金丝猴源益生粪肠球菌dlt7a的发酵工艺     

白文妹  李雪梅  申立泉  石德时  杨敬元  姚辉  龙兴权  欧阳潮  肖运才 《华中农业大学学报》2017,36(5):74-80

从神农架金丝猴的粪便中分离出1株益生菌株dlt7a,经鉴定为粪肠球菌。为进一步提高发酵液中dlt7a的活菌数量,对菌株dlt7a的发酵工艺进行优化。通过单因素水平试验,确定dlt7a的最佳培养条件为装液量20%(50mL/250mL),接种量2%,培养基初始pH 6.5。设计Plackett-Burman(PB)试验和响应面试验,找出发酵培养基中影响dlt7a活菌数的主要成分是蔗糖、鱼粉和KH_2PO_4,并优化3种重要成分的含量,确定最优发酵培养基配方为:蔗糖2.55%,鱼粉2.63%,豆粕2.5%,酵母膏0.4%,CaCO_3 1.0%,KCl 0.1%,MgSO_4·7H_2O 0.1%,KH_2PO_4 0.014%。在此条件下培养dlt7a菌株,活菌数可达58.83×108cfu/mL,比优化前提高了46.53%。  相似文献   

Isolation，Identification and Antibiotics Resistance Analysis of Enterococcus from Yak     

XU Feng  ZHANG Huan-rong  LIANG Hua  ZHU Ming-xin  TANG Cheng 《中国畜牧兽医》2017,44(4):1203-1210

17 feces samples of yak which were collected in Hongyuan county were measured with Gram staining method and 16S rRNA molecular identification in this study.8 suspected Enterococcus were separate from feces samples by bacteria purification and PCR amplification with 1 500 bp specific band. 6Enterococcus faecalis and 2Enterococcus faecium were identified through 16S rRNA sequencing.The homology analysis of the strains revealed that the homology between Enterococcus faecalis and reference strains sequence were 99.7% to 100%,that of Enterococcus faecium and reference sequence were 98.2% to 99.2%,indicating that the yak Enterococcus was highly conserved in the process of genetic evolution.The drug sensitive test results showed that the isolated strains were highly resistance to aminoglycoside antibiotics.Enterococcus faecium 11-1-2 strain was not only 5 multi-resistant,but also showed resistence to vancomycin.Enterococcus faecalis strains was most 3 multi-resistant.The antibiotics resistance results revealed that the resistance of yak Enterococcus was serious and should be taken seriously.  相似文献   

牦牛源肠球菌的分离鉴定及耐药性分析     

徐凤  张焕容  梁华  诸明欣  汤承 《中国畜牧兽医》2017,44(4):1203-1210

试验结合革兰氏染色及16S rRNA分子鉴定,对分离自红原县的17份牦牛粪便样中的肠球菌进行鉴定。结果显示,通过细菌分离纯化及PCR扩增,从牦牛粪便样品中分离出8株疑似肠球菌,分离菌的扩增产物经凝胶电泳后均产生1 500 bp特异性条带。16S rRNA测序结果显示,8株疑似肠球菌中,6株为粪肠球菌,2株为屎肠球菌。同源性比对分析显示,粪肠球菌与参考序列同源性为99.7%~100.0%,屎肠球菌与参考序列同源性为98.2%~99.2%,说明牦牛源肠球菌在遗传进化过程中高度保守。运用K-B纸片法进行药敏试验,结果显示,分离株对氨基糖苷类抗生素耐受性较高,2株屎肠球菌中,11-1-2菌株表现为5重耐药,且该菌株耐万古霉素,粪肠球菌主要表现为3重耐药,药敏结果提示牦牛源肠球菌耐药较严重,应引起高度重视。  相似文献   

Research on Antimicrobial Resistance Characteristics of Enterococcus spp. from Companion Animals in Beijing     

CHEN Xia  ZHAO Xiaofei  BAI Xuemei  CHE Jie  ZHANG Yunfei  YUAN Min  LI Juan 《中国畜牧兽医》2007,47(12):4119-4126

In order to study the tolerance of Enterococcus spp.from companion animals to common antibiotics in Beijing,320 samples were collected from dogs and cats in a pet hospital in Beijing from May 2015 to January 2016.The strains were isolated by selective culture medium and identified by VITEK-2 Compact 60.The sensitivity test of 11 kinds of common antibiotics in 8 categories was carried out for the isolated and identified strains.At the same time,the high-level gentamicin and high-level streptomycin resistance test were carried out to analyze the drug resistance and multiple drug resistance of Enterococcus.A total of 318 strains of non repetitive enterococci with different colony morphology and biochemical characteristics were obtained.The isolation rates of Enterococcus faecalis (49.06%) and Enterococcus faecium (29.87%) were higher.The resistance rates of Enterococcus to high-level gentamicin and high-level streptomycin were 39.94% and 43.40%,respectively.The resistance rates to tetracycline (78.62%),erythromycin (67.30%) and quinoproptin dapfoptin (43.71%) were very high.All of them were sensitive to tigecycline,and the non-resistant rate to vancomycin and nitrofurantoin was also high (98.74%).Enterococcus tested showed different degrees of resistance to class 1 to class 7 antibiotics,and the multidrug resistance was common,and the multidrug resistance rate was as high as 57.23%.The number of resistant antibiotics was the highest (n=65).A total of 44 different drug resistance profiles were obtained.Among them,erythromycin-quinoptin-daptoptin-tetracycline-high level aminoglycoside resistant spectrum accounted for the highest proportion (45/318,14.15%).This study confirmed that Enterococcus spp.isolated from companion animals in Beijing was highly resistant to common antibiotics,and multidrug resistance was prevalent.Therefore,it was necessary to strengthen the monitoring of drug resistance.  相似文献   

