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101.
102.
103.
104.
为建立适用于羊源多杀性巴氏杆菌的重组酶聚合酶扩增(RPA)诊断方法,本研究依据前期测序鉴定的羊源多杀性巴氏杆菌KMT1基因序列构建pET-28a (+)-KMT1质粒标准品。设计基于RPA技术的特异性引物及RPA荧光探针,建立实时荧光RPA方法的最适反应体系。采用10倍梯度连续稀释的质粒标准品检测该RPA方法的敏感性并绘制相关性曲线;以10种不同菌株的基因组DNA为模板验证方法的特异性;用感染多杀性巴氏杆菌的山羊及小鼠组织样品对方法的可靠性进行验证。结果显示,本试验建立的实时荧光RPA方法最适反应温度为39 ℃,最佳引物为KMT1-Fe1,灵敏度达100拷贝/μL,检测下限为10拷贝/μL。与大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、副伤寒沙门氏菌、副溶血弧菌、绿脓杆菌、产酸克雷伯菌、布鲁氏菌S2株和鲍曼不动杆菌均无交叉反应。对13个组织样本进行检测,阳性率为76.9%,与实时荧光定量PCR检测结果的符合率达92.3%。综上所述,本研究建立的羊源多杀性巴氏杆菌实时荧光RPA方法具有特异性强、灵敏度高、可靠、快速便捷等特点,适用于多杀性巴氏杆菌的临床分子诊断。 相似文献
105.
禽多杀性巴氏杆菌感染对麻保沙星在鸡体内药动学特征的影响研究 总被引:6,自引:2,他引:4
按每kg体重30万个CFU在鸡胸部肌肉注射接种禽多杀性巴氏杆菌(C48-1),人工诱发鸡急性多杀性巴氏杆菌病。选用90只51-61日龄健康未经多杀性巴氏杆菌苗免疫的岭南黄鸡,18只用作病理模型研究,其余72只随机分为6组,进行静注、肌注及内服麻保沙星(2.5mg/kg)在健康和禽多杀性巴氏杆菌感染鸡的药物动力学研究。用反相高效液相色谱法测定血浆中麻保沙星的浓度。用MCPKP药物动力学程序处理血浆药物浓度-时间数据。麻保沙星在鸡体内的药动学特征是吸收迅速且安全、分布广泛、消除缓慢。急性禽多杀性巴氏杆菌感染除显著延长了肌注及内服麻保沙星的消除并衰期、血药有效浓度维持时间和降低肌注给药的峰浓度外,对其他药动学参数无显著性差异的影响。 相似文献
106.
107.
鹅巴氏杆菌病病原分离鉴定及中西药联用抑菌试验 总被引:1,自引:0,他引:1
应用常规分离鉴定技术,对湛江市某养鹅场的病鹅进行病原分离与鉴定,采用水提法制备中药药液,通过试管二倍稀释法测定各中药药液和抗菌药对病原菌的最小抑菌浓度(MIC)及最小杀菌浓度(MