火鸡传染性法氏囊病病毒YL株VP2基因的克隆和序列比较     

李佩伦许信刚  甘甲忠陈清  卢景冯超 黄宇 黎军 《勤云标准版测试》2005,(4)

参考GenBank发表的传染性法氏囊病毒(IBDV)基因组序列,设计并合成了一对特异扩增IB-DVVP2基因的引物。以广西玉林发病火鸡群分离的IBDV野毒YL株为材料,以其基因组为模板利用RT-PCR技术扩增出了1.5kb的cDNA产物,将VP2基因克隆于PUC119质粒上,得到重组PUC119质粒。并对VP2基因全序列测定、分析和聚类表明,YL株与欧洲超强毒株非常相似,而与经典强毒株、弱毒株和变异株相差较大。  相似文献   

水稻黄矮病毒结构蛋白的分离及其小鼠腹水抗体的制备     

秦文胜  高东明  陈声祥  方荣祥  庞震 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》1993,(4)

从人工接种感染黄矮病毒(Rice Yellow Stunt Virus,RYSV)的水稻茎杆中提取得到了部分纯化的RYSV制品,病毒制品经Tricine-SDS-PAGE得到分子量分别为84 kD,60 kD,31 kD和29.5 kD的4条主要蛋白带和分子量为170kD和43kD的两条次要蛋白带。根据弹状病毒结构蛋白命名法,按分子量大小依次命名为L,G,N,NS,M_1和M_2蛋白。从电泳凝胶上切下G和N蛋白带,制成抗原免疫BALB/C小鼠;制得G和N蛋白小鼠腹水抗体。经Dot-blot试验测得N蛋白抗体效价为1:1000,G蛋白抗体效价为1:400。  相似文献   

木薯天蛾颗粒体病毒某些生化特性——病毒DNA限制性内切酶解及结构多肽分析     

李国勋 《东北农业大学学报》1990,(1)

本文采用限制性内切酶,分析木薯天蛾颗粒体病毒(Erinnyis ello Granulosis Virus简称EeGV)的DNA。同时,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE),对病毒包涵体蛋白质和病毒粒子结构多肽进行分析。结果表明,EeGV基因组的分子量为89.82 Kbp(硷基对);包涵体蛋白只有一条带,其分子量为31.0KDa(道尔顿);病毒粒子至少有18种结构多肽,其分子量在14.00～205.00 KDa范围之间,其中,有6条带明显地不同于Piris rapae GV和Trichoplusia ni GV;经EcoR_1,Hind Ⅲ,Kpnl酶解的EeGV DNA片段数目和分子量都明显不同于PrGV和TnGV的DNA片段。  相似文献   

光合细菌在烟草上的应用   总被引：1，自引：0，他引：1  

吴小平 《福建农林大学学报(自然科学版)》1999,28(4):471-473

用光合细菌喷洒烟草，１个月后土壤中的固氮菌、放线菌、硝酸细菌、硫化细菌、氨化细菌显著增加；而丝状真菌、反硝化细菌大幅度减少；烟草干物质积累增加１３．７％ ．同时还发现，光合细菌能诱导烟草增强抗病毒能力的活性  相似文献   

番木瓜环斑病毒海南分离物全基因组结构分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

卢雅薇  沈文涛  唐清杰  牛艳梅  周鹏 《广东农业科学》2007,(9):54-58

从感病的海南番木瓜叶片中提取总RNA,经RT-PCR和RACE方法分段扩增番木瓜环斑病毒(PRSV)全基因组序列.序列拼接结果显示,PRSV中国海南分离株(HaiNan-P)基因组除3'-末端polyA尾巴外,由10323个核苷酸组成,编码3343个氨基酸.同源性分析表明,HaiNan-P编码的氨基酸序列与GenBank中公布的11株PRSV同源性为89.8%～93.2%,略高于全长核苷酸的82.3%～89.1%.P1蛋白编码区同源性较低,仅为65.4%～80.1%,而HC-Pro、CI及CP同源性相对较高.运用MEGA 3.1软件、NJ法绘制系统进化树,分析结果显示,PRSV分离株类群分化与地理分布有一定的相关性.  相似文献   

西花蓟马(Frankliniella occidentalis)研究进展^*   总被引：5，自引：0，他引：5  

武晓云  程晓非  张宏瑞  李正跃 《云南农业大学学报(自然科学版)》2006,21(2):178-183

 西花蓟马(Frankliniella occidentalis)属于缨翅目(Thysanoptera)昆虫,最初分布于美国西部,20世纪80年代开始迅速扩散至全球各大洲,目前已在69个国家和地区有报道,成为世界性害虫。F. occidentalis可以以持久性的方式传播番茄斑萎病毒属(Tospovirus)病毒,如番茄斑萎病毒(tomato spotted wilt virus, TSWV);并且,F. occidentalis传播的病毒所造成的经济损失远远大于其本身所造成的损失。因此控制F. occidentalis的种群以及它的扩散是控制Tospoviruses的关键所在,有鉴于此,各国对F. occidentalis进行了深入的研究。主要论述了近年来F. occidentalis在生物学特征、室内饲养以及它和TSWV的互作关系等方面的进展。  相似文献   

