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大肠杆菌菌株ATCC 25922碱性磷酸酶的原核表达、纯化及其活性研究 总被引:1,自引:0,他引:1
使用常规PCR法以大肠杆菌菌株ATCC 25922基因组为模板,克隆到该菌株的碱性磷酸酶成熟肽基因,并将其构建到原核表达载体pET-30a(+)的Bam HⅠ、XhoⅠ之间,获得重组表达载体pET-30a-EAP。并且我们将pET-30a-EAP转化到大肠杆菌RosettaTM(DE3)pLysS中,经IPTG诱导表达后,获得大小为52ku的目的蛋白EAP。经试验证明该蛋白以可溶形式为主。进而,高效表达的重组碱性磷酸酶经亲和层析法纯化后被用于活性鉴定。pNPP的显色反应与去磷酸化试验证实来自ATCC 25922的重组碱性磷酸酶具有催化磷酸单酯水解活性,而且酶热稳定性高、有效工作温度范围大,与其他蛋白融合表达时仍保持酶活性。以上研究结果为大肠杆菌菌株ATCC 25922碱性磷酸酶的规模化生产及在免疫酶技术领域中的应用提供了重要的参考依据。 相似文献
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高效氯氰菊酯ME对苹果桃小食心虫防治效果研究 总被引:3,自引:0,他引:3
4.5%高效氯氰菊酯ME对桃小食心虫幼虫的毒力测定结果显示,其LD50为1.068μg/g,95%置信限区间为0.6178~1.9591μg/g,表明该药剂对桃小食心虫幼虫有较强的毒杀作用。田间应用及安全性评价结果表明,苹果树桃小食心虫,在稀释1000~2000倍液的范围内,药后5d防效为91.7%~100.0%,药后35d防效仍达89.8%~99.1%,略好于对照药剂4.5%高效氯氰菊酯EC,且速效性好,持效性显著。同时,微乳剂是一种安全、环保的水基化剂型。因此,4.5%高效氯氰菊酯ME可以作为防治桃小食心虫的有效药剂,替代乳油剂型药剂进行推广使用,最佳用药量以1000~1500倍液为宜。 相似文献
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蛋鸡龙骨骨折在各饲养系统中发生率普遍较高,影响蛋鸡行为反应和福利水平。为研究产蛋后期龙骨骨折蛋鸡与未骨折蛋鸡竞争行为中是否处于劣势,采用触诊和X光仪判定体重相近的单只饲养于传统笼65周龄林甸鸡的龙骨状况,将蛋鸡分为龙骨正常组(NK)和龙骨骨折组(FK),开展配对争斗试验。而后在每个富集试验笼中将三只骨折蛋鸡和三只正常蛋鸡重新组群,研究骨折蛋鸡和正常蛋鸡社会竞争等级指数(CBI),再经食物竞争试验后剖杀部分骨折和正常蛋鸡,检测血液和龙骨组织炎症细胞因子表达。配对争斗试验结果表明,骨折蛋鸡得分显著低于正常蛋鸡(P<0.05)。重组群蛋鸡社会竞争试验结果表明,骨折林甸鸡CBI显著低于正常蛋鸡(P<0.05)。但采食竞争试验中骨折与正常林甸鸡采食时间差异不显著(P>0.05)。骨折蛋鸡龙骨组织炎症细胞因子mRNA相对表达水平和血清炎症因子浓度均高于正常蛋鸡(P<0.05)。试验表明龙骨骨折降低蛋鸡争斗能力,使其在社会竞争中处于不利地位,龙骨骨折引发的慢性炎症状态可能是骨折蛋鸡社会竞争行为表达下降的原因。 相似文献
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为明确喷雾助剂在苹果园化学防治中的作用,采用表面张力、接触角和最大稳定持留量等分析了GY-T12、NF-100和迈润等3种喷雾助剂在达到临界胶束浓度 (CMC) 时对22%氟啶虫胺腈悬浮剂药液的表面张力及其在苹果叶片表面润湿性能和持留量的影响。结果显示:当添加的3种喷雾助剂达到其CMC时,氟啶虫胺腈药液表面张力降低至27.64~35.64 mN/m;根据水滴在苹果叶片表面的接触角小于或大于90°判定苹果叶片近轴面为亲水性表面、远轴面为疏水性表面,添加助剂使药液在近轴面和远轴面30 s的静态接触角分别降低23.2°~41.3°和68.0°~93.5°,同时使亲水性近轴面黏附功降低5.36~12.56 mJ/m2,而黏附张力增大9.27~11.26 mN/m,在疏水性远轴面黏附功与黏附张力分别增大27.45~36.66 mJ/m2和47.55~53.28 mN/m,对改善远轴面的黏附润湿性更显著;药液表面张力和最大稳定持留量存在抛物线状函数关系,当表面张力为40.89 mN/m时,持留量达最大值12.53 mg/cm2;3种助剂中,NF-100和GY- T12可显著增加药液持留量,且GY-T12对靶标害虫苹果黄蚜有显著增效作用。本研究结果表明,在苹果园应用时应依据预期目标选择适当的喷雾助剂,并通过调节药液表面张力使其处于适宜范围以增加药液持留量、提高对靶标害虫的毒力。 相似文献