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991.
松毛虫AFLP反应体系的建立及引物筛选 总被引:2,自引:0,他引:2
为研究不同环境条件下松毛虫的遗传多样性,以油松毛虫为材料研究松毛虫的AFLP反应体系。对选择性扩增中的预扩增产物稀释倍数、Mg2+浓度、dNTP浓度、引物浓度和Taq酶浓度进行了比较分析。结果显示,在选择性扩增体系中,预扩增产物稀释40倍,Mg2+浓度1.5 mmol/L、dNTP浓度0.2 mmol/L,引物浓度0.500pmol/L,Taq酶用量为1U,扩增产物经5%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳可以得到稳定的结果。用优化的AFLP反应体系,以油松毛虫、赤松毛虫和马尾松毛虫为材料筛选引物,从81对引物组合中筛选出10对多态性高的引物组合。 相似文献
992.
3种不同启动子构建ACC脱氨酶基因植物表达载体 总被引:1,自引:0,他引:1
从阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)UW4菌株克隆出ACC脱氨酶(1-aminocyclopmpane-1-carboxylic acid deaminase)基因连接至pGEM-T vector上,并采用3种不同启动子(组成型表达启动子CaMV35S、花特异表达启动子CHSA及衰老特异表达启动子SAG12)分别构建ACC脱氨酶基因的植物表达载体,经PCR及酶切鉴定均已构建成功.为后期选择不同的花卉等植物材料遗传转化研究打下基础. 相似文献
993.
由RNA介导的干扰过程可抑制特异基因的表达。1998年华盛顿卡耐基研究院的Fire和马萨诸塞大学癌症中心的Mello首次将双链RNA(doublestrandedRNA,dsRNA)注入线虫,发现可诱导基因靶向专一性的基因表达沉默,且较单独注射正义链或反义链都要强10倍,同时这种现象也可在线虫中观察到, 相似文献
994.
Use of random amplified polymorphic DNA (RAPD) analysis to detect jujube witches' broom phytoplasmas
Jujube witches' broom is a devastating disease of Ziziphusjujube that occurs in various jujube regions of China. Nucleic acid extracted from midribs of samples collected from three jujube varieties ("Suanzao", "Lajiaozao" and "Langzao") from symptomatic and asymptomatic shoots were tested by random amplified polymorphic DNA analyses. Using 13 different 10 and 11-bp random primers the amplification of jujube DNA was achieved from all the samples; AMI4 primer provided amplification of specific DNA fragments of about 400 bp, only from samples collected from symptomatic plants. No genetic variations in these varieties were identified using the other 11 arbitrary primers; only with primer AL07 it was possible to differentiate "Langzao" from the other two varieties tested. All the experiments were repeated 2 times and the results were consistent. Compared with PCR analyses with phytoplasma-specific primers, RAPD techniques resulted to be an alternative rapid and sensitive method for detecting jujube phytoplasmas presence in different jujube varieties. 相似文献
995.
996.
YU Xu GAO Xiang CHEN Qi-jiao WU Dan DONG Jian ZHAO Wan-chun PANG Hong-xi LI Zhe-qing 《中国农业科学(英文版)》2009,8(12):1419-1428
In the present study, one unique low-molecular-weight glutenin subunit (LMW-GS) gene. LMWXY22-2 (GenBank no. FJ028810), was isolated from wheat cultivar Xiaoyan 22 (Triticum aestivum L.) by a pair of genomic specific PCR primers for 1B chromosome. Sequence analysis revealed that LMWXY22-2 was composed of 1 364 bp nucleotides, including a 317 bp promotion region and a 1 047 bp coding region which could be translated into a mature protein of 349 amino acids. In spite of a few minor mutations, the sequence of 5' untranslated region (UTR), the coding region, the deduced N- and Cterminus comparisons indicated that LMWXY22-2 belonged to the reported subunits of LMW-m type and type lII group 5, respectively. Inner gene markers for 1D chromosome together with the phylogenetic analysis revealed that this gene was classified into Glu-D3, which was not in agreement with the I B locus-specific primers for LMW genes completely. 相似文献
997.
重叠延伸PCR技术及其在基因工程上的应用 总被引:17,自引:0,他引:17
重叠延伸PCR技术(gene splicing by overlap extension PCR,简称SOEPCR)由于采用具有互补末端的引物,使PCR产物形成了重叠链,从而在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸,将不同来源的扩增片段重叠拼接起来。此技术利用PCR技术能够在体外进行有效的基因重组,而且不需要内切酶消化和连接酶处理,可利用这一技术很快获得其它依靠限制性内切酶消化的方法难以得到的产物。重叠延伸PCR技术成功的关键是重叠互补引物的设计。重叠延伸PCR在基因的定点突变、融合基因的构建、长片段基因的合成、基因敲除以及目的基因的扩增等方面有其广泛而独特的应用。本文综述了重叠延伸PCR的原理和目前的应用情况,并指出了此技术中的注意事项,展望了其应用前景。 相似文献
998.
999.
棉花特异种质资源的创造与利用研究 总被引:10,自引:5,他引:5
对棉花特异种质资源的类型、创造和培育方法及其在棉花研究中的应用情况进行了分析。采用人工诱变、航天搭载、组织培养、转基因技术和杂交等,创造和培育出了包括突变体、近等基因系、重组自交系、染色体变异体、同核异质系、加倍单倍体等在内的棉花特异种质资源,应用于棉花遗传研究、图谱构建、基因定位和功能基因组研究。提出了今后棉花种质资源研究和发展的关键是发掘新基因源、提高转基因效率以创造更多更有价值的特异种质资源。 相似文献
1000.