J亚群禽白血病病毒分离株HLJ09SH01株感染性克隆的构建及其致病性研究     

纪晓琳  王琦  高玉龙  王永强  秦立廷  祁小乐  高宏雷  王笑梅 《中国预防兽医学报》2013,(1):15-18

为构建J亚群禽白血病病毒(ALV-J)分离株的感染性克隆并鉴定其对蛋鸡和肉鸡致病力的差异,本研究从黑龙江地区分离鉴定一株ALV-J分离株HLJ09SH01,以其核酸为模板,采用PCR方法分3段扩增其前病毒cDNA,PCR产物经克隆酶切后依次连接,获得一个含有完整ALV-J前病毒cDNA的重组质粒,命名为pBlue-HLJ09SH01。将其转染DF-1细胞,进行病毒拯救。通过间接免疫荧光、禽白血病抗原试剂盒检测及反转录酶活性试剂盒检验,表明拯救的病毒为ALV-J,命名为rHLJ09SH01。将其分别人工接种11日龄蛋鸡和肉鸡鸡胚,孵育出壳后隔离饲养32周。致瘤性试验结果表明,rHLJ09SH01可以导致57.9%的蛋鸡发生肿瘤,83.3%的肉鸡发生肿瘤。表明该感染性克隆具有亲本病毒的致病性。  相似文献   

马立克氏病毒强毒GD0908株感染性克隆的构建     

陈瑞爱 《中国兽药杂志》2013,47(5):1-5

为研究马立克氏病毒(MDV)新型疫苗及MDV致病机理,将MDV强毒GD0908株的全基因组作为细菌人工染色体(BAC)转化进大肠杆菌,构建GD0908株的感染性克隆.利用同源重组将BAC载体插入MDV基因组的US2区,将包含BAC载体的MDV DNA电转化入大肠杆菌菌株DH10B,最后将鉴定成功包含GD0908株全基因组的BAC DNA转染鸡胚成纤维细胞(CEF),成功拯救出重组病毒,命名为rGD0908,其与父代病毒GD0908株在CEF细胞上的生长速度没有差异.该感染性克隆将为MDV的相关研究提供技术平台.  相似文献   

鸡贫血病毒安徽分离株感染性克隆的构建及其感染特性     

刘雪兰  丁泠  寇家倩  吴颖  周梦琴  谢小丽 《安徽农业大学学报》2019,46(2):229-233

鸡贫血病毒（chicken anemia virus,CAV）是诱导雏鸡发生免疫抑制的重要病原之一。应用PCR方法从安徽某鸡场送检病鸡肝组织中检测并鉴定CAV,扩增病毒全基因组序列插入pcDNA3.1(+)载体,并引入含Kpn I （GGTACCCAG）酶切位点的9 bp外源性标签,获得顺次连接的双拷贝CAV基因组的重组质粒,通过脂质体介导转染鸡MDCC-MSB1淋巴细胞并拯救出CAV感染性克隆毒株。经动物试验,感染性克隆毒株在接种1日龄健康雏鸡后15 d,对胸腺等免疫器官指数影响较小,胸腺病变不明显,表明其感染能力减弱,为进一步分析CAV致病机制和筛选疫苗候选株奠定基础。  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征的概述     

潘雪男  Scott A.Dee 《国外畜牧学(猪与禽)》2014,(1):60-61

正猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)首次报道是1987年在美国。从那时起,PRRS疫情和病毒的成功分离已在整个北美和欧洲被发现或证实。1病因及流行病学病原体是组动脉炎的病毒。该病毒有包膜,个体大小从45至80 mm。病毒经乙醚或氯仿处理后可能会灭活;然而,该病毒在冷冻条件下极其稳定,在-70℃下其感染性能保持4个月,随着温度的升高,感染性降低(56℃下15~20 min)。  相似文献   

美国研究：日本香菇或对治愈宫颈癌有奇效     

《中国食用菌》2014,(6):61-61

最新研究发现,1种日本蘑菇或对杀死引发宫颈癌的病毒有奇特功效。据英国《每日邮报》报道,人类乳头瘤病毒（HPV）是1种十分普遍且感染性很高的病毒,可造成人体皮肤黏膜的鳞状上皮增殖,多在宫颈、嘴和咽喉等部位发病。有超过四分之三的女性会在她们的一生中感染这种病毒,严重的甚至会引发宫颈癌。  相似文献   

