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H5N1亚型禽流感病毒NS1基因的原核表达及其ELISA检测方法的建立 总被引:4,自引:0,他引:4
采用RT-PCR技术扩增了禽流感病毒(AIV)A/Goose/HLJ/p46/2003(H5N1)的NSl基因,将其克隆于融合蛋白表达载体pMAL-c2X上,转化DH5α大肠埃希氏菌感受态细胞,经BamHⅠ和HindⅢ双酶切鉴定及序列分析,表明筛选到了重组质粒pc2X-NS1。SDS-PAGE电泳结果显示,重组质粒转化TB1大肠埃希氏菌后,经0.3mmol/L的IPTG诱导,融合蛋白MBP-NS1得到大量表达,融合蛋白以可溶形式存在,分子质量约为67ku。Western-blotting检测结果表明,融合蛋白MBP-NS1能够与H5N1亚型AIV活病毒感染康复鸭血清发生特异性反应,而不能够与H5N1亚型AIV灭活疫苗免疫鸭血清发生反应。试验初步建立了以纯化的融合蛋白MBP-NS1为包被抗原的间接ELISA检测方法,为AIV灭活疫苗免疫家禽与AIV感染家禽的鉴别诊断奠定了基础。 相似文献
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中晚熟杂交一代辣椒镇研3号是以江苏本地羊角椒自交系Y9007为母本,由甘肃酒泉引进的甜椒自交系T9218为父本配制的一代杂交组合。镇研3号为中熟辣椒品种,果形为牛角形,纵径15cm,肩横径5.0cm、肉厚0.40cm,单果平均重42g。果面光滑,青熟果绿色、味微辣,风味佳,适宜在长江流域或南方保护地栽培种植,667m2产量约为4200~5000kg。 相似文献
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XU Rui ZHANG Yun ZHANG Mei GE Zhi-ming CHEN Wen-qiang LI Xiu-chang CAI Heng ZHU Hui 《园艺学报》2003,19(5):642-644
AIM:To elucidate the relationship between the intracellular calcium concentration changes and left ventricular hypertrophy and function in the spontaneously hypertensive rats (SHR).METHODS:Intracellular free calcium concentrations were measured by Fura 2 methodology and left ventricular function quantitated by cardiac catheterization in 20 SHR aged 10, 22, and 34 weeks and 20 age-matched Wistar-kyoto (WKY) rats.RESULTS:(1) The systolic blood pressure(SBP), intracellular calcium concentrations and left ventricular mass / body weight index (LVM/BW) were significantly higher in all three age groups of SHR than the corresponding groups of WKY; (2) Compared with age-matched WKY groups, the peak left ventricular pressure descending rate(-dp/dtmax) decreased while left ventricular relaxation time constant (τ)increased significantly in SHR aged 22 and 34 weeks. The peak left ventricular pressure ascending rate(dp/dtmax) and the left ventricular contractility index were significantly increased only in the 34 weeks SHR; (3) Intracellular calcium concentrations showed a positive correlation with LVM/BW,SBP,-dp/dtmax and τ(r=0.47-0.83,P<0.01)and a negative correlation with dp/dtmax and the left ventricular contractility index (r=-0.46,P<0.05 and r=-0.81, P<0.01).CONCLUSION:Intracellular calcium overload is one of the potential mechanisms in the induction of left ventricular hypertrophy as well as of systolic and diastolic dysfunction. 相似文献
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灰色灾变理论在宁南山区干旱气候预测中的应用 总被引:15,自引:2,他引:15
在分析宁南山区干旱气候特征及其对农业生产影响的基础上 ,借助灰色灾变理论分别建立了春旱、夏旱、秋旱、春夏连旱、夏秋连旱、全年旱等六种干旱类型的 GM( 1 ,1 )预测模型 ,并对 2 0 0 0~ 2 0 2 0年的干旱气候做出预测。经对 2 0 0 0年和 2 0 0 1年预测结果验证 ,吻合性良好。此外 ,提出了宁南山区抗旱防旱的综合农业措施。研究结果可对广大旱区抗旱减灾 ,促进农业生产发展提供科学指导。 相似文献
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AIM: To study whether Sca-1+ cells from fetal liver can be induced to differentiate into neuronal cells in vitro. METHODS:Sca-1+cells from 14 5-days-old murine fetal liver were isolated with a magnetic cell sorting kit, and were cultured in Dulbecco s modif ied Eagle s medium(DMEM)/F12 supplemented with 10%fetal bovine serum(FBS), and passaged at a rat io of 1 3 when cells reached more than 80%confluence.The 5 passage cells were induced by 10-3mol/Lβ-mercaptoethanol(β-ME)and 5×10-7 mol/L all-trans-retinoic acid(RA)for 24 hours, and then incubated in serum-free medium for 5 hours to 5 days.The characteristics of treated cel s were assayed by immunocytochemistry staining analysis at 5 hours, or 5 days.RESULTS: Cells treated with β-ME and RA exhibited neuronal phenotype and expressed neuron-specific protein such as neuron-specific nuclear protein (NeuN), neuronfilament-M, and neuron-specific tubulin-1 (TuJ-1) but not tau, MAP-2, or the astrocyte-specific marker glial fibrillary acidic protein (GFAP).CONCLUSION: Sca-1+ cells from fetal liver, of which most are regarded as hematopoietic stem cells, could differentiate into early immature neuronal cells in vitro. These findings suggest that Sca-1+ cells from fetal liver may be an alternative source in cell therapy and gene therapy of neural dysfunction. 相似文献