杀线虫细菌W3胞外体壁降解蛋白酶的纯化及部分特性     

田宝玉  蓝灿华  江贤章  柯崇榕  黄薇  黄建忠 《安徽农业科学》2009,37(24):11583-11586

[目的]为筛选和开发高效新型生物杀线虫剂提供依据。[方法]以土壤中筛选的1株具有明显杀线虫活性的细菌菌株W3为供试菌种,对其进行发酵培养,采用硫酸铵沉淀、疏水层析、阴离子柱层析等方法从发酵液中分离W3菌株的杀线虫活性成分,并对各活性成分的杀线虫活性进行测定。[结果]W3菌株粗蛋白处理线虫4h后,虫体活动异常,部分虫体静止不动,处理36h后大部分虫体不活动,部分虫体体壁断裂现象,最终所有线虫被完全消解;从发酵液中纯化出1种能降解线虫体壁的胞外蛋白酶,该酶的分子量约为45KDa,其作用的最佳pH值为7～8,最佳温度为45℃。[结论]W3菌株胞外蛋白酶具有明显的杀线虫活性和线虫体壁降解活性。  相似文献   

重组Lv-PEN-3蛋白先天免疫相关功能的研究     

杜志强 《浙江农业学报》2013,25(4):0

以凡纳对虾PEN-3对虾素分子作为研究对象,分别进行了细菌结合功能、蛋白酶活性抑制功能与抑菌作用等研究。结果显示：重组Lv-PEN-3分子可以较强地结合细菌,可以有效抑制分泌型蛋白酶的活性,但是其抑制细菌生长的作用较弱,三者之间的关联需要进一步探索。  相似文献   

Optimization of Enzymatic Treatments for Deskinning of Catfish Nuggets     

Taejo Kim  Juan L. Silva  Pramuk Parakulsuksatid  Dja Shin Wang 《Journal Of Aquatic Food Product Technology》2013,22(4):385-393

One collagenase (CLS1^®) and two proteases (Proleather FG-F^® and Protease N^®) were used to deskin the peritoneal membrane of catfish nuggets. The factors were used in a full factorial experiment design: enzyme solution concentration (0.2, 0.3, and 0.4% by weight), temperature of enzyme solution (30, 37, and 44°C), and immersion time (10, 15, and 20 min). Contour plots showed that the enzyme Proleather FG-F^® maximized whiteness of catfish nuggets at 40–44°C for 15–19 min. Treatment of the enzyme Proleather FG-F^® at 0.2% for 15 min had the highest yield (103.4%) at 44°C. Enzymatic skinning has potential in removing the peritoneal membrane from catfish nuggets, improving color (whiteness), and yield.  相似文献   

松毛虫肠道产蛋白酶菌株的筛选鉴定及培养条件研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

孙佑赫  周开艳熊智 《中国农学通报》2012,28(16):18-21

为了获得产蛋白酶能力高的细菌资源。采用酪蛋白平板法从松毛虫肠道中分离筛选得到16株产蛋白酶的菌株。通过比较透明圈大小和测定发酵后酶活力,筛选出一株产酶能力较高的菌株2N01。根据序列比对结果,构建关于2N01的系统发育树,将其鉴定为Enterobacter hormaechei。研究培养条件对该菌株生长的影响,确定2N01产酶培养的最适温度是40℃,最适pH 8.0,培养72 h左右出现产酶峰值,酶活力达50.07 U/mL。通过研究表明,菌株2N01是产蛋白酶的较好材料,具有一定的应用前景。  相似文献   

中性蛋白酶制备酪蛋白抗菌肽的研究     

付莉  王冰 《中国农学通报》2012,28(27):283-289

为了替代抗生素的广泛使用,防止病原菌耐药性大大提高,开发酪蛋白抗菌肽新型抗菌剂。本研究利用中性蛋白酶水解酪蛋白,以中性蛋白酶浓度、酶解时间、酶解温度、pH值为影响因子,在单因素试验结果的基础上,应用Centure-composite Design中心组合方法进行四因素三水平的实验设计,以酪蛋白水解液抑菌圈直径为响应值,运用响应面法对水解条件进行进一步的优化。结果表明：酶解温度、酶浓度、酶解时间、pH对酪蛋白水解液抑菌圈直径影响显著;酪蛋白抗菌肽制备的最佳工艺为：水解温度为50℃,酶浓度为3.73%,pH 7.9,酶解时间为130 min。回归方程预测酪蛋白水解液抑菌圈直径理论值可达到21.93 mm,3次验证实验的平均抑菌圈直径为21.91 mm,与理论最大值接近,可见该模型能较好地预测酪蛋白抗菌肽制备的最佳条件。  相似文献   

