HRP直接标记属特异性基因探针检测沙门氏菌的研究   总被引：2，自引：2，他引：0  

卢强  林万明 《中国兽医学报》1994,14(1):48-53

以活化辣根过氧化物酶复合物（ＨＲＰ—ＰＢＱ—ＰＥＩ＋—ＮＨ３＋）直接标记沙门氏菌属特异性ＤＮＡ探针ｐＬＳ２和ｐＬＳ３，探针与靶ＤＮＡ杂交后催化发光底物，经增强型化学发光反应（ＥＣＬ），用普通Ｘ光胶片自显影（ＣＰＤ）检测沙门氏菌。经狭缝杂交（Ｓｌｏｔｂｌｏｔ），该法标记探针均可检测到０．１ｐｇ的纯质粒ＤＮＡ及１０３个未经培养的鼠伤寒沙门氏菌。Ｄｏｔ—ｂｌｏｔ杂交结果证明，ＨＲＰ标记的探针仅与沙门氏菌属细菌杂交，而与试验的其他肠道非沙门氏菌不杂交。本研究表明，ＨＲＰ直接标记基因探针化学发光自显影法检测沙门氏菌，安全、快速、简便，且有高度的敏感性和特异性，是一种有较大应用前景的非放射性标记探针杂交检测方法。  相似文献   

鲁米诺-高碘酸钠-没食子酸丙酯化学发光体系的研究     

李丽  苏以申  陈艳红 《湖北农业科学》2013,52(6)

根据碱性介质中没食子酸丙酯对鲁米诺-高碘酸钠具有较强的增敏作用,建立了化学发光测定没食子酸丙酯的分析方法.结果表明,没食子酸丙酯在8.0× 10-7～1.0× 104 g/L范围内与化学发光强度存在线性关系(R2=0.998 2),对1.0×10-5 g/L没食子酸丙酯溶液测定11次,检出限达到6.4×10-7g/L,RSD为1.61％.该方法可用于食用调和油中没食子酸丙酯的快速测定.  相似文献   

皱纹盘鲍血细胞活性氧产生的研究↑（*）   总被引：3，自引：0，他引：3  

张峰  李光友  张培军 《中国水产科学》1999,6(3):36-40

在体外条件下用不同刺激物(海洋酵母细胞和酵母聚糖)对皱纹盘鲍血细胞进行刺激,测定血细胞吞噬活动中经历呼吸爆发产生活性氧的化学发光反应。结果表明,皱纹盘鲍血细胞经刺激诱导吞噬活动中有明显的呼吸爆发现象和很强的活性氧产生。不同的刺激物产生的化学发光强度不同;同一种刺激物的不同处理和不同浓度对血细胞产生活性氧的化学发完强度的影响不同。刺激物经皱纹盘鲍自体血清调理和未经调理对血细胞刺激所产生的化学发光强度不同。SOD和NaN3对血细胞吞噬过程中活性氧产生的化学发光有抑制作用。皱纹盘鲍血细胞在吞噬防御反应中能够通过产生活性氧对外源病原进行杀灭。  相似文献   

天然抗氧化剂清除氧自由基的能力   总被引：13，自引：4，他引：9  

田云  卢向阳  易克  何小解  方俊 《湖南农业大学学报(自然科学版)》2004,30(3):209-211

为了探明天然抗氧化剂清除氧自由基的专一性及其作用机理,采用生物化学发光研究了V-C儿茶素和某草提取物3种天然抗氧化剂清除氧自由基的能力,结果表明：不同抗氧化剂对各种氧自由基均有不同程度的清除作用V-C儿茶素和某草提取物清除O2的能力IC25分别为2.04,6016,42.13μg/ml;清除OH的能力IC50分别为131.07,0.59,5.59 μg/ml清除H2O2的能力分别为1.36,0.69,24.02μg/ml因此,不同抗氧化剂对氧自由基的清除作用具有特异性。  相似文献   

儿茶素及其组合物清除自由基能力的研究   总被引：9，自引：0，他引：9  

罗一帆  郭振飞  许旋  陈剑经 《林产化学与工业》2005,25(4):26-30

应用化学发光方法研究了4种儿茶素及其组合物对超氧阴离子自由基（O^＊2^-）和羟自由基（OH^＊）的清除能力,并对其之间的清除能力进行了比较。结果表明：EGCG、ECG、EGC和EC的O^＊2^-清除率为50％时的浓度SC50分别为4．2、4．9、5．2和6．2μmol／L,而OH^＊清除率为50％时的浓度SC50则分别为0．22、0．25、0．26和0．30μmol／L。4种儿茶素的浓度相同时,其O^＊2^-和OH^＊清除率的大小顺序为：EGCG〉ECG〉EGC〉Ec。并应用正交试验设计方法来优化4种儿茶素的组合,结果表明：清除O^＊2^-和OH^＊的最佳组合是EGCG：ECG：EGC：EC为3：3：1：1。EGCG对自由基清除率影响是最大和最显著的。在4种儿茶素的组合中,当EGCG所占的比例较大时,其组合物的自由基清除率比单体的自由基清除率要大。文中最后还模拟了不同茶叶中4种儿茶素所占的比例不同时,其清除自由基的能力的大小。本研究为利用儿茶素的不同配伍寻找一种更能发挥其药用功效的复合物提供了一条新的途经。  相似文献   