猪瘟病毒石门株E2基因4个抗原结构域的原核表达   总被引：1，自引：1，他引：1  

徐璐  范学政  王琴  蒋春燕  宁宜宝  王泰健 《中国农业科学》2006,39(4):814-818

【目的】对猪瘟病毒石门株E2基因进行原核表达，以期获得可溶性表达产物，为检测猪瘟抗体的ELISA试剂盒的研制奠定基础。【方法】用PCR技术扩增了重组S21质粒载体上的猪瘟病毒石门株E2基因的4个主要抗原结构域ABCD，A1A2，B和C。分别将4个片段克隆于pMAL－p2X载体中，经PCR、双酶切和测序鉴定，E2基因的4个主要抗原结构域片段的位置、大小和读码框均正确。将4个片段分别转化到表达菌TB1、BL21、BL21－CodonPlus(DE3)-RP和BL21(DE3)中，共得到16株重组表达菌，用IPTG进行诱导表达，对表达产物进行SDS-PAGE电泳和免疫印迹分析。【结果】E2基因的4个主要抗原结构域均可在这4种表达菌中表达，但以BL21－CodonPlus(DE3)-RP的表达效果最好，可表达出可溶性并且产量较高的目的蛋白。免疫印迹结果表明，表达的目的蛋白可以被猪瘟阳性血清和针对E2蛋白的单克隆抗体所识别。【结论】只表达目的基因的抗原结构域，可以缩短表达片段的长度，有利于获得可溶性目的蛋白，并且具有良好的血清学反应的特异性。  相似文献   

应用ZrNPV防治落叶松绶尺蠖的研究     

王志英  岳书奎  张忠心  张国财  顾国奇  韩贵京  王建山 《东北林业大学学报》1995,23(3):40-44

在落叶松人工林内利用落叶松绶尺蠖核型多角体病毒（ＺｒＮＰＶ）对落叶松绶尺蠖２、３、４龄幼虫进行了防治。使用浓度为１０３×１０７ＰＩＢ／ｍＬ的防治效果：２龄幼虫校正死亡率为７３．５３％；４龄幼虫校正死亡率为６７．５１％。使用浓度为１．０３×１０８ＰＩＢ／ｍＬ的防治效果：２龄虫校正死亡率为９０．８１％；３龄幼虫校正死亡率为８９．４７％；４龄幼虫校正死亡率为８６．４９％。同时证明落叶松绶尺蠖幼虫的龄期越小其死亡率越高、致死时间越短．防治的最适虫龄以２或３龄幼虫为佳。  相似文献   

胡葱黄条病毒外壳蛋白的原核表达与抗血清的制备     

罗朝鹏  林林  陈炯  吴云锋  陈剑平 《浙江农业学报》2007,19(3):147-150

设计特异性引物PCR扩增得到胡葱黄条病毒(SYSV-O)的全长外壳蛋白(CP)基因,构建原核表达载体pET32a-SYSV-O CP,转化大肠杆菌诱导表达。结果表明,SYSV-O CP基因在大肠杆菌中得到了高效表达,分子量约为46 kDa。用纯化表达产物免疫小鼠制备抗血清,Western blot检测结果表明,抗血清与SYSV-O的CP发生了强烈的特异性反应。使用该抗血清进行了田间样品的带毒检测。  相似文献   

一步法复合RT-PCR鉴别ND强毒与AI病毒的研究     

黄兵  马秀丽  宋敏训  王莉莉  李峰  陈溥言 《西南大学学报(自然科学版)》2005,27(6):881-884

根据新城疫病毒（NDV）融合蛋白和禽流感病毒（AIV）核蛋白的核酸序列设计2对引物,对NDV和AIV的特异扩增片段分别为156bp和219bp,建立了同时检测强毒力NDV和AIV核酸的一步法复合RT—PCR。试验中未能检出弱毒力NDV,IBV,IBDV,REV,REOV及SPF鸡肌肉组织的RNA,从不同年代分离的16个NDV强毒株全为阳性而NDV弱毒株全为阴性。经验证,复合引物与单一引物的扩增效率一致,能够检出NDV和H;亚型AIV的最低病毒量分别为10^3.7EID。和10^3.9EID50。试验结果表明,此次建立的一步法复合RT—PCR特异、敏感,适用于强毒力NDV和AIV．感染的快速鉴别。  相似文献