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31.
伪狂犬病病毒(PRV)是一种大的DNA病毒,编码蛋白众多,其中一些具有酶功能,涉及病毒复制、蛋白调控和核苷酸代谢等。本研究在实验室已有的PRV感染性克隆pBAC-PRV基础上,利用体外转座的方法将Tn5转座子随机插入伪狂犬病病毒基因组中,获得病毒复制相关功能基因UL9的突变体。将UL9基因突变体转染Vero细胞,获得重组病毒vPRV-Tn5-UL9。通过病毒空斑实验和多步生长曲线测定等方法对vPRV-Tn5-UL9的生物学特性进行研究分析,结果显示突变病毒可在体外传代,但病毒的增殖速度显著降低,这表明UL9基因为PRV复制非必需基因,但对病毒复制增殖存在重要影响。此外,动物试验显示,vPRV-Tn5-UL9失去对小鼠的致死能力。本研究成功利用体外转座技术获得了PRV的UL9突变病毒,为构建重组病毒的方法提供了新思路,同时也为研究PRV复制机制打下一定基础。 相似文献
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【目的】估计里岔黑猪及其与巴克夏杂交猪(巴里猪)达100 kg体重日龄(D100)的校正系数CF和A,并比较两种校正系数的校正效果,为里岔黑猪和其他地方猪种D100的估计提供参考。【方法】以554头里岔黑猪、941头巴里1代和755头巴里2代猪为研究对象,利用润农性能测定系统,收集它们肥育期的体重和日龄数据。根据始测日龄≥60d、始测体重≥25 kg等标准对数据进行质控,质控后的数据用于CF和A的估计。CF是两条直线斜率的比值,其中分子是体重对日龄回归直线的斜率,分母是经过终测点(终测日龄和终测体重)和原点(日龄和体重均为0)直线的斜率。A是体重对日龄一元回归方程的截距,通过拟合体重对日龄的一元回归方程直接得到。校正系数估计出来后,用方差分析来检验性别和群体对校正系数的影响,并把估计的CF和A分别代入各自的校正公式,分别计算D100,即CF和A的校正日龄(D100CF和D100A)。通过t检验,比较D100CF和D100A之间是否存在显著差异,并计算它们之间的相关系数。然后利用每个个体的体重和日龄,分别建立日龄对体重的回归方程,并根据各自的回归方程计算达100 kg体重的回归日龄(D100reg)。通过计算D100CF和D100A与D100reg之间的相关系数及其与D100reg差值的平均数和标准差来比较CF和A的校正效果。最后用另外2个群体的校正系数来校正某个群体,计算D100CF和D100A与该群体D100reg的相关系数来评估校正系数的通用性。【结果】由于性别和群体显著影响校正系数,因此需要分性别和分群体估计校正系数。里岔黑猪、巴里1代和巴里2代阉公猪(母猪)的校正系数CF分别为1.426(1.346)、1.340(1.389)和1.372(1.380),A分别为60.65(54.15)、49.92(57.00)和54.25(57.53)。D100CF和D100A之间差异不显著(P = 0.3071),它们之间的相关系数为0.9998(P<0.0001)。D100CF和D100A与D100reg的相关系数均≥0.9917(P<0.0001),它们与D100reg差值的平均数分别为-0.1385和-0.2741d,标准差分别为2.5532和2.5446d,差异均不显著(P>0.05)。用另外2个群体的校正系数来校正某个群体,D100CF和D100A与该群体D100reg的相关系数均≥0.9793(P<0.0001)。【结论】本研究估计的D100校正系数CF和A与国家生猪产业体系使用的CF和A有较大差异。CF和A的校正效果没有显著差异,在适当的结测体重范围内,它们的校正效果都非常好。在研究的3个群体中,用另外2个群体的校正系数来校正某个群体的校正效果也非常好,说明里岔黑猪D100的校正系数可以为其他地方猪种D100的估计提供参考。 相似文献
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在本实验室已有的PRV JS-2012感染性克隆pBAC-JS2012及突变筛选菌株SW102-PRVBAC基础上,利用galk正筛选和卡那霉素的筛选标记基因,构建IE180两个拷贝启动子均删除的缺失克隆。利用同源重组将galk表达盒替换掉IE180TATA-box及左边297个碱基和右边172个碱基,经PCR鉴定和筛选获得阳性克隆SW102-galk。通过Western blot分析,IE180仍然存在表达。在此基础上再利用相同的方法将Kna筛选标记基因替换掉另一个拷贝IE180TATA-box及其左边134个碱基和右边309个碱基,经过PCR鉴定、Western blot分析以及转染后绿色荧光表达的分析,证实IE180不再表达。本研究成功筛选到IE180启动子缺失的阳性克隆pPRV-DIE180-BAC,为后期IE180缺失互补系统的构建及更深入的探究IE180的生物学功能奠定基础。 相似文献
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克氏针茅群体变异研究初报 总被引:5,自引:0,他引:5
通过形态和蛋白质电泳,对内蒙古8个地区克氏针茅群体的种子形态及其蛋白质进行研究。结果表明,克氏针茅群体间在芒柱长、种子长、种子直径方面存在着一定差异,其中有的差异极显著。群体形态变异与其地理分布,特别是种子直径变化与地理位置有一定关系,即由东向西随着降雨量的减少和热量的增加,种子直径随之增加。不同分布地区克氏针茅群体种子蛋白多态位点比率为14.28%~50.00%,说明克氏针茅群体具有丰富的多态性。聚类分析结果表明8个群体可明显的聚为两类,但与其分布地区的环境条件无相关性,可见地理环境条件对克氏针茅种子蛋白多态性的影响不明显。 相似文献
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杭州市余杭区兴旺疏果有限公司,在当地农业等部门的指导下,大胆创新,按照农业生态原理及“减量化、资源化、无害化、生态化”的畜禽污染治理原则,改革传统的种养结合模式,尝试在大棚内种菜养猪(羊),并以沼气池为纽带,促进种植和养殖的有机结合,实现了经济、生态、社会效益的最优化,走上了“种养沼”良性循环的发展道路,获得了很大的成功。这一生态模式为我省首例。 相似文献