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为研发一种更安全、有效的结核病疫苗,用于预防并清除结核病,本试验构建4株分别表达Ag85A、Ag85B、Ag85C、Ag85D基因的重组卡介苗,参考pMV261载体序列和Tuberculist上登录的H37Rv序列设计引物,通过PCR扩增和无缝克隆技术构建含Ag85基因片段的重组pMV261质粒。分别对重组质粒进行PCR、双酶切鉴定后,通过电击转化转染到卡介苗感受态细胞中,利用Kan耐药基因筛选获得重组卡介苗菌株。采用PCR及Western blotting鉴定Ag85A、Ag85B、Ag85C、Ag85D基因在卡介苗中的表达,再对构建成功的重组卡介苗进行培养,用于后续试验。PCR扩增结果表明,构建的重组卡介苗rBCG/Ag85A、rBCG/Ag85B、rBCG/Ag85C和rBCG/Ag85D目的基因片段大小分别为1 447、1 402、1 453和1 330 bp,与预期大小一致,表明目的基因已成功整合到卡介苗中;Western blotting结果表明,Ag85A、Ag85B、Ag85C、Ag85D基因均可在卡介苗细胞内成功表达。本试验利用基因工程技术成功获得4株分别表达Ag85A、Ag85B、Ag85C、Ag85D基因的重组卡介苗,将其分别命名为rBCG/Ag85A、rBCG/Ag85B、rBCG/Ag85C、rBCG/Ag85D。本研究可为进一步将其他抗原基因插入卡介苗细胞构建重组疫苗及疫苗研究提供材料。 相似文献
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为培育西瓜壮苗,减少水肥资源浪费,开展了在嫁接成活期控制不同基质含水量(95%~100%、70%~75%)和育苗期使用不同水溶肥包括磷酸二氢钾和氮磷钾平衡肥(15-15-15+T E)的水肥精量控制试验,比较分析了嫁接苗的成活情况、生长指标和壮苗指数。结果表明:冬春季在玻璃温室内培育西瓜嫁接苗,嫁接后7 d内以基质最大含水量保持在95%~100%,施用磷酸二氢钾肥水溶肥1000倍液4次(在砧木现1片真叶时、嫁接苗接穗现1片真叶时、接穗1叶1心时和接穗2叶1心时分别灌根1次)为宜,可提高嫁接成活率(95%),降低病苗率(5%),且壮苗指数(165.59)显著高于其他3个处理,有利于培育西瓜壮苗。 相似文献
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为给金银花优良品种的选育提供参考,使用解剖镜、电子显微镜、扫描电镜对‘济草堂1号’和‘九丰1号’2个金银花品种的花粉、花瓣、雌蕊、雄蕊等进行了观察和比较;通过花粉离体萌发试验测定2个不同金银花品种花粉活力,通过纤维素酶法测定2个金银花品种的花粉量。结果表明:2个金银花品种解剖结构均具明显的忍冬科植物花部特性;气孔、腺毛长度、花粉大小差异明显;‘济草堂1号’花粉量大于‘九丰1号’;花粉均在蔗糖质量分数20%、硼酸质量浓度0.03 g/L时萌发率达到最高,‘九丰1号’萌发率59.34%,‘济草堂1号’萌发率49.02%。 相似文献
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阎庆九黄雯徐明喜魏猷刚甘小虎李昀晔胡静杨会玲姬彦雪 《上海蔬菜》2022,(6):70-72
为探明不同光质组合对西瓜幼苗生长发育的影响,作者以可调光质LED作唯一光源,调节出符合试验要求的红蓝组合光、红蓝绿组合光、红蓝黄组合光,开展不同光质的组合光对西瓜幼苗生长发育的影响试验。试验结果表明,在相同的光量子通量值下,红蓝组合光处理西瓜幼苗的叶片较大、叶色较深、根系健壮,壮苗指数显著高于其他处理。可见,红蓝组合光更有利于西瓜幼苗的生长发育。 相似文献
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为了抑制西瓜顶插接砧木侧芽萌蘖,减少苗期手工抹除砧木侧芽的工作量,使用天然油脂(菜籽油、大豆油、花生油)与凡士林在嫁接前及嫁接苗成活后分别处理长颈葫芦砧木顶芽生长点,研究天然油脂与凡士林对砧木生长点抑制的效果。结果表明,使用天然油脂和凡士林处理显著降低了接穗成活率及接穗株高,但也显著降低了砧木侧芽萌发率及平均侧芽叶面积,嫁接14 d后,使用凡士林两批次处理的侧芽萌发率均为对照的39%,侧芽叶面积分别为对照的34.3%和19.6%。所以,可使用天然油脂或凡士林来抑制砧木侧芽生长,以减少大批量顶插接育苗工作时手工抹除砧木侧芽的用工量。 相似文献
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[目的]了解黑老虎种群结构及动态.[方法]采用典型样地法,以径级结构代替年龄结构及方差均值比率法研究湖南省莽山、舜皇山及黄桑国家自然保护区3个黑老虎种群的年龄结构、高度结构和空间分布格局,编制特定时间生命表,绘制存活曲线.[结果]黑老虎3个种群的年龄结构分为5级,呈倒金字塔形,年龄结构无Ⅰ级幼苗,幼藤储备很少,中成年藤和老年藤的比例占60%~80%,属衰退型种群;高度结构受支柱木和林冠层高度影响,不同种群高度结构包括的级数不同,但发育都是连续的;3个种群分布格局不同,莽山种群呈集群分布,舜皇山和黄桑种群呈随机分布;生长可分为幼藤、中成年藤和老藤3个时期,存活曲线呈凸形,处于衰退状态.[结论]极弱更新能力和较少种群数量预示黑老虎种群的生存和繁育都面临极大挑战,具有濒危植物的特征,应加强保护和人工引种驯化. 相似文献
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