猪伪狂犬病病毒的分离鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘文峰  邓舜洲  戴益民  张文波  李裕 《江西农业大学学报》2007,29(6):879-883

通过鸡胚接种和鸡胚成纤维单层细胞培养相结合的方法从江西省某猪场死亡仔猪的脑、肺脏中分离到一株病毒。该病毒接种家兔48 h后开始表现不安,呈奇痒为特征的神经症状并死亡。病毒能在鸡胚绒毛尿囊膜上形成痘斑,在鸡胚成纤维细胞中增殖并使细胞出现病变、死亡。电镜观察到病毒粒子呈圆形,囊膜清晰可见,直径130~170 nm。根据已发表的伪狂犬病病毒(PRV)gE基因的序列,设计并合成了一对引物,采用PCR方法可扩增特异性953 pb DNA片段。证实分离的病毒株为伪狂犬病病毒,命名为伪狂犬病病毒GN0605株。  相似文献   

小鼠肝炎病毒RT-PCR检测方法的研究     

赖国旗  何明忠  谭毅  王胜  潘永全  韦克  何伏秋  蒋虹  佟巍  丛喆 《西南大学学报(自然科学版)》2004,26(6):762-763,772

用4株小鼠肝炎病毒(MHV1,MHV3,A59,JHM)分别感染DBT细胞,收获病毒,提取病毒RNA。根据病毒基因的特异性保守序列设计引物,在最佳务件下进行RT—PCR,建立了RT—PCR检测方法,即两步法和一步法,分别扩增出600bp,375bp的特异性核酸片段,其中,一步法检测MHV更快速、简便。  相似文献   

水稻条纹病毒云南分离物CP基因克隆及序列比较分析   总被引：3，自引：0，他引：3  

李凡  杨金广  吴祖建  林奇英  陈海如  谢联辉 《云南农业大学学报(自然科学版)》2006,21(1):48-51

 对采自云南保山、楚雄、石林和宜良等4地的水稻条纹叶枯病感病稻株,提取病叶总RNA,经RT-PCR扩增,获得4个RSV云南分离物的CP基因片段。序列测定表明,该片段长999 bp,其中CP基因由969个核苷酸组成,编码322个氨基酸。与其它已报道的RSV分离物CP基因进行同源性比较,发现我国RSV分离物可以划分为2个不同的组,大部分RSV云南分离物为一组,其它的RSV 分离物为另一组。以RSV-CXi分离物的CP与纤细病毒属的其它5种病毒的CP进行氨基酸同源性比较,结果表明RSV与MStV亲缘关系最近,而与RGSV亲缘关系最远。  相似文献   

日本南瓜果实发育与营养吸收的初步研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

郭勤平  毛玉荣  杨广东 《山西农业科学》2001,29(1):67-69

研究了日本南瓜从花后到商品成熟期直至老熟期果实发育过程中鲜重、干重、长度和横径以及干鲜重比的变化。结果表明 ,日本南瓜在生长膨大期 ,果实的鲜重与长度、横径变化趋势一致 ,开花后 9d内增长迅速 ,9d后增长速率减慢 ;干重和干鲜重比的变化表明 ,花后 6d干重增加较慢 ,6d后干重迅速增加 ,直至老熟期干重仍有增加。另外 ,对果实发育过程对N ,P ,K吸收特性进行了研究 ,结果表明 ,果实发育对N ,K吸收较多 ,对P吸收较少。  相似文献   

伪狂犬病毒PK/gG/GFP重组转移载体的构建和表达   总被引：1，自引：0，他引：1       下载免费PDF全文

罗满林  卜春玲  陈溥言  徐刚  刘镇明 《华南农业大学学报》2003,24(4):64-66,F003

在构建了含伪狂犬病毒(pseudorabies virus，PRV)湖北株部分PK基因和gG基因转移载体的基础上，利用平端连接的方法将绿色荧光蛋白(GFP)的基因表达盒插入到缺失的部分，并在下游引入了1个多克隆位点，构建了重组转移载体KGDF。用限制性内切酶鉴定重组转移载体KGDF。根据质粒EGFP-C1中的GFP基因序列设计1对引物鉴定GFP表达盒插入的正确性。用脂质体转染试剂盒将KGDF和PRVFIB的基因组或病毒共转染BHK-21细胞，在荧光显微镜下将出现病变的荧光斑挑出得到重组病毒。将重组病毒扩大培养后提取基因组鉴定重组病毒中的GFP基因，并通过挑取病变的荧光斑的方法纯化重组病毒。  相似文献   

