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牛骨骼肌特异性启动子的筛选 总被引:1,自引:0,他引:1
分别构建含有牛骨骼肌α-肌动蛋白(α-actin)启动子、牛骨骼肌肌球蛋白轻链2(mylpf)启动子及牛肌酸激酶(ckm)启动子的荧光素酶报告基因表达质粒。将3种荧光素酶表达质粒分别与含有海肾荧光素酶的质粒共转染牛成肌细胞和牛成纤维细胞。经双荧光素酶检测得到转染成肌细胞,72 h后,α-actin启动子的表达量显著高于mylpf启动子和ckm启动子,转染成纤维细胞72 h后,这3种启动子的表达量和空载体相近。结果表明,α-actin启动子在成肌细胞中的表达效率高于mylpf启动子和ckm启动子;3种启动子在成纤维细胞中的表达量与空载体相近,证明了这3种启动子的骨骼肌特异性。通过对骨骼肌特异性启动子的研究,为外源基因在骨骼肌组织的特异性表达提供了试验依据,为进一步研究转基因肉牛奠定了基础。 相似文献
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破伤风又名"强直症",俗称"锁口风",是由破伤风梭菌经伤口感染后,产生外毒素而引起的一种急性、中毒性传染病,其特征是:骨骼肌持续性痉挛和对刺激反射兴奋性增高。猪在去势阉割后引起本病较为多见,采用西药治疗疗程长、成本高、疗效 相似文献
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猪胴体骨骼肌出血的情况在宰后检疫中较为常见,但是在兽医卫生检验中往往不够重视,尤其肉质不良或伴发传染病时易造成误诊、错判、处理不当。笔者仅就生猪宰后检疫中几种常见骨骼肌出血原因,检疫及处理作以介绍。1骨骼肌大小不匀的针尖状或淤斑状出血由于猪瘟病毒侵害机体,使血管内皮细胞肿胀,管壁脆弱,血液凝滞发生浆液性浸润变性,将血管阻塞,引起血管壁通透性结构改变而使通透性增加,红细胞从管壁内皮细胞之间的孔隙渗出,使全身肌肉、脏器出现大小不等的针尖状或淤斑状紫黑色出血。1.1检验鉴定瘠瘦的胴体,全身皮肤、脂肪、… 相似文献
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【目的】探索胎牛骨骼肌卫星细胞分离、培养、鉴定及基因转染的方法。【方法】分别采用Ⅰ型胶原酶消化、Ⅰ型胶原酶与胰蛋白酶二步消化及链霉蛋白酶消化法对胎牛骨骼肌卫星细胞进行培养,比较了3种不同分离方法所得细胞数及其存活率的差异;利用差速贴壁法和Percoll密度梯度离心相结合的方法纯化骨骼肌卫星细胞,对纯化后的细胞进行myostatin基因RT-PCR以及结蛋白(Desmin)免疫细胞化学染色鉴定,最后通过电转染法对纯化的骨骼肌卫星细胞进行EGFP基因转染研究。【结果】3种消化培养方法中,以链霉蛋白酶消化法分离得到的胎牛骨骼肌卫星细胞数显著高于其它2种方法(P0.05),但细胞存活率较低(P0.05);而采用Ⅰ型胶原酶与胰蛋白酶二步消化法可以得到相对较高的细胞数及存活率。利用差速贴壁和Percoll密度梯度离心相结合的方法可以得到纯化的骨骼肌卫星细胞;电转染法适用于骨骼肌卫星细胞的基因转染。【结论】建立了胎牛骨骼肌卫星细胞分离、培养、纯化、鉴定及基因转染的方法,为通过转基因方法改良秦川牛产肉性能研究奠定了基础。 相似文献
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本试验选取了miR-1、miR-133、miR-24、miR-122、miR-103、miR-143、let7 7个miRNAs,旨在对其表达量及靶基因表达谱进行分析.选用4只绒山羊的背部和后腿肌肉提取RNA,反转录后,利用SYBR荧光定量PCR来检测各miRNAs的表达量,并采用靶基因指纹图谱(MTFP)技术获得各miRNAs的靶基因表达谱.结果表明,miR-NA表达量依次为:miR-1> miR-133> miR-24> let7> miR-143> miR-103> miR-122,其中miR-1和miR-133表达规律相似,且这7个miRNAs在成羊中的表达量均高于羔羊;此外,miRNAs表达量的差异还受性别影响,且miR-NA表达量与靶基因个数及其表达量之间具有相关性.对5个miRNAs的10个靶基因测序并比对,表明靶基因分别编码与信号转导、细胞周期等相关的蛋白.通过这7个miRNAs与其靶基因表达的分析,揭示了肌肉发育相关miRNAs及脂肪发育相关miRNAs在绒山羊骨骼肌中的异同,有利于绒山羊肉质基因的研究. 相似文献
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