猪囊尾蚴小热休克蛋白的免疫原性研究     

郭爱疆  岳城  景志忠  贾万忠  窦永喜  郑亚东  才学鹏 《中国预防兽医学报》2006,28(2):167-171

利用反转录聚合酶链式反应（RT—PCR），从猪囊尾蚴虫体中扩增出小热休克蛋白（small Heat shock protein，sHSP）基因，克隆至原核表达载体pGEX-4T-1，在大肠杆菌BL21中以GST融合蛋白的形式表达。SDS-PAGE分析证明，表达产物为64Ku的融合蛋白，经凝胶扫描分析，表达量约占菌体可溶性蛋白的30％。免疫学分析（Western blot，ELISA）结果表明，sHSP能与猪囊尾蚴血清反应。将表达产物点电泳后切胶回收免疫小鼠，进行Western blot和ELISA检测，其抗血清能与猪囊虫粗抗原及纯化的sHSP重组融合蛋白产物发生免疫学反应。该研究为丰富新的诊断试剂和免疫用重组抗原具有重要意义，同时，预测糖基化、磷酸化作用在sHSP实现生物学功能方面也具有广泛的意义。  相似文献   

Preparation of an immunizing glycoprotein from inactivated rabies vaccine (author's transl)     

P Atanasiu  H Tsiang 《Comparative immunology, microbiology and infectious diseases》1979,1(3):179-184

Biochemical characteristics of rabies glycoproteins have been studied in the present work. Glycoproteins were prepared from rabies virions grown on different tissue culture origin. Isoelectrofocusing of rabies glycoprotein was achieved. The protective activity of rabies glycoprotein was assayed on laboratory animals. Results of neutralising antibody response correlated to resistance to challenge are discussed.  相似文献   

传染性法氏囊病病毒变异株弱毒的遗传稳定性与免疫原性     

周继勇  李建荣 《中国兽医学报》2000,20(4):317-320

将传染性法氏囊病病毒 ( IBDV) JD1 、JD2 、NB变异毒株直接适应于鸡胚成纤维细胞上致弱。 3个毒株2 1代和 3 5～ 3 8代细胞毒分别连续回归鸡体 5代。结果表明 ,IBDV JD1 株 2 1～ 3 5代、JD2 株 3 7代、NB株 3 8代细胞毒对雏鸡已基本失去致病力 ,是毒力相对稳定的弱毒株。 IBDV JD1 、JD2 、NB变异株弱毒以 3 0 0 0TCID5 0 、50 0 0 TCID5 0 、1 0 0 0 0 TCID5 0 、1 50 0 0 TCID5 0 4个不同免疫剂量免疫 SPF鸡后的攻毒试验结果表明 ,JD1 、NB毒株的免疫效果明显优于 B87、Bursine3毒株疫苗 ,具有优良的免疫原性。JD1 、NB毒株的最佳免疫剂量分别为 50 0 0 TCID5 0 、3 0 0 0 TCID5 0 。抗体消长规律表明 ,JD1 株疫苗一次免疫后的有效保护期为 2 1 4d,最低有效中和抗体保护效价为 1∶ 4 0 71。  相似文献   

动物支原体相关蛋白的免疫原性研究进展   总被引：1，自引：1，他引：0  

陈胜利  郝华芳  季文恒  储岳峰 《畜牧兽医学报》2021,52(5):1230-1237

动物支原体可引起肺炎、关节炎、乳腺炎等一系列重要疾病，临床上常表现为慢性、持续性感染，给养殖业造成严重的经济损失。亚单位疫苗具有安全高效、成本低廉等优点，是支原体疫苗研究的重要发展方向。本文主要介绍了重要动物支原体相关蛋白的免疫原性研究进展，以期为今后动物支原体病亚单位疫苗研究提供参考。  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒HB-3株GP5-M-N蛋白核酸疫苗的构建及免疫原性     

杜冬华  周静  王爱华  陈赛娟  刘涛 《兽医大学学报》2014,(2):177-181

为探索猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）核酸疫苗用于免疫预防的可行性,试验用PCR方法扩增出PRRSVHB-3株GP5、M和N基因,通过I,inker序列将GP5和M串联为GP5-M,双酶切后和N基因-起插入真核表达载体构建重组质粒pcDNA-GP5-M-N,经酶切鉴定表明GP5、M和N基因和载体连接正确。然后将重组质粒转染至Marc-145细胞,经间接免疫荧光及Western blot分析证实重组蛋白能在Marc-145细胞中表达。然后用重组质粒pcDNA-GP5-MN免疫Balb／c小鼠,中和抗体检测结果表明,首免后2周即有小鼠产生可检测到的病毒中和抗体（1：4）,随后抗体水平快速升高,第8周抗体效价达到最高（1：32）。说明本试验构建的重组质粒pcDNA-GP5-M-N能诱发免疫小鼠产生较高水平的中和抗体,为PRRSV核酸疫苗的研究奠定了基础。  相似文献   

Positive effects of porcine IL-2 and IL-4 on virus-specific immune responses induced by the porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) ORF5 DNA vaccine in swine     

Deyuan Tang  Jian Liu  Chunyan Li  Hua Zhang  Ping Ma  Xianfeng Luo  Zhiyong Zeng  Nining Hong  Xia Liu  Bin Wang  Feng Wang  Zhenlei Gan  Fei Hao 《Journal of veterinary science (Suw?n-si, Korea)》2014,15(1):99-109

