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研究EGF mRNA在猪输卵管、子宫中的表达。采用RT—PCR技术检测猪卵泡期、排卵期和孕期的输卵管伞部、壶腹部、峡部和子宫中EGF的mRNA的表达。结果表明:各期卵管伞部、壶腹部、峡部和子宫中EGF的mRNA都强烈表达,但看不出明显的强弱变化,进步证实EGF在猪雌性生殖程中起着重要的作用。 相似文献
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为培育转基因肉牛提供种子细胞以及进一步丰富牛骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)的多向分化潜能,利用细胞免疫荧光染色和分子生物学方法,初步探讨表皮生长因子和胰岛素体外诱导牛BMSC向上皮样细胞分化的可能性。利用含细胞因子的诱导液对纯化稳定的P4代牛BMSC进行体外诱导,并对诱导后的细胞进行细胞角蛋白18的细胞免疫荧光观察和细胞角蛋白19的RT-PCR鉴定。结果表明,诱导后细胞经细胞角蛋白18免疫荧光染色后出现明显的荧光。RT-PCR结果显示诱导分化后细胞角蛋白19基因在细胞中表达。因此,在体外,表皮生长因子和胰岛素可诱导牛BMSC初步分化为上皮样细胞。 相似文献
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不同水平表皮生长因子对早期断奶仔猪生产性能、血清理化指标及免疫功能的影响 总被引:4,自引:0,他引:4
为探讨表皮生长因子E(GF)对早期断奶仔猪生产性能、血清理化指标及免疫功能的影响,选取21日龄断奶仔猪25头,初重(5.83±0.60)kg,公母比例3:2,随机等分为5组,分别注射不同水平EGF,对照组为生理盐水,试验期14天。结果表明:仔猪生产性能、血清理化指标及IgG含量与每天所用剂量在1.0~9.0μgk/gB W范围之内随剂量增加日趋改善,最佳水平为每天6.0μg k/gB W。与对照组相比,日增重提高65.42%P(<0.05),料肉比减少48.15%P(<0.01),血清TP、ALB、GLO和IgG水平分别增加35.57%P(<0.01)、34.41%P(<0.01)、25.31%P(<0.05)和22.22%P(<0.1);同时血清CK与LDH含量分别降低34.45%P(<0.05)和48.41%P(<0.1);EGF作用具有后续性,效果主要体现在断奶后第2周。 相似文献
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表皮生长因子对水牛卵母细胞体外培养核质成熟的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
为了探讨表皮生长因子(EGF)对水牛卵泡卵母细胞体外培养核质成熟的影响,在以TCM199为基础的成熟液中加入不同浓度的EGF(0、10、25、50、100 ng/ml),体外成熟培养24~26 h,观察第一极体(PB1)的排放;随后进行孤雌激活检测其分裂率、囊胚发育率、囊胚孵化率,并用Hoechst33342染色后计算囊胚的细胞数。结果发现添加EGF各组的卵母细胞第一极体排放率显著提高(P<0.05);成熟液中添加25 ng/ml EGF时,卵裂率及囊胚发育率(分别为80.0%、44.8%)明显高于对照组(分别为69.3%、31.9%,P<0.05),但对囊胚的细胞数影响不大。EGF不仅促进水牛卵母细胞体外培养的核成熟,而且有利于卵母细胞的胞质成熟,其中EGF的最佳浓度为25 ng/ml。 相似文献
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为了通过比较培养筛选出能改进和提高山羊卵母细胞体外成熟效率的培养体系 ,培养的山羊卵母细胞以 TCM-199为基础培养液 ,添加 :(1) 10 %血清 (胎牛血清 (FBS)或发情山羊血清 (EGS) ) 2 0 m g/ L促黄体素 (L H) 10 mg/ L促卵泡素 (FSH) 1m g/ L 雌二醇 (E2 ) ;(2 ) 10 % EGS 促性腺素 (L H∶ FSH=5 mg/ L∶ 0 .5 m g/ L 或 2 0 mg/ L∶ 10mg/ L )或者 0 .0 75 IU / m L人绝经期促性腺素 (HMG) 1mg/ L estradiol 17β;(3) 10 % EGS 0 .0 75 mg/ L HMG 10~ 2 0 μg/ L EGF。此外 ,以 M199 10 % EGS 0 .0 75 mg/ L HMG 10~ 2 0 μg/ L EGF为培养基 ,溶解于自制超纯水或储存的商品化超纯水来培养卵母细胞。培养条件为 38℃ ,5 % CO2 。培养 2 4 h后 ,在体式显微镜下统计处于 M 期的卵母细胞比例。结果显示 :在卵母细胞成熟液中添加 10 % EGS比 10 % FBS的成熟培养效果好 ;添加 HMG能够促进卵母细胞的成熟 ,其效果比添加不同比例的 L H/ FSH好 ;成熟液中添加 10~ 2 0μg/ L EGF能促进卵母细胞的成熟 ,但成熟率没有明显提高 ;新鲜的超纯水对于卵母细胞的培养是必要的。结论 :新鲜超纯水配制的 M199 10 % EGS 0 .0 75 IU / m L HMG 10~ 2 0μg/ L EGF培养液可以获得最佳卵母细胞培养效果 相似文献
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EGF对牛卵母细胞体外成熟及胚胎发育的影响 总被引:5,自引:0,他引:5
在卵母细胞体外成熟液(含FSH)中分别添加10,30,50ng/ml表皮生长因子(EGF),24h检查成熟率,并进行孤雌激活。结果表明:添加10ng/ml、30ng/ml EGF组牛卵母细胞成熟率较对照组(未添加EGF)无显著差异(79.8% vs 71.5% vs 70.4%,p>0.05),但EGF添加至50ng/ml时牛卵母细胞第一极体排出率显著提高,达85.4%(P<0.01);在实验1的基础上,比较培养液中添加10ng/ml、30ng/ml 、50ng/ml EGF对牛孤雌激活胚胎体外发育的影响,结果发现在培养液中添加EGF并不能显著提高牛卵母细胞体外孤雌发育囊胚率(P>0.05),但可显著提高其囊胚孵化率(P<0.01)。 相似文献