微量环丙沙星对人源大肠杆菌和粪肠球菌体外敏感性的影响     

张可煜  王玉莲  胡丽霞  范盛先  袁宗辉 《畜牧兽医学报》2006,37(3):286-290

建立人离体肠道模拟模型，研究微量环丙沙星对人源肠道大肠杆菌和粪肠球菌敏感性的影响，进而用聚合酶链反应法扩增耐药菌的gyrA基因的耐药决定区，并分析其耐药机制。结果显示，大肠杆菌连续培养后存活菌株对微量环丙沙星耐药，此耐药菌对其他抗菌药敏感；粪肠球菌绎连续培养，对环丙沙星和其他抗菌药物仍敏感；耐药大肠杆菌的gyrA基因发生突变，248位碱基由C变为T，259位由G变为T，相应地，该基因编码的蛋白质在83位的丝氨酸和87位的天冬氨酸分别改变为亮氨酸和酪氨酸。研究表明，微量环丙沙星对人肠道菌群具有不同的选择作用，能诱导大肠杆菌产生耐药性。这为动物源食品中环丙沙星残留的安全性评价提供了试验依据。  相似文献   

猪源粪肠球菌的基因型及耐药性分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

董栋  商军 《中国兽药杂志》2015,49(2):13-17

为了解上海地区规模化猪场中粪肠球菌的耐药性和基因型,2013年3月-2014年5月从上海地区10个规模化养猪场收集到分离鉴定的粪肠球菌133株,采用微量肉汤稀释法对12种抗菌药物进行药敏试验,采用PCR技术分别检测分离株中β-内酰胺类抗生素耐药相关基因(TEM)、氨基糖苷类抗生素耐药相关基因[aac(6’)/aph(2")和aph(3’)-Ⅲ和ant(6)-Ⅰ]、四环素耐药相关基因(tetM)、红霉素耐药相关基因(ermB和mefA)和万古霉素耐药相关基因(vanA和vanB)。结果显示,在133株粪肠球菌中,耐药基因ermB、tetM、TEM、ant(6)-Ⅰ、aac(6’)/aph2"、aph(3’)-Ⅲ、vanA的检出率分别为:95.5%(127/133)、91.0%(121/133)、63.2%(84/133)、45.9%(61/133)、42.1%(56/133)、24.1%(32/133)、3.0%(4/133);未检出mefA和vanB基因的菌株。分离菌株对12种抗菌药物的耐药性较为严重,且以6~9耐为主要耐药株,占81.2%。试验表明,上海地区猪源粪肠球菌多重耐药现象严重,携带抗菌药物相关耐药基因是导致分离株耐药的主要原因。  相似文献   

动物源肠球菌对饲用抗菌促生长剂流行病学临界值的建立     

杨钰莹  王少林 《中国畜牧兽医》2022,49(7):2788-2795

【目的】建立动物源肠球菌对抗菌促生长剂的流行病学临界值,并基于此了解2019-2021年动物源肠球菌对饲用抗菌促生长剂的耐药情况。【方法】测定2019-2021年从北京、河北、四川、山西、陕西和内蒙古养殖场动物样本中分离得到的肠球菌对7种抗菌促生长剂（吉他霉素、黄霉素、恩拉霉素、那西肽、阿维拉霉素、维吉尼亚霉素和杆菌肽）的最小抑菌浓度（MIC）值。根据CLSI-VET中规定的方法,利用统计软件ECOFFinder对MIC分布数据进行非线性回归模拟,以95%置信区间下的流行病学临界值计算动物源肠球菌对7种抗菌促生长剂的耐药率。【结果】确定了动物源肠球菌对吉他霉素、黄霉素、恩拉霉素、那西肽、阿维拉霉素、维吉尼亚霉素和杆菌肽的流行病学临界值分别为8、8、8、0.25、8、8和32 μg/mL。由此计算的药物耐药率为64.38%、34.48%、80.06%、14.69%、19.06%、50.69%和24.96%,其中动物源肠球菌对恩拉霉素、吉他霉素和维吉尼亚霉素的耐药情况最为严重,而对那西肽最敏感。在2019-2021年的耐药率变化情况统计中,黄霉素和杆菌肽的耐药率下降趋势较为明显。【结论】本研究制定了动物源肠球菌对7种养殖业常用抗菌促生长剂的流行病学临界值,可作为动物源肠球菌对饲用抗菌促生长剂敏感和耐药的初步判定标准,为进一步制定耐药折点,监测动物源肠球菌对抗菌促生长剂的耐药情况变化提供数据基础和科学依据。  相似文献   