  相似文献   

鸡球虫病免疫机理研究进展     

邓雯  李银聚  王天奇  胡霞 《河南科技大学学报(农学版)》2001,21(2):100-102

综述了鸡球虫的免原性及鸡球虫病的体液免疫，细胞免疫等相关免疫效应的性免疫机理研究进展。  相似文献   

腐败梭菌无毒重组α毒素的表达与免疫保护性分析     

杜吉革  赵炜  彭国瑞  李倩琳  印春生  姚文生  张秀坤  杨柳  付利芝  陈小云  刘莹 《畜牧兽医学报》2021,52(1):202-209

本研究旨在获得腐败梭菌无毒重组α毒素,并评价其免疫保护性。对已知的腐败梭菌α毒素编码基因进行优化设计和人工合成,获得了缺少第212-222位共11个氨基酸编码序列的基因片段（GCSA_Δ11）。将该基因克隆至原核表达载体pET-30a（+）中进行表达与纯化。利用Western blot方法检测获得的重组α毒素（rCSA_Δ11）与腐败梭菌天然毒素抗血清的反应性,并采用小鼠检测其毒力。随后,以rCSA_Δ11制备疫苗免疫家兔,按照《中华人民共和国兽药典》（2015年版）规定的方法检测家兔血清的中和抗体效价。结果表明,rCSA_Δ11可溶表达比例可达46%,且能与腐败梭菌天然毒素抗血清反应。进一步的试验结果显示,rCSA_Δ11丧失了对小鼠的毒力,0.1 mL的一免兔血清可中和8~12个小鼠最小致死量（MLD）的腐败梭菌天然毒素;二免兔血清可中和32~45个小鼠MLD的腐败梭菌天然毒素。1个家兔MLD的腐败梭菌天然毒素攻毒后,对照组家兔4/4死亡,免疫组家兔得到了100%（4/4）的保护。综上表明,无毒性的rCSA_Δ11保留了良好的免疫保护性,从而为腐败梭菌病基因工程亚单位疫苗的研制提供了重要的试验数据。  相似文献   

猪丹毒丝菌CbpB蛋白对小鼠的免疫效果分析     

刘君雯  吴琼娟  邢刚  占松鹤  魏建忠  孙裴  刘雪兰  李郁 《畜牧兽医学报》2021,52(6):1689-1699

探究猪丹毒丝菌（ER）CbpB蛋白的免疫原性和保护作用,为深入研制ER基因工程亚单位疫苗提供新的思路和技术储备。以表达的ER重组蛋白CbpB、SpaA、CbpB+SpaA以及ER灭活全菌体（V-AEr21）、商品化弱毒疫苗、商品化灭活疫苗分别免疫小鼠。利用间接ELISA检测小鼠血清中IgG抗体,血清杀菌试验测定功能性抗体水平,攻毒试验测定免疫保护率,组织荷菌数试验测定ER定植情况,并采集小鼠组织脏器（脾、肺、肝、肾）制备切片,观察病理变化。结果显示：与免疫原性最优的商品化弱毒疫苗相比,CbpB和SpaA虽产生的IgG抗体均仅为1∶6 400,但血清杀菌效果强;对小鼠的免疫攻毒保护率与商品化弱毒疫苗相同,均为100%,且在脾、肺、肝、肾组织中均无细菌定植,病理组织学观察与空白对照无明显区别。CbpB重组蛋白具有良好的免疫原性和保护作用,能刺激机体产生体液免疫和细胞免疫,可以作为猪丹毒基因工程亚单位疫苗的候选抗原。  相似文献   

马链球菌马亚种3种抗原蛋白对小鼠免疫的免疫原性分析     

吕芬芬  马晓慧  汪丽  马陈  张宝江  苏艳 《畜牧兽医学报》2021,52(3):752-762

旨在对比研究马链球菌马亚种（Streptococcus equi subsp.equi,S.equi）3种不同抗原蛋白——分选酶A （sortase A,SrtA）、M蛋白（SeM）及IgG结合蛋白（EAG）的免疫原性及免疫保护效果,本研究以表达并纯化的SrtA、SeM及EAG 3种蛋白单独及联合免疫小鼠,免疫后检测了血清抗体效价、抗体亚型、攻毒保护率,以real-time PCR定量检测免疫相关分子,并对攻毒后的肝、脾、肺、肾荷菌量进行检测和病理组织学观察。结果显示：联合免疫组诱导产生的抗体效价及IgG、IgG1和IgG2b的抗体水平均高于各种蛋白单独免疫组,SrtA诱导的IgG2a抗体水平高于SeM和EAG免疫组;攻毒保护力、荷菌量及病理组织学观察结果表明,联合免疫组优于SeM和EAG免疫组;免疫相关分子的荧光定量PCR检测结果显示,SrtA诱导的MHCⅠ、TCR、TLR2、TLR3及TLR4的转录水平显著高于SeM、EAG免疫组和对照组,3种抗原联合免疫可显著提高MHCⅠ分子及TLR3分子的转录水平。综上表明,SrtA具有较强的免疫调节和诱导能力,3种蛋白联合免疫可诱导产生较高的免疫水平和良好的免疫保护效果。该结果为马腺疫亚单位疫苗的研究提供了理论参考和试验基础。  相似文献