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以皮层颗粒(CG)单层分布于质膜下做为卵母细胞胞质成熟的标志,利用CG荧光染色法,研究了不同浓度表皮生长因子(EGF)和胰岛素样生长因子(IGF-1)及其组合对水牛卵母细胞胞质成熟的影响。结果发现:(1)添加不同浓度的EGF(10、20、30、50ng/mL)都可以提高胞质的成熟率,但是组间差异不显著(P〉0.05);皮质颗粒的分布随着EGF浓度的升高逐步由中间分布向皮层分布转变;(2)在成熟液中添加IGF-130ng/mL时效果较好,能显著提高卵母细胞胞质的成熟率;皮质颗粒的分布随着IGF-1浓度的升高逐步由中间分布向皮层分布转变,在添加IGF一130ng/mL时,在皮层分布最好,随着IGF-1量的进一步增加,皮质颗粒又向中间分布转变;(3)添加20ng/mL EGF+30ng/mL IGF-1组卵母细胞体外成熟率高于添加30ng/mL的IGF-1组,显著高于添加20ng/m LEGF组和对照组(P〈0.05)。由此表明,EGF和IGF-1对水牛卵母细胞体外成熟有协同作用。 相似文献
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Nattapong NINPETCH Dagvajamts BADRAKH HAY MAR KYAW Kohei KAWANO Yojiro YANAGAWA Masashi NAGANO Seiji KATAGIRI 《The Journal of reproduction and development》2022,68(3):209
Factors associated with high milk production levels have been linked to alterations in the endometrial epidermal growth factor (EGF) profile, a cause of reduced fertility in dairy cows. Therefore, we examined the leptin system that connects nutritional status and reproduction in dairy cattle related to reduced fertility in repeat breeder cows. Plasma leptin concentrations were measured in 18 heifers, 20 high-yielding control cows, and 26 repeat breeder cows, showing an altered EGF profile. Then, all repeat breeder cows were infused with seminal plasma (SP) into the vagina at the next estrus to normalize the EGF profile, while heifers and control cows were infused with vehicle alone. All animals were examined for EGF profiles. Eighteen repeat breeder cows, nine heifers, and nine control cows were also determined for leptin receptor (Ob-R) expression levels in the estrous cycle before and after the infusion. SP normalized the EGF profile in 53.8% of the repeat breeder cows. Leptin concentrations were similar in all groups, regardless of the treatment results for the EGF profile. In contrast, Ob-R levels in repeat breeder and control cows were similar and higher than those in heifers before SP treatment. Ob-R in repeat breeders showing a normal EGF profile after treatment decreased to an intermediate level between heifers and control cows and may provide a clue to take measures against repeat breeding in dairy cows. 相似文献
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【目的】探究表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)和成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factor 2,FGF-2)对猪皮下脂肪神经嵴干细胞(neural crest stem cells,NCSCs)增殖及分化的影响,以优化猪皮下脂肪神经嵴干细胞的培养条件。【方法】通过体外分离培养原代猪皮下脂肪NCSCs,免疫荧光染色鉴定NCSCs标志物p75 NTR,并用不同浓度的EGF和FGF-2(0和0、10和10、10和20、20和10、20和20、30和30 ng/mL)作用于传代猪皮下脂肪NCSCs,用CCK-8试剂盒测定细胞增殖率,确定细胞生长的最适EGF和FGF-2浓度,将试验分为空白组和最适浓度组,测定两组细胞的生长曲线,成脂化诱导后油红O染色,对比两组细胞的脂滴生成量。【结果】免疫荧光染色结果显示,原代猪皮下脂肪NCSCs经p75 NTR鉴定呈阳性。CCK-8细胞增殖试验结果显示,EGF和FGF-2的浓度均为20 ng/mL时对传代猪皮下脂肪NCSCs的促增殖作用最佳。生长曲线显示,两组细胞均在第5~9天处于对数生长期,第10~15天细胞增殖减缓,逐渐到达停滞期。油红O染色结果显示,最适浓度组胞质内的脂滴生成量远多于对照组。【结论】在培养液中添加20 ng/mL EGF和20 ng/mL FGF-2对猪皮下脂肪NCSCs的增殖和分化有促进作用。 相似文献