家蚕生物反应器表达传染性法氏囊病病毒多聚蛋白的免疫原性研究   总被引：1，自引：0，他引：1       下载免费PDF全文

卢觅佳  于涟  谢荣辉  张朝政 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》2004,30(5):545-552

将传染性法氏囊病病毒(IBDV)浙江分离株JD1的多聚蛋白(VP2/4/3)基因克隆到家蚕杆状病毒转移载体pBacPAK8中,重组载体与杆状病毒Bm-BacPAK6的线性化基因组DNA共转染家蚕细胞后,将获得的重组病毒BacPAK-A感染家蚕5龄起幼虫进行虫体内表达.用感染后第5日的蚕血淋巴作抗原制备油佐剂苗免疫14日龄非免疫鸡,安全性试验表明,接种1倍和5倍免疫剂量的试验鸡在临床反应和剖检中均无异常变化;在免疫-攻毒试验中设杆状病毒表达的IBDV VP2蛋白和正常蚕血淋巴免疫对照组,并于28日龄加强免疫,25 d后用IBDV强毒BC6/85攻击.通过临床保护率、病理保护率及血清学试验表明,基于多聚蛋白制备的疫苗更成功地诱导了体液免疫应答,比VP2蛋白对IBDV强毒的攻击具有更高的保护力,更适于作为IBD基因工程亚单位疫苗的抗原成分.  相似文献   

抗番茄黄化卷叶病毒番茄新品种‘科大204’     

宋建军  艾鹏飞  李振侠  仇燕  李敏 《园艺学报》2011,38(2):399

 ‘科大204’ 番茄是以优良自交系‘TP025-2’为母本,‘869-1’为父本杂交育成的抗番茄黄化卷叶病毒的新品种。生长势强,无限生长类型,7 ~ 8片真叶着生第一花序。果实扁圆形,单果质量200 ~ 250 g,成熟果粉红色,中等硬度,口感好,品质优良。抗番茄黄化卷叶病毒,兼抗枯萎病、叶霉病和TMV。中早熟,平均产量121.8 t · hm-2,适宜北方保护地早春和秋延后栽培。  相似文献   

Vaccination strategies to conserve the endangered African wild dog (Lycaon pictus)     

K.C. Prager  R. Woodroffe  A. Cameron  D.T. Haydon 《Biological conservation》2011,(7):1940-1948

Pathogens such as rabies virus and canine distemper virus present a significant risk to the long-term survival of some endangered African wild dog (Lycaon pictus) populations. Vaccination of wild dogs is one approach that might reduce population extinction risks; however clear guidelines for how best to do this are lacking. Hence, we developed a mathematical model of wild dog population dynamics that integrates a pathogen transmission model and a vaccination process. Simulations indicated that the most effective vaccination strategy includes all age classes (when pups are 2-months old), prioritizes the breeding pair, and vaccinates at least 4 animals per pack included in the vaccination effort. In addition, populations for which an Allee effect, high rates of pathogen introduction, or low rates of recovery and immunity were simulated, required greater vaccination coverage (dogs/pack), to protect an equivalent number of packs compared to populations for which no Allee effect, low rates of pathogen introduction, or high rates of recovery and immunity were simulated. For populations in which some packs (high-risk) have a greater risk of pathogen exposure than others (low-risk), vaccinating both high- and low-risk packs, or only low-risk packs, is more effective than vaccinating only high-risk packs when pathogen introduction rates are high. Finally, model results suggest that vaccination of wild dog populations against pathogens, such as canine distemper virus, that do not cause 100% mortality and against which some wild dogs develop acquired immunity, may be unnecessary.  相似文献   

