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11种兰属植物DNA的提取及RAPD-PCR实验体系的建立与优化 总被引:3,自引:1,他引:3
采用改进的CTAB-DNA提取方法,从11种兰属植物的嫩叶中提取总DNA。所得的DNA样品的A260/A280值在1.7~1.9之间,琼脂糖凝胶上主带清晰,较少降解,样品纯度高,DNA量大。另外,对影响RAPD-PCR的Mg^2+、dNTPs、Taq酶、引物浓度等因素进行了优化。确定优化的反应体系为:75ng模板DNA,1×Buffer,2.5mmol/LMg^2+,0.15mmol/LdNTPs,0.75UTaq酶,引物浓度0.4μmol/L,反应总体积为25山。该体系在20个供试兰属实验材料中获得较好的扩增结果。 相似文献
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对两个玉米雄性不育系的细胞质分类研究 总被引:3,自引:0,他引:3
本文从普通遗传学、植物病理学和分子生物学的水平对玉米雄花不育系—元徐cms—小黄和恩二激cms—大黄进行了综合性的分类研究。大田的育性反应表明,这两个不育系的育性恢复受一对显性基因控制。对花粉染色的观察发现F1可育花粉与败育花粉基本上呈1:1分离。用小斑病T小种接种,这两个不育系不表现专化感染。通过mtDNA的分析 相似文献
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以冻融法快速纯化高活力基因工程Taq DNA聚合酶 总被引:1,自引:0,他引:1
用含有TaqDNA聚合酶基因的pTaq表达质粒转化E.coli DH5α菌株,IPTG诱导表达Taq DNA聚合酶,利用该酶的热稳定性,反复2次-70℃,75℃交替冻融以裂解细胞释放胞浆;以高速离心除去冻融变性的细胞碎片及核酸蛋白的复合物以达到快速纯化Taq DNA聚合酶的目的。PCR扩增反应和SDS-PAGE分析表明所制备的Tap DNA聚合酶的纯度,活力,敏感性,特异性均达到试验要求。该方法具有快速简便的优点。 相似文献
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变铅青链霉菌的DNA上存在着一种异常的修饰,使其在含有微量Fe~(++)的缓冲液中电泳时,双链DNA遭到降解。DNA的切割是位点特异性的。与已知修饰特征的DNA进行同步试验发现,变铅青链霉菌的这种特异性修饰与目前所发现的修饰系统(如DNA甲基化)均不相同,很可能是一种新的修饰系统。 相似文献
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