温度和食物种类对红褐斑腿蝗取食、生长及肠道消化酶活性的影响   总被引：4，自引：2，他引：2  

王世贵  周莹  冯利苹 《植物保护学报》2008,35(1):1-6

在实验室不同温度(10、25、35℃)下,比较茶叶和小麦苗对红褐斑腿蝗Catantops pinguis取食利用能力的影响及其与蝗虫肠道消化酶活性之间的关系。结果表明,温度对蝗虫的日均取食量、相对生长率影响极显著,均表现为35℃>25℃>10℃,对日均绝对增重(干重)的影响趋势与此相同,但各处理温度间差异不显著,对消化酶活性影响显著,总体表现为高温时活性大于低温,但不同的水解酶表现各不相同。食物种类对近似消化力影响不大,但对小麦苗的取食量极显著高于对茶叶的取食量;三个处理温度下日均绝对增重均以小麦苗为食时高于以茶叶为食,但差异不显著,以小麦苗为食时相对生长率极显著高于以茶叶为食,显示食物对相对生长率影响显著;取食小麦苗时肠道消化酶活力极显著高于以茶叶为食,只有类胰凝乳蛋白酶活力差异不显著。  相似文献   

碱性蛋白酶酶解丰年虫卵蛋白工艺条件优化     

彭鑫华  张建新  聂路  王欣 《西北农业学报》2011,20(12):197-202

以丰年虫卵为原料,利用碱性蛋白酶酶解制备营养价值更高的多肽,并对其水解参数进行优化.以水解度(DH)为指标,通过单因素试验研究酶解时间、酶解温度、pH、底物质量分数及加酶量等因素对碱性蛋白酶酶解丰年虫卵蛋白质过程的影响.在此基础上利用3因素(pH、酶解温度和加酶量)中心组合试验设计,得出最优酶解时间为150 min,底...  相似文献   

青虾泛素特异性蛋白酶9基因Usp9全长cDNA序列的克隆及表达分析     

袁晖  周巧  张世勇  傅洪拓 《中国农学通报》2015,31(17):28-37

本研究首次克隆了青虾的Usp9 (ubiquitin-specific protease 9)基因全长 cDNA序列,并在青虾中使用荧光定量 PCR 技术首次检测了 Usp9 基因在不同组织和发育阶段中的表达变化。青虾 Usp9 基因cDNA全长 1259 bp,包括 162 bp的 5’ UTR, 978 bp的开放阅读框以及 116 bp的 3’ UTR。氨基酸序列比对分析显示,青虾 Usp9蛋白与太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)、凤仙花熊蜂(Bombus impatiens)及灰短尾负鼠(Monodelphis domestica)的蛋白相似度分别为 99%、 97%和 95%。应用 MEGA5.1软件对青虾与其他物种的 Usp9氨基酸进行系统进化树分析,结果表明,青虾 Usp9与同为甲壳纲的钩额型蚤状溞聚为一支,具有最近的亲缘关系。采用荧光定量 PCR技术检测了 Usp9基因的时空表达,水温 28℃时, Usp9基因在青虾发育的后幼体发育期第 5天 PL5出现表达高峰。Usp9基因在 6种成体组织中均有表达,表达水平依次为：脑＞腹神经＞精巢＞卵巢＞肌肉＞肠。而在雌雄组织差异表达分析表明,精巢中Usp9基因表达量比卵巢的比值为 2.86,脑组织中雄虾的表达量比雌虾为 2.27,差异均为极其显著(P＜0.01)。这表明Usp9基因的表达和雄性偏向基因趋势是一致的（雄性表达：雌性表达≥1.5）。本研究为进一步开展青虾Usp9基因功能等相关研究奠定了基础,并可为青虾性别的遗传调控机制研究提供参考。  相似文献   

曲霉型豆豉用高产蛋白酶菌种的选育     

黎尔纳  邓开野 《仲恺农业工程学院学报》2014,27(4):20-24

从曲霉型阳江豆豉曲中筛选出5株菌落形态不同的曲霉(Aspergillus spp.),通过纯种发酵制备豆豉曲,测定了豆豉曲中碱性蛋白酶和中性蛋白酶的活性,从中筛选出1株蛋白酶活性较高的菌种,并对该曲霉进行ITS r DNA序列分析,发现该曲霉与Aspergillus oryzae strain P6B2(JX429926)的同源性最高,故鉴定为米曲霉(Aspergillus oryzae).以该米曲霉为出发菌株,通过紫外线诱变和硫酸二乙酯化学复合诱变处理,选育得到优良高产蛋白酶活性的突变株,其中性蛋白酶酶  相似文献   

三氯生与镉单一及复合污染对土壤呼吸和酶活性的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

王凤花  张振国  贾文 《土壤学报》2018,55(2):422-431

为了解典型药品和个人护理品(PPCPs)——三氯生与镉复合污染的生态效应,采用室内培养实验和联合毒性预测模型,首次评价了三氯生与镉单一及复合污染对土壤呼吸及参与土壤碳氮循环的相关酶活性的生态毒性。结果表明:三氯生与镉单一及复合污染对土壤呼吸呈现激活—抑制—激活的生态效应;刺激了蛋白酶活性,激活率先降低后升高,56 d时达到最大。整个实验期间均抑制了蔗糖酶活性,镉(10.0 mg kg-1)单一污染培养14 d抑制率达到最大值(81%),三氯生单一胁迫呈现负的剂量效应关系,两者复合污染无显著的剂量效应关系。联合效应评价模型预测表明,相比三氯生或镉单一污染,两者的复合胁迫对土壤呼吸呈现随时间变化的拮抗—协同—加和效应,对土壤蛋白酶呈现协同—加和—协同的联合效应,而对土壤蔗糖酶活性则主要为协同效应。  相似文献