番茄不孕病毒BJ株系基因组测定与侵染性克隆   总被引：1，自引：0，他引：1  

施伟  金圣塔  张海峰  王婷  陈集双  廖乾生 《农业生物技术学报》2011,19(6)

番茄不孕病毒(Tomato aspermy virus,TAV)可侵染包括藜科(Chenopodiaceae)、茄科(Solanaceae)等在内的24个双子叶家族和3个单子叶家族的100多种植物,是具有重要经济价值的植物病毒之一.为研究TAV BJ株系(Tomato aspermy virus,TAV-BJ)的基因组功能,本实验对TAV-BJ基因组克隆测序,并构建侵染性克隆.以TAV-BJ侵染心叶烟(ic otiana glutinosa)的总RNA为模板,RT-PCR获得其RNA2和RNA3;以TAV-BJ的dsRNA为模板,RT-PCR获得全长RNA1,目的片段PCR产物克隆测序获得TAV-BJ基因组全序列信息.RNA1全长3 409 nt,编码994个氨基酸的1a蛋白;RNA2全长3 023 nt,含2个开放阅读框(open reading frame,ORF),2a ORF编码829个氨基酸的2a蛋白,2b ORF编码78个氨基酸的2b蛋白;RNA3全长为2 216 nt,包含2个ORF,3a ORF编码247个氨基酸的3a蛋白,外壳蛋白(coat protein,CP)ORF 编码219个氨基酸的CP蛋白(TAV-BJ基因组RNA1、2和3 GenBank登录号分别为HQ424163,HQ424164和HQ424165).TAV-BJ基因组cDNA克隆体外转录成RNA并接种于心叶烟上,结果表明转录产物在寄主上的症状反应和TAV-BJ病毒粒子RNA的接种相一致,TAV-BJ基因组cDNA侵染性克隆具有活性.由TAV-BJ各个基因片段与缺失2b基因的黄瓜花叶病毒Fny株系(Cucumber mosaic virus,CMV-Fny△2b)构建的假重组病毒接种于心叶烟,结果显示TAV-BJ的RNA2和RNA3能恢复CMV-Fny△2b在寄主上症状反应.嵌合型RNA3F3aTcp和RNA3T3aFcp的症状反应结果表明,F1F2△2bRNA3 T3aFcp在寄主上产生花叶症状与F1 F2△2bT3相一致.本研究获得TAV-BJ的基因组序列,成功构建侵染性克隆,同时发现TAV-BJ的3a基因具有CMV-Fny的2b基因的某些功能.  相似文献   

体内外感染PRRSV处理下仔猪脾淋巴细胞增殖活性的变化     

廖素环  韦英益  廖承球  李爱友  黄伟坚 《广西农业生物科学》2011,30(4):288-293

为了探讨体内或体外感染猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndromevirus,PRRSV）的仔猪脾淋巴细胞在体外培养的增殖能力,本研究将PRRSV—GXA分离株经Mare-145细胞大量增殖培养,然后体内感染仔猪,接种病毒后分别于第11天、第14天和第21天从活体猪收获脾脏,分离脾淋巴细胞后用ConA和LPS于体外进行诱导增殖。研究结果显示第11天收获的T淋巴细胞增殖能力高于对照组,而B淋巴细胞增殖能力明显下降;第14天收获的T淋巴细胞和B淋巴细胞的增殖能力均极显著低于对照组;第21天收获的B淋巴细胞增殖能力略高于对照组,T淋巴细胞增殖能力略低于对照组。同时,用不同滴度的PRRSV体外感染PRRSV阴性的猪脾淋巴细胞,经ConA和LPS诱导增殖后,发现病毒滴度在10^3-10^6TCID50/mL范围内,能明显提高脾淋巴细胞的体外增殖能力;而病毒滴度在10^0-10^2TCID50/mL范围时,脾淋巴细胞增殖能力低于对照组。本研究结果说明PRRSV体内或体外感染对仔猪脾淋巴细胞增殖活性均有显著的影响,将为临床上PRRS的综合防治提供理论依据。  相似文献