真核表达NDV F基因重组质粒的构建及其在CEF细胞中的转染     

刘兆球  姜世金  常维山 《中国预防兽医学报》2003,25(6):444-446

通过PCR方法自含NDVZF基因的克隆质粒中扩增NDVF基因 ,将其与真核表达载体pcDNA3..1/V5_His_TOPO重组。经核酸内切酶酶切 ,阳性克隆鉴定准确无误 ,核酸序列测定结果与原始基因比较 ,同源性大于 99% ,启始密码和终止密码未出现变异 ,将该重组质粒命名为pcDNANDVZF。将pcDNANDVZF在脂质体作用下转染CEF细胞 ,用间接免疫荧光试验检测 ,结果证明pcDNANDVZF可在CEF细胞中大量表达F蛋白。  相似文献   

不锈钢管的焊接技术     

孙杰 《农业装备与车辆工程》2009,(3)

汽轮机润滑油系统油管道焊接是汽轮机专业焊接的一个重点.为了保证汽轮杌润滑油管道系统的清洁度及汽轮机主机润滑系统、调节保安系统安全可靠地工作,其材质全部由不锈钢组成,所以油管道安装的内在质量格外重要.总结出一套焊接组装工艺措施,提高了生产效能,满足了汽轮机油管的质量要求.  相似文献   

S1核酸酶突变检测法的优化     

李春雨 王涛梁本国  李光晨 《勤云标准版测试》2004,(5)

优化了S1核酸酶突变检测体系,结果表明(1)扩增法比杂交法产生异源双链DNA更节省时间;(2)PCR产物可以直接作为突变检测的底物;(3)适当降低反应温度、适当增加反应缓冲液中的NaCl浓度、适当缩短反应时间可提高突变检测效果。  相似文献   

大肠杆菌耐热性肠毒素ST1—K99／LacZ基因重组的研究     

冯书章  黄培堂 《中国兽医学报》1997,17(2):112-115

将构建的ｐＢＳＴ２～６工程菌质粒用限制性内切酶ＢａｍＨＩ／ＢｇｌⅡ酶切，经琼脂糖凝胶电泳和电洗脱，回收１４７ｂｐ的目的ＳＴ１基因。随之将该基因分别重组到能有效表达Ｋ９９菌毛抗原和ＬａｃＺ酶的ｐＧＫ９９之Ｋ９９基因ＢｇｌⅡ位点和ｐＵＣ１８的ＢａｍＨＩ位点中。通过ＳＴ１基因探针菌落原位杂交、特定酶切分析及ＤＮＡ序列分析，筛选并鉴定出了理想重组子，从而构建出了能分别表达ＳＴ１融合基因产物的工程菌株ｐＳＫ２１９和ｐＸＳＴ１。  相似文献   

灵芝硒多糖SeGLP—1抑制小鼠肝腹水癌作用的研究   总被引：8，自引：0，他引：8  

尚德静  崔乔  高林 《食用菌学报》2001,8(3):34-38

灵芝硒多糖SeGLP-1由葡萄糖、甘露糖、木糖、半乳糖和鼠李糖组成，与灵芝多糖一样是由α-糖苷键连接的吡喃多糖，硒在多糖内极可能是以O=Se=O的形式结合。给移杆肝腹水癌HCa-f的小鼠每日注射50mg/kg的SeGLP-1,15d后抑癌率可达80%，说明SeGLP-1的抑癌作用与其分子组成和分子结构的变化有关。  相似文献   

SDS-PAGE和PCR检测1B/1R易位系研究初报     

司红起  马传喜 《勤云标准版测试》2006,(7)

采用18个冬小麦品种作为供试材料,分别通过SDS-PAGE检测黑麦Secalin蛋白和PCR检测黑麦1RS染色体或其片段,结果表明:SDS-PAGE检测不出不带有secalin蛋白的1B/1R小片段易位系,而PCR则能检测出,从而提高1B/1R易位系的检出率;SDS-PAGE和PCR结合是检测1B/1R易位系的一种快速经济的有效方法。  相似文献   

墨绿色苦瓜新品种翠玉的选育     

常伟  李志  李跃建 《中国蔬菜》2005,(10):85-86

翠玉是以自交系0123为母本,0219为父本配制成的苦瓜一代杂种.中早熟,果实长棒形,纵径30～35 cm,横径10～13 cm,瓜肉厚1.0～1.5 cm,单瓜质量500～700g,产量2 500～3000kg·(667 m2)-1,皮墨绿色,大刺瘤,对白粉病和枯萎病的抗性强于对照翠妃,适宜南方春秋种植.  相似文献   

鸡新城疫病毒F基因和鸡IL—2重组DNA疫苗的构建   总被引：40，自引：0，他引：40  

姜永厚  陈奖励  宋秀龙  童光志  孔宪刚  刘忠贵 《中国预防兽医学报》2001,23(2):81-84

利用已克隆到的新城疫D26株F基因和鸡IL－2基因，经过载体改建，将他们共同克隆于真核表达质粒pCDNA3上，经酶切分析、PCR鉴定证实成功构建了共表达鸡新城疫病毒F基因和鸡IL－2的重组质粒，为探讨禽类重组基因疫苗的构建及鸡IL－2在基因疫苗中的作用奠定了基础。  相似文献   

RT-PCR及RFLP分析技术对鸡传染性支气管炎病毒的诊断和S1基因分型的研究   总被引：4，自引：0，他引：4  

磨美兰  李康然  韦平 《中国预防兽医学报》2001,23(4)

本研究使用分别扩增整个S1糖蛋白基因 (引物A)和S1糖蛋白基因N_端高变区Ⅰ (引物B)的 2对引物对 3个IBV标准株M41、Connecticut、Arkansas及 5个地方分离株 (C60 ,D41A ,D41B ,A112 1,A1171)进行RT_PCR扩增。用引物A时 ,有 5个IBV毒株扩增到目的片段 (172 0bp) ;用引物B时 ,所有 8个IBV毒株均得到与预计大小相符的目的产物 (2 2 8bp)。对 172 0bp的PCR产物用限制性内切酶HaeⅢ进行酶切 ,结果得出 3个不同的RFLP图谱 ,其中M41、Connecticut、D41B具有相同的HaeⅢ酶切图谱。Arkansas和D41A则分别具有互不相同的图谱 ;对 2 2 8bp的PCR产物进行DdeⅠ、RsaⅠ限制性内切酶消化 ,根据它们的RFLP图谱 ,8个IBV毒株可分为 5个基因型。综合 2对引物的PCR产物的RFLP分析结果 ,8个IBV毒株可分为 7个基因型 ,分型的结果与传统的血清学方法吻合。本研究建立的方法和技术具有快速、简单、特异、灵敏等优点 ,为现场流行毒株的定型(基因型 /血清型 )及其S1基因变异的跟踪研究以及更有效防制传染性支气管炎奠定了基础。  相似文献   

大白菜新品种中熟6号的选育     

方淑桂  陈文辉  曾小玲 《中国蔬菜》2004,1(4):25-26

中熟 6号是由大白菜雄性不育系 98- 2 - 1和从丰抗 70中多代自交分离而选育出的自交系F - 3-2 - 3配制而成的优良一代杂种。抗霜霉病、病毒病与软腐病 ,生长期 6 0～ 6 5d(天 ) ,叶球叠抱、圆头、卵圆形。南方栽培平均单球质量 2 .0kg ,每 6 6 7m2 产量 4 0 0 0～ 5 0 0 0kg。  相似文献