稻瘟菌致病相关基因的研究策略     

谷安宇  赵明富  何月秋 《农业与技术》2005,25(3):66-68

结合稻瘟菌致病相关基因和无毒基因的研究进展．以及图位克隆法在稻痘菌研究中的运用．对稻瘟菌致病相关基因的研究策略作了简要评述。  相似文献   

牦牛角真皮乳头cDNA文库的构建     

陈佳  郁枫  吴晓梅  任强 《安徽农业科学》2007,35(12):3495-3496

构建cDNA表达文库用于克隆和研究牦牛角生长相关基因.Trizol提取牦牛角真皮乳头总RNA并纯化mRNA,用ZAP Express cDNA Synthesis Kit合成双链DNA,进行末端修饰,接入ZAP表达载体.经Gigapack Ⅲ Gold Packaging extract体外包装,转染XL1-Blue MRF'宿主菌,形成初级文库,初级文库进一步扩增形成稳定的cDNA文库.结果表明,文库库容量为4×107,重组率达93%,为进一步从文库中筛选相关基因提供了有效工具.  相似文献   

蜡梅花cDNA文库构建及其高频出现脂转移蛋白cDNA的表达   总被引：3，自引：0，他引：3  

眭顺照  李名扬  蒋安  王洋  秦华  皮伟  任琛 《中国农业科学》2007,40(3):644-648

【目的】构建蜡梅花cDNA文库，分析蜡梅脂转移蛋白基因的表达，为探索蜡梅冬季开花分子机理，分离克隆特色基因奠定基础。【方法】以蜡梅花器官为材料，用SMART cDNA Library Construction Kit 构建文库，RT-PCR分析基因表达。【结果】经测定原始文库滴度达到1.4×106 pfu/ml，扩增总文库滴度约为1010pfu/ml，重组率达到96%，插入片段在0.5 kb 以上，平均约1.1 kb，通过PCR 检测，从总文库中检测到了表达丰度不同的蜡梅PI、AP3和LTP基因的特异片段，说明所构建的文库覆盖度高、代表性强，LTP基因具有内含子，而总文库中扩增出的LTP基因不含内含子，说明所构建的cDNA文库无基因组DNA污染， LTP基因在蜡梅开花各个时期均表现较高的转录水平，与EST分析时高频率出现LTP序列的情况相符，证实所构建的文库能够反映蜡梅开花过程基因表达的基本情况。【结论】已获得高质量的蜡梅花cDNA文库，可以用于进一步的基因克隆或EST测序分析，这是首次正式报道蜡梅cDNA文库的构建。LTP基因在蜡梅开花过程中可能具有重要的生物学功能，为探索蜡梅冬季开花分子机理提供了线索。  相似文献   

猪肝脏组织表达序列标签(ESTs)的初步分析   总被引：4，自引：0，他引：4  

李宁  赵志辉  刘兆良  赵兴波  连正兴  吴常信 《中国农业科学》2002,35(12):1525-1528

 构建了猪肝脏组织cDNA文库 ,并对文库中随机挑选的 4 38个克隆的表达序列标签 (ESTs)进行了研究。结果表明 ,在所研究的 4 38个ESTs中 ,186个在猪种中已有匹配序列 ,37个在人类及其它物种中可以找到同源序列 ,2 15个为未知功能基因。试验还测定了文库中 4 5个cDNA克隆的全长插入序列 ,结果表明 ,19个为已知功能基因 ,11个没有发现开放阅读框 ,其它 15个具有开放阅读框 ,但基因的功能未知。这些结果初步代表了肝脏组织的功能基因表达谱。  相似文献   

