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1种植大户经营中存在的共性问题
1.1雇工经营弊端多。由于大面积出现用工荒现象,导致雇工难,工人工资上涨,各基地工人日工资在25-45元不等,无形中增加了经营成本。同时,工人责任心差、技术水平低、管理不到位, 相似文献
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<正>怎样抓住有意和你合作,同时又有很多顾虑的客户?这个问题是一个共性问题,是在营销过程当中,普遍都能够遇到的。首先要问为什么客户对你有顾虑?顾虑是怎样产生的?是不信任还是对你不了解,沟通有问题?那么要采取怎样的手段让对方去了解你、认可你?沟通产生最大的效益,产生最直接的认可。消除顾虑的方法有以下几种: 相似文献
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王秀忠 《农产品加工.学刊》2010,(4)
1认真总结技术研发体系建设工作的成效2009年,在各方面的共同努力工作下,农产品加工技术研发体系建设工作取得了显著成效,主要表现在以下五个方面。1.1技术研发体系得到进一步完善2009年共有近500家科研单位、大专院校、骨 相似文献
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【目的】分析定位Bt Cry1类毒素Cry1Ab、Cry1Ac、Cry1B、Cry1C、Cry1F的共性结构域,克隆并表达共性结构域蛋白,为筛选Bt毒素广谱抗体及建立广谱检测方法打下基础。【方法】利用生物信息学和分子模拟技术,通过SWISS-MODEL同源建模分别对5种Cry1类毒素进行三维建模,并结合Ramachandran plot、ERRAT和Verify3D方法评价模型构象的合理性。通过分析比对5种Cry1类毒素的三维结构,确定DomainⅠ区域作为5种Cry1毒素的共性结构域。以含Cry1Ac基因的苏云金芽孢杆菌库斯塔克亚种为模板设计引物,PCR扩增获得共性结构域DomainⅠ基因,将其经NcoⅠ和NotⅠ双酶切连接至原核表达载体pET-26b(+),构建原核表达载体pET-26b-DomainⅠ。重组质粒经菌液PCR、双酶切以及测序鉴定验证正确后,转化至E.coli BL21(DE3),经终浓度为1 mmol·L~(-1)的IPTG在20℃下诱导表达16h后检测共性结构域蛋白的表达情况。离心收集诱导表达的大肠杆菌菌液,进行超声波破碎处理,收集上清及沉淀,采用SDS-PAGE分析融合蛋白的表达。利用His-Trap HP镍亲和柱纯化上清中的可溶性融合蛋白,经SDS-PAGE电泳、Western blot和ELISA试验验证纯化的共性结构域蛋白的生物活性。【结果】基于氨基酸序列及三维空间比对分析,发现5种Cry1类毒素的DomainⅠ的序列一致性最高,而且它们的DomainⅠ三维结构几乎完全重合,确定DomainⅠ区域作为5种Cry1毒素的共性结构域,通过PCR、双酶切及测序鉴定成功构建原核表达载体pET-26b-DomainⅠ,经IPTG诱导表达、His-Trap HP镍亲和柱纯化获得了可溶性的DomainⅠ共性结构域蛋白,SDS-PAGE和Western blot证实表达的共性结构域蛋白的分子量约为33.4 kD,且能与抗His标签鼠单克隆抗体发生特异性反应,ELISA试验证实共性结构域蛋白与5种Cry1类毒素特异性抗体均具有很强的结合能力,抗原表位分析结果显示共性结构域蛋白具有和完整的Cry蛋白存在多个潜在抗原表位位点的特征,抗原表位区域所占的比例分别为48.4%和63.6%,表明共性结构域蛋白具有良好的免疫原性和免疫反应性。【结论】基于分子模拟与分子克隆技术,成功定位及表达纯化获得共性结构域蛋白,为下一步利用共性结构域为靶标分子制备广谱特异性识别Cry1类毒素抗体打下基础。 相似文献
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中国热带农业科学院网 《世界热带农业信息》2019,(4):1-2
4月11日,农业农村部韩长赋部长一行到中国热带农业科学院考察。韩长赋部长对中国热科院近年来取得的成绩和为国家热带农业发展做出的贡献给予了充分肯定和高度评价,希望中国热科院着力解决热带农业方向性、战略性和关键性的技术瓶颈,突破一批重大基础领域和关键共性技术,加快建设世界一流的热带农业科技创新中心。农业农村部副部长余欣荣,农业农村部党组成员、中国农科院院长唐华俊,海南省副省长刘平治等陪同考察。 相似文献
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