用化学发光免疫法检测有机氯农药DDTs的残留量   总被引：1，自引：0，他引：1  

张峰  倪慧  张斯 《大连水产学院学报》2011,26(1):30-34

建立了检测有机氯农药DDTs残留的化学发光免疫分析技术（chemiluminescence immunoassay,CLIA）,以鲁米诺和过氧化氢作为化学发光底物,测定样品中有机氯农药DDTs残留。结果表明：发光底物液非催化下,5～7 min后发光值较稳定;在发光底物液酶催化下,反应10 min接近峰值;DDTs标准曲线线性范围为0.05～25 ng/mL,标准样品DDTs浓度与发光值呈现很好的线性相关,线性方程为y=-63.806x＋13426,R2=0.9945,检测最低限为0.05 ng/mL;回收率为91.4%～107.8%。  相似文献   

化学发光法测定烟叶中的总氮   总被引：1，自引：0，他引：1  

徐宸孙家利  张凤侠王卫武祖朝龙  时向东 《中国农学通报》2010,26(17):121-124

建立测定烟叶中总氮含量的新方法。烟叶中的含氮化合物经消化后,加碱蒸馏,用硫酸吸收,全部转化为氨态氮,根据NH4+在碱性溶液中能还原ClO ,该反应和化学发光反应ClO?-－Luminol相耦合,降低化学发光强度,从而达到测定NH4+的目的。本方法的检测下限达到10-3mg/kg,线性范围选择0.01～1.5（mg/kg）,加标回收率在87.3%～109.9%之间,RSD＜5%(n=5),完全能满足烟叶中总氮测定的要求。  相似文献   

猪瘟病毒化学发光抗体检测方法的建立与应用     

麻园  石正旺  罗俊聪  杨波  王丽娟  万颖  宋锐  曹丽艳  周改静  田宏  郑海学  陈轶霞 《畜牧兽医学报》2021,52(6):1744-1752

旨在建立猪瘟病毒（CSFV）化学发光抗体检测方法,本研究以CSFV E2蛋白作为包被抗原,山羊抗猪IgG-HRP抗体作为酶标抗体,鲁米诺为底物溶液,优化检测方法,成功建立CSFV化学发光抗体检测方法。该方法能在室温20 min内完成对CSFV抗体血清特异性检测,灵敏度与商品化CSFV抗体检测试剂盒相当,且与A型口蹄疫病毒、O型口蹄疫病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、塞内卡病毒、非洲猪瘟病毒抗体阳性血清均无交叉反应;批内变异系数为1.80%~6.88%,批间变异系数为1.11%~9.18%,重复性好。通过对152份田间猪血清样品的检测并与商品化CSFV抗体检测试剂盒检测结果进行比较,其Kappa值为0.929,具有高度的一致性。综上表明,本研究建立的CSFV化学发光抗体检测方法特异性强、灵敏性高、重复性好、简单快速,可应用于临床血清CSFV抗体的检测。  相似文献   

Neutrophil adherence,phagocytic-nitroblue tetrazolium reduction and chemiluminescence in canine whole blood     

H. Nagahata  T. Sako  J. A. Reiter  S. P. Dibartola  C. G. Couto  G. J. Kociba 《Veterinary research communications》1991,15(3):181-188

Methods for measuring neutrophil adherence, phagocytic-nitroblue tetrazolium (NBT) reducing activity and chemiluminescence were applied to canine whole blood as means for routine assessment of neutrophil functions. The phagocytic-NBT reduction test appeared to be useful for monitoring the NBT reducing activity of phagocytic cells associated with phagocytic functions. Ethylene diamine tetraacetic acid suppressed both the adherence and the phagocytic-NBT reducing activity of neutrophils. Increased phagocytic-NBT reduction and an enhanced chemiluminescence response were observed in dogs with neutrophilia. These methods provide a rapid and practical screening procedure for measuring selected phagocytic functions in canine whole blood.  相似文献   

化学发光直接竞争免疫分析法检测猪尿中莱克多巴胺残留     

高彬文  张素霞  梁永红  刑保松 《中国畜牧兽医》2009,36(12):200-203

本试验研究建立了猪尿中莱克多巴胺（Ractopamine, RAC）残留的直接竞争化学发光免疫检测方法。合成了莱克多巴胺和辣根过氧化物酶的偶联物（RAC-HRP）,方法的检测限为0.09 ng/mL,空白猪尿中添加浓度为0.5、10和100 ng/mL RAC时,检测范围为0.3～157.0 ng/mL;回收率为76.3%～87.6%,批内变异系数为10.0%～12.2%,批间变异系数为14.2%～15.2%。  相似文献