蚜差异及遗传关系,筛选得到一批抗蚜种质资源,为百合抗蚜及进一步抗病毒病育种提供参考.  相似文献   

醋糟对育肥羊生产性能、屠宰性能及肉质特性的影响     

王芳  上官明军  张变英  武霞  樊爱芳  柳青山 《家畜生态学报》2018,39(6):52-56

为研究醋糟粗饲料对育肥羊的生长性能、屠宰性能及肉质特性的影响,选择96只本地羊×小尾寒羊杂交育肥羊,按体重相近原则平均分成4组,各组喂料为精料50%+粗料50%,精饲料各组均相同,粗饲料不同,对照组、试验1组、试验2组和试验3组的粗饲料占全价料的比例分别为黄贮50%、黄贮40%+醋糟10%、黄贮30%+醋糟20%、黄贮20%+醋糟30%进行饲养试验和屠宰试验。各组育肥羊生产性能,屠宰性能,肉质特性等指标分析结果表明,试验3组效果最佳,为合理广泛使用醋糟提供理论依据。结果表明:(1)不同醋糟添加比例对育肥羊生产性能的影响,四组末重、净增重、平均日增重、料肉比差异均不显著(P0.05);(2)不同醋糟添加比例对育肥羊屠宰性能的影响,试验各组与对照组相比,屠宰率、净肉率、胴体净肉率、骨肉比差异均显著(P0.05),内脂率不显著(P0.05)。(3)不同醋糟添加比例对育肥羊肌肉物理参数与营养成分的影响,试验各组与对照组相比各项指标差异均不显著(P0.05);(4)不同醋糟添加比例对育肥羊肌肉脂肪酸指标的影响,二十碳三烯酸试验1组相比对照组差异显著(P0.05),其余均不显著(P0.05)。  相似文献