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171.
172.
大蒜茎尖玻璃化法超低温保存技术研究 总被引:6,自引:0,他引:6
用山东‘苍山大蒜’进行了茎尖玻璃化法超低温保存技术的研究。5~8 mm大蒜茎尖在MS +0.7 mol/L蔗糖的固体培养基上预培养7 d, 切取3.0~3.5 mm的茎尖, 在20℃下经60% PVS2 处理60 min,再于0℃下用PVS2 处理5~60 min后, 换适量新鲜PVS2 , 浸入液氮。保存2 d或1个月后取出, 在37℃水浴中解冻2 min, 用MS + 1.2 mol/L蔗糖液体培养基洗涤2次, 每次10 min, 经过恢复培养, 茎尖成活率最高可达到100%。 相似文献
173.
研究主要探讨冷冻前细胞松弛素B(CB)预处理水牛M Ⅱ期卵母细胞对其冷冻效果的影响.以水牛M Ⅱ期的卵母细胞为材料,通过玻璃毛细管(GMP)和玻璃化冷冻液EDS33(16.5%EG 16.5%DMSO Sucrose)对水牛M Ⅱ期的卵母细胞进行两步法玻璃化冷冻保存,即卵母细胞首先放入预平衡液(7.5%EG 7.5%DMSO Sucrose)中平衡3 min,然后再移入玻璃化冷冻液中30 s后装管直接投入液氮.冷冻前卵母细胞随机分为2组,一组用7.5μg/mL CB预处理30 min,另一组未用CB预处理作对照组,然后都冷冻保存.解冻是在蔗糖浓度逐渐降低的解冻液中进行的.解冻后存活的卵母细胞进行孤雌激活,以分裂率和囊胚发育率作为评定卵母细胞冷冻效果的指标.结果发现,GMP组和GMP CB组卵母细胞解冻后的存活率(88.89%、94.20%)和培养后发育到囊胚的比率(8.82%、14.55%)差异均不显著(P>0.05),但GMP组和GMP CB组存活卵母细胞激活后的分裂率差异显著(32.69%、55.56%,P<0.05),所以细胞松弛素B预处理可以提高GMP冷冻卵母细胞的发育能力. 相似文献
174.
为了评价冷冻保护剂和离心处理对猪MⅡ期卵母细胞冷冻效率的影响,本试验研究了2种不同冷冻保护剂(乙二醇、二甲基亚砜和蔗糖混合物,EDS;乙二醇、丙二醇和蔗糖混合物,EPS)对猪MⅡ期卵母细胞冷冻效率的影响,以及细胞松弛素B和离心极化处理对猪MⅡ期卵母细胞冷冻效率的影响。结果表明:用EPS和EDS作为猪MⅡ期卵母细胞冷冻保护剂,冻融后其成活率差异并不显著。用不同浓度CB处理猪MⅡ期卵母细胞,7.5μg/mL的处理组冻融后成活率显著高于对照组(P<0.05)。猪MⅡ期卵母细胞经7.5μg/mL CB和离心极化双重处理,冻融后成活率显著高于CB单处理组和对照组,且3组间差异显著(P<0.05)。表明CB和离心极化处理都能改善MⅡ期猪卵母细胞冷冻效率,但它们作用机制还有待于进一步研究。 相似文献
175.
176.
为研究星斑川鲽胚胎玻璃化冷冻保存,首先,于室温条件下采用玻璃化液五步平衡法处理星斑川鲽的尾芽期胚胎30 min,比较分析分别含有葡萄糖、果糖、蔗糖和海藻糖的4种不同玻璃化液(PMG3G、PMG3F、PMG3S、PMG3T)的毒性,发现含有海藻糖的玻璃化液(PMG3T)对尾芽期胚胎的毒性最小,胚胎的成活率与孵化率相对较高,分别为75.00%±5.43%和50.00%±4.53%(P0.05)。其次,分析玻璃化液PMG3T对星斑川鲽囊胚期至出膜前期7个时期的胚胎的毒性,发现尾芽期胚胎和心跳期胚胎经处理后成活率较高,分别为69.33%±6.43%和72.67%±3.94%(P0.05),但心跳期胚胎的孵化率较高,为65.33%±3.91%(P0.05),尾芽期胚胎次之,说明心跳期胚胎对PMG3T的耐受能力相对于尾芽期胚胎更好,更适宜进行胚胎的玻璃化冷冻保存实验。最后,采用玻璃化液PMG3T对心跳期胚胎进行–196℃冷冻实验,发现所处理的60粒胚胎中有7粒成活,可漂浮水面,继续培养后可见进一步发育,但未孵化出膜。另外,将100 mL未受精卵(未经玻璃化液处理)置于–20℃,分别在冷冻5~70 min时取出10 mL复温并进行授精,结果显示,冷冻5 min的卵的受精率为89.83%±6.51%(P0.05),随着冷冻时间的延长,受精率越来越低,冷冻70min时受精率为3.71%±1.27%,畸形率越来越高,在冷冻70min时达到100%。本研究筛选出比较适宜的玻璃化液、低温耐受性较高的胚胎发育时期,为星斑川鲽胚胎低温冷冻保存技术的建立和种质的长期保存和应用提供了实验数据。 相似文献
177.
以色素万寿菊带腋芽的茎段为外植体,研究离体快繁中蔗糖、AgNO3、琼脂、植物凝胶、活性炭及不同封口材料对芽增殖及玻璃苗产生的影响。结果显示:30 g/L蔗糖适合万寿菊幼苗的生长,玻璃化率随蔗糖浓度(10~60 g/L)的增加而减少,60 g/L的蔗糖玻璃化率仅9.13%;AgNO3有抑制玻璃苗发生作用,5.0 g/L AgNO3可使玻璃化率低至9.81%;活性炭的用量对玻璃化影响最为明显,5.0 g/L活性炭可使玻璃化率高达38.18%;琼脂和植物凝胶对芽的增殖及玻璃化发生表现相同的趋势,低浓度时有利于芽的增殖,高浓度可有效防止玻璃化发生,10 g/L的琼脂玻璃化率低至8.31%;2.0 g/L的植物凝胶芽增殖系数高达3.35,5.0 g/L植物凝胶玻璃化率低至6.67%;棉花塞+双层牛皮纸+棉线封口时,芽增殖系数高达3.24,玻璃化率低至8.46%。 相似文献
178.
179.
低温玻璃化保存理论在水产品贮藏中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
<正> 一、引言 低温保存是食品的最佳保存方法之一,但食品原料在冷加工、贮藏和运输过程中质量的下降仍无法避免。早在本世纪40年代起,食品科学家和工程师们就如何提高冻结食品的质量进行了不懈的努力,做过大量的研究,其中最有代表性的成果是T.T.T.概念的提出。80年代初,随着食品聚合物理论的提出,食品的低温保存研究进入了一个新纪元,到90年代就有1000多篇相关论文发表,而国内这方面的研究刚刚起步,食品玻璃化保存理论的核心思想是 相似文献
180.
采集黑白花奶牛胚胎29枚,选用22枚在乙二醇(EG)、二甲基亚砚(DMSO),添加4mg/mLBSA的D-PBS液,按1:1:2的混合溶液(VS1),以及在上述VS1和PBS-「PBS(+)+4mg/mLBSA」的1:1混合溶液(VS2)中,进行玻璃化冷冻,将冷冻解冷的13株黑白花奶牛胚胎移植于贵州本地受体黄牛,妊娠5头,受胎率38.5%,产出3头犊牛,产犊率23.1%;而采集鼠胚胎90枚,在体积 相似文献