干酪乳杆菌和粪肠球菌对乳猪生长性能、免疫功能的影响     

朱孟玲  陈华  张超  曹沛宇 《中国饲料》2019,(10):55-58

文章旨在评价干酪乳杆菌和粪肠球菌对乳猪生长、免疫功能的影响。试验选取15头经产母猪(2~4胎),产仔后每窝各选取8只乳猪平均分配到4组,每组30头乳猪。对照组口服生理盐水,试验1、2组分别口服干酪乳杆菌、粪肠球菌,试验3组口服两者的混合菌液(3∶1),在出生后第7、14、21天各灌喂2 mL、3 mL、4 mL生理盐水或菌液。试验结果:相比于对照组,试验1、3组21日龄体重分别增加11.5%、13.4%(P<0.05),试验1、2、3组28日龄体重分别增加10.2%、9.2%、11.0%(P<0.05),ADG(21 d)分别增加16.7%、15.8%、17.6%(P<0.05),ADG(21~28 d)分别增加17.5%、19.3%、27.7%(P<0.05)。此外,相比于对照组,试验1、2、3组血清中IgA浓度分别升高99.2%、77.8%、121.7%(P<0.05),IgG浓度分别升高54.0%、69.9%、50.3%(P<0.05)。除此之外,试验1、2、3组腹泻率较对照组分别降低58.8%、52.5%、63.9%(P<0.05)。综上所述,干酪乳杆菌或粪肠球菌均能促进乳猪生长和免疫性能。  相似文献   

壳寡糖与屎肠球菌对肉仔鸡生长性能、免疫功能及肠道短链脂肪酸含量的影响     

《中国畜牧杂志》2019,(8)

本试验旨在探究饲粮中添加壳寡糖(COS)和鸡源屎肠球菌PNC01(PNC)对脂多糖(LPS)诱导的肉鸡炎症反应的调节作用。选取1日龄健康且体重相近的AA公雏560羽,采用2(LPS刺激/非LPS刺激)×2(添加COS/不添加COS)×2(添加PNC/不添加PNC)三因素试验设计,共8个处理,每处理7重复,每重复10只鸡,试验期21 d。采用玉米-豆粕型基础饲粮,试验饲粮分别在基础日粮基础上添加COS(200 mg/kg)和PNC(1×10~9 CFU/kg)。于试验第17、19、21天,刺激组腹腔注射LPS(1 mg/kg体重),对照组注射等量生理盐水。结果表明:LPS刺激降低肉鸡采食量(P<0.01),破坏肠道形态,降低盲肠食糜中丁酸含量和血清IgA水平(P<0.05),引起脾脏肿大,上调IL-1β和IL-8 mRNA表达(P<0.01);添加COS缓解LPS刺激肉鸡采食量的下降(P<0.05),提高盲肠丙酸和丁酸含量(P<0.05),COS降低脾脏指数和回肠IL-8mRNA表达量(P<0.05),有下调脾脏IL-1βmRNA表达的趋势(P<0.1);PNC可提高21 d肉鸡血清IgA含量(P<0.05),降低肉仔鸡脾脏指数(P<0.01);非LPS刺激时,同时添加COS和PNC可提高盲肠中乙酸含量(P<0.05)。可见,添加COS和PNC均能缓解LPS刺激导致的脾脏肿大,缓解炎症反应,改善LPS刺激对肉仔鸡的不利影响。  相似文献   

熊源粪肠球菌EfaA基因的原核表达     

楚熹橦  秦晓东  鲁承  孙福亮 《中国畜牧兽医》2018,45(1):71-76

试验旨在构建EfaA基因的原核表达质粒,并对其进行表达。根据GenBank中粪肠球菌EfaA基因序列（登录号：U03756）设计合成1对引物,利用PCR法扩增、克隆EfaA基因,并进行生物信息学分析,将EfaA基因亚克隆于pGEX-4T-1原核表达载体,构建pGEX-4T-EfaA原核表达质粒,转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞,用IPTG诱导表达,筛选最佳诱导时间并分析其表达蛋白的生物学特征。结果发现,试验成功获得大小为873 bp的粪肠球菌EfaA基因。经IPTG诱导后,获得分子质量约为59 ku的EfaA重组蛋白,以37℃、0.5 mmol/L IPTG诱导6 h表达量最大。经Western blotting分析发现,具有较好的反应原性。本试验成功构建原核表达质粒pGEX-4T-EfaA,并在大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞中成功表达。  相似文献