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表达HAV结构基因的重组腺病毒鉴定及细胞病变分析 总被引：1，自引：0，他引：1
利用RT-PCR方法,从HAV-L8株的RNA中扩增出结构基因(vp3 vp1),克隆到穿梭质粒pXCX2NotI上。采用磷酸钙-DNA共沉淀技术,将腺病毒载体pJM17与pXCX2-CMV-HAV共转染293细胞。在光学显微镜下观察到明显的细胞病变(CPE);经RT-PCR、免疫荧光染色和蛋白印迹鉴定证明HAV的结构基因已插入到腺病毒基因组中;在电子显微镜下观察发现有二十面体的病毒颗粒。以上结果表明获得了重组腺病毒rAdHAV,纯化后的rAdHAV滴度为1×109.0TCID50/mL。 相似文献
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猪肺炎支原体黏附因子基因R1R2区的克隆及表达 总被引：4，自引：0，他引：4
根据GenBank登录的猪肺炎支原体232株P97基因和J株黏附因子基因设计了1对引物，以我国猪肺炎支原体Z株(强毒株)基因组DNA为模板，通过PCR方法扩增了该株黏附因子基因的部分序列。经序列分析后，重新设计了1对带有EcoRI和HindⅢ酶切位点的引物，并经引物的定点突变，PCR扩增了Z株黏附因子的R1R2区。扩增产物经双酶切后克隆到表达载体pET-32(a) 中。该重组质粒经酶切鉴定后，将其具有正确阅读框架的重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞，37℃下经IPTG诱导表达，得到相对分子质量约29000的融合蛋白，表达量约为11％。 相似文献
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本文研究了木捆排在无限水域中的运行水阻力问题,提出了排型参数(L/B)和(B/T)对木捆排运行水阻影响程度的试验数据和图表,探讨了降低木捆排运行水阻力的途径及措施。 相似文献
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用全薯块吸头刺伤接种法测定时,较理想的测定条件为:每接种点接种0.1ml浓度为10~2～10~5CFU/ml菌悬液,随后在21±5℃～31±5℃(依所用菌株而定)下保持2～3天,以接种点腐烂斑的最大直径作记载标准。用新鲜薯片法测定时,除接种浓度为10~2～10~3CFU/ml,保持时间为1～2天及以侵染限值作评价标准外,其余条件和全薯块吸头刺伤接种法相同。当用皮孔浸渍法接种时,薯块在10_6CFU/ml菌悬液中浸5分钟,然后使薯块表面保持连续水膜,3～5天后测量薯块表面腐烂面积。上述3种方法都必须有20个以上重复,并使用大小一致、无伤无病的成熟薯块。 相似文献
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研究了叶面喷施抗蒸剂对盆栽苹果水分状态的影响。结果表明：抗旱剂一号（主要成分为黄腐酸）可明显降低树体蒸腾（最低时为对照的３９．２１％）、提高气孔阻力（最大时为对照的２４３．９６％）和叶片水势（一般比对照提高０．２－０．４ＭＰａ、最大０．７ＭＰａ），并对叶温未产生明显的影响（变化一般小于１℃），有效作用期长达１５ｄ以上。在果树旱期喷施，可明显改善树体水分状态。腐殖酸效果不明显。 相似文献