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42.
梨火疫细菌实时荧光PCR和诱捕PCR-ELISA检测方法的建立 总被引：8，自引：1，他引：8
根据梨火疫细菌中独特而保守存在的质粒pEA29，设计了1对引物和3条探针，建立了实时荧光PCR检测方法和诱捕PCR-ELISA检测方法。实时荧光PCR采用带荧光标记的核酸杂交探针，边扩增边检测，步骤简单，不需PCR后处理，可避免假阳性和交叉污染；诱捕PCR-ELISA检测方法只需简单处理的样品就能检测，减少了核酸不纯出现的漏检，由于增加了核酸杂交探针，可不需凝胶电泳EB染色检测，不会出现假阳性问题。 相似文献
43.
本试验分别剪取处于休眠和萌动两种状态的一年生和二年生北沙柳枝条，用＾６０Ｃｏγ射线照射，照射后分别在室内和室外接随机区组配置，室内水培、室外扦插繁殖，定期对花芽的发育，插条的成活率、田间成株率及萌芽生长进行观测和分析，研究γ射线对北沙柳的辐射效应。 相似文献
44.
饲料中谷氨酰胺及丙氨酰谷氨酰胺的测定 总被引：3，自引：0，他引：3
高效液相色谱荧光检测法测定饲料中的谷氨酰胺和丙氨酰谷氨酰胺 ,采用Spherisorb ,C1 8色谱柱 ,OPA衍生 ,荧光检测器检测。实验证实 ,这是一种快速、简单、准确、灵敏度和精密度较好的测定方法 ,可用于饲料中游离谷氨酰胺和丙氨酰谷氨酰胺二肽的分析。 相似文献
45.
农杆菌介导的蝴蝶兰基因转化系统的建立 总被引：9，自引：1，他引：9
针刺后的蝴蝶兰‘White Hikaru’的类原球茎(PLB)，与含绿色荧光蛋白基因( )和潮霉素磷酸转移酶基因(^p￡)的pCAMBIA 1300一SmGFP的根瘤农杆菌LBA4404 共培养，培育出了转基因的蝴蝶兰。经绿色荧光蛋白检测和Southern印迹，证实了再生植株中含cop基因和hpt基因。 相似文献
46.
芽孢杆菌绿色荧光蛋白标记及其在小麦体表定殖的初探 总被引：17，自引：0，他引：17
将来自质粒pAD4412的启动子和绿色荧光蛋白基因gfpmut3a插入大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭载体pBE2,构建成芽孢杆菌表达载体pGF P4412,用其转化野生型生防芽孢杆菌83-6和A-47等8个菌株,均得到良好的发光表型。质粒稳定性实验表明重组质粒pG FP4412稳定性为92%。借助荧光显微镜对gfp标记的菌株A-47-gfp在小麦体表的定殖进行初步的研究。结果表明:A-47-gfp能够在小麦根际及小麦体表定殖(包括根表和茎叶表面);相对于在茎叶表面定殖的A-47-gf p在根表定殖的菌体与根的结合更为牢固;从根基到根尖A-47-gfp的定殖量有明显的减少趋势。 相似文献
47.
火柴头染色体核型及核糖体基因原位杂交研究 总被引：5，自引：0，他引：5
火柴头是一年生单子叶恶性杂草，具有地上和地下茎同时开花结实的特殊习性。研究表明，地上和地下部分种子产生的植株体细胞染色体核型相同，中期染色体平均长10μ，体细胞染色体核型由两对随体染色体(染色体5和9)、4对中部着丝点(染色体1，3，8，11)和5对亚中部着丝点染色体组成(染色体2，4，6，7，10)，属对称型。核型公式为2n=22=4m 5sm 2st。核糖体基因(45S）位于两对随体染色体的核仁组织区，杂交信号在两对染色体上的程度不同，表明了该基因的拷贝数在位点间有差别，并明确证实地下种子是正常自花受精的结果。本文对利用核糖体基因作为分子标记，通过原位杂交进行植物染色体的识别和染色体的进化进行了讨论。 相似文献
48.
两种一步法RNA提取试剂的比较 总被引：2，自引：0，他引：2
RNA的提取在生物医学研究和临床检测上应用广泛。本文分别用进口Invitrogen公司生产的以及我们自己研制的一步法RNA提取试剂，提取大肠杆菌RNA、鸡肌肉组织RNA和尿囊液RNA，通过核酸电泳和荧光定量RT-PCR进行比较。结果表明用我们自己研制的和进口的试剂提取的RNA都不含有DNA；这些RNA都可以作为模板进行RT-PCR检测，并且在数量上相互之间没有明显差异。说明我们自己研制的一步法RNA提取试剂可以取代进口试剂。此外，本文还讨论了此类试剂一些评定方法。 相似文献
49.
50.
实时荧光定量PCR构建绵羊PrP基因标准品质粒和标准曲线 总被引：1，自引：0，他引：1
羊痒病是一种传染性的致死性神经退行性疾病,常引起绵羊和山羊发病,该病在欧洲流行了大约250年,但是它的流行病学和传播机制还不是很清楚.正常的朊蛋白（PrPc）不能引起神经退行性病变,虽然目前已经对许多组织的PrP mRNA进行了检测,但是对它的生物学功能还知之甚少,对PrP基因表达的机制尚不清楚.研究显示,不同组织来源的细胞中朊蛋白的表达程度差异很大,主要出现于神经细胞中.PrPc在细胞中的高水平表达可促使PrPc向PrPsc转变,目前的研究中,对绵羊PrP mRNA的转录机制尚未阐释清楚.因此,对绵羊外周和中枢系统PrP mRNA的表达进行定量,有助于探讨各组织器官中的PrP在羊痒病的发生过程中的作用. 相似文献