1例羊感染猪链球菌的诊断     

许金蔓  高尚  张信军  成大荣  王彦红  鞠辉明 《中国兽医杂志》2019,(2):66-67,I0008

<正>猪链球菌病为急性败血性链球菌病,是由猪链球菌引起的感染性强、病死率高的一种热性传染病。猪链球菌是一种需氧或兼性厌氧革兰阳性菌,也是一种人兽共患病病原[1]。猪链球菌有着极高的致病性,除了易感动物猪外,牛、羊和人等哺乳类动物以及犬、猫、马等动物也能感染此菌[2-3]。其中羊感染此菌可通过消化道、皮肤损伤、脐带以及与带菌野猪接触等渠道感染,病菌可存在于泥土、灰尘、潮湿环境或者侵扰的草丛当中,由此增加羊感染此菌的机率。猪链球菌病是世界各地  相似文献   

动物诊疗机构医疗废物处理探讨     

王会勇  陈景来 《河南畜牧兽医(综合版)》2019,(8):36-37

动物诊疗机构医疗废物是指动物诊疗机构在医疗、预防、保健以及其他相关活动中产生的具有直接或者间接感染性、毒性以及其他危害性的废物。为了加强医疗废物的安全管理,防止人畜共患病传播,保护环境,保障人体健康,近期,对濮阳华龙区内的动物诊疗机构处理医疗废物进行了检查.  相似文献   

要高度重视猪圆环病毒病的危害     

《畜禽业》2009,(9):31-31

猪圆环病毒痛及其混合感染性疾病感染范围广,发病率高,死亡率高,当前尚缺商品性疫苗和特效治疗药物,是当今乃至今后相当长时期内最重要和对养猪业威胁最严重的一类疫病。PCV2对猪的机体的危害是深远的,不仅表现在对机体多个系统的病理损害．也表现在对猪生长的各个阶段的危害。  相似文献   

猪圆环病毒2型感染性克隆构建     

辛子琪  杨明珠  张晓茜  靳继惠  陈晓春  李俊平 《中国兽药杂志》2024,58(5):1-9

基于PCV2滚环复制原理,在分析PCV2不同基因亚型代表毒株基因组结构和序列的基础上,设计2对引物用于PCR扩增PCV2基因组序列。以从收集到的疑似PCV2感染的10份猪血清样品中提取的DNA为模板,用设计的引物扩增目的片段,并进行测序分析,1株为PCV2a型,4株为PCV2b型,5株为PCV2d型。每种基因型毒株中各选取一个样本,利用上述2对引物进行PCR扩增,并将扩增产物克隆至pEASY-Blunt simple载体中,通过双酶切连接2个PCR片段,构建含有约1500 bp重叠序列的PCV2基因组的质粒。通过脂质体转染法将含PCV2全基因组的质粒转染至PK-15细胞进行病毒拯救,经PCR和IFA两种方法验证,证明成功拯救出3个基因型的PCV2毒株。通过对PCV2全基因组结构及序列分析,该方法同样适用于PCV2g、PCV2h基因型病毒的感染性克隆构建。本研究建立了一种基于反向遗传学技术的PCV2感染性克隆的构建方法,为开展PCV2的病原学研究提供了技术支持。  相似文献   

PCV2感染性克隆的构建与拯救病毒在不同细胞系中的增殖特性     

《经济动物学报》2021,25(2):114-119,124

将猪圆环病毒Ⅱ型(Porcine circovirus type 2,PCV2)感染性克隆分别转染到猪肾上皮细胞(PK15)和猪小肠上皮细胞(J2)中获得拯救病毒PCV2,比较病毒在2个细胞系中的复制动力学差异。设计特异性引物,通过PCR法和Over-lap PCR技术获得含1.1个拷贝PCV2基因组的DNA片段,克隆于p SP72载体获得PCV2感染性克隆。用PCV2感染性克隆分别转染PK15和J2细胞,Real-time PCR和间接免疫荧光试验(IFA)检测结果表明:拯救病毒可在PK15和J2细胞系中分别连续盲传10代以上,且PK15培养的PCV2基因组的拷贝数极显著高于J2培养的(P0.01),提示获得的PCV2拯救病毒在PK15的增殖性能优于J2,为进一步探索PCV2基因组的功能及PCV2相关发病机制奠定了基础。  相似文献