水稻白叶枯病菌GX1329基因组文库的构建及含编码TAL效应物基因的克隆的分离     

张子宇  赵帅  莫伟兰  罗雪梅  玉延华  段承杰  冯家勋 《广西农业生物科学》2011,30(4):352-358

由革兰氏阴性细菌水稻白叶枯病菌引起的水稻白叶枯病是亚洲、北美以及非洲部分地区最严重的水稻病害之一,水稻白叶枯病可使水稻减产高达50％以上。研究表明水稻白叶枯病菌的毒力主要依靠三型分泌系统所分泌的效应物。为了解水稻白叶枯病菌广西菌株GX1329中含有avrBs3／pthA家族基因的情况,本研究应用Alu I部分酶切其基因组DNA,构建了含有736个克隆的菌株GX1329的基因组文库。BamHI酶切分析随机挑取的15个文库克隆表明,克隆的外源DNA随机性良好,克隆的最小片段为27．7kb,最大为58．5kb,平均大小为39．9kb,文库克隆容量约为2．8×10^3Mb,该文库中包含基因组中任一个基因的概率为99．4％。利用来自水稻白叶枯病菌菲律宾菌株PX086的无毒基因avrXa10的第252位～第486位核苷酸序列作为探针,通过菌落原位杂交从GX1329基因组文库中筛选到37个含avrBs3／pthA家族基因的克隆。再通过Southern杂交分析,得到了17个独立克隆。这17个克隆中至少含有13个不同的avrBs3／pthA家族基因。这些基因在GX1329基因组中有的单独存在,有的两个或两个以上串联存在。本工作基本上明确了菌株GX1329基因组中avrBs3／pthA家族基因的数量,为进一步研究菌株GX1329中avrBs3／pthA家族基因的功能奠定了基础。  相似文献   

棉花一个新F-box基因的克隆与表达分析   总被引：1，自引：1，他引：0  

卫江辉  范术丽  宋美珍  庞朝友  喻树迅 《棉花学报》2011,23(3):212-218

以中棉所36均一化cDNA文库为基础,利用e-PCR和RT-PCR技术,从陆地棉中棉所36中克隆出来一个新的F-box基因,命名为GhFBO(GenBank:JF498592).该基因的开放阅读框全长为1275个核苷酸,编码424个氨基酸,在N端含有一个F-box保守结构域,在C端含有两个TUBBY-like保守结构域...  相似文献   

专家文库     

《动物科学与动物医学》2011,(12):4-4

刘德武,男,1966年出生,安徽肥东人,博士,教授。1988年获得华中农业大学畜牧专业学士学位,1997获得华南农业大学动物遗传育种与繁殖专业硕十学位,2005年获得华南农业大学动物遗传育种与繁殖专业博士学位。1988-1994年于安徽省国营淮南乳品公司从事奶牛生产技术和管理工作,1997年后在华南农业大学动物科技学院工作至今,先后任讲师、副教授和教授。  相似文献   

专家文库     

《猪业科学》2011,28(5):4-4

吴志君同志1983年毕业于广西从事养猪业28年,曾任技术员、畜牧公司经理、总经理;现任广西农垦永新畜牧集董事兼总经理;中国畜牧业协会猪业广西畜牧兽医学会养猪学分会副理雩学人员联谊会副会长,国家生猪产圳术体综合试验站站长,推广研究员。  相似文献   

专家文库     

《猪业科学》2011,28(8):8-4

黄涛,男,湖北随州人,农学博士。2000年本科毕业于华中农业大学畜牧专业,获农学学士学位;2006年研究生毕业于华中农业大学动物遗传育种与繁殖专业,获农学博士学位;2010年11月赴美留学,进行为期一年的科学研究。  相似文献   

番茄乙烯信号转导相关基因剧EIN3（Le-EIL）的克隆和表达   总被引：4，自引：0，他引：4  

徐晶宇罗云波  魏绍冲 《农业生物技术学报》2003,11(1):25-29

根据拟南芥（Arabidopsis thaliana)、烟草(Nicotiana tabacum)EIN3基因保守区序列设计简并引物，采用RT—PCR扩增从番茄(Lycopersicon esculentum)果实中得到一个486bp的同源片段。以此片段作为探针，从番茄果实cDNA文库中分离到一个拟南芥EIN3的同源基因的cDNA克隆，命名为Le-EIL。该克隆含有一个1845bp的开放阅读框，编码615个氨基酸。经同源分析，它与烟草TEIL基因的同源性为79％，与拟南芥EIN3,EIL2和EIL3的同源性分别为59％、56％、52％、46％。Le-EIL基因表达与番茄果实的成熟及乙烯生成情况具有较强的相关性。在普通番茄果实的不同成熟时期Le—EIL基因都有表达，并且随着成熟度的增加基因表达有明显的增强，在转色期和粉红期Le-EIL基因的表达最强，在全红期后减弱。在转反义ACS基因的转基因番茄果实中，只有开花后60d的果实中Le-EIL基因有微弱的表达，在其它成熟时期均没有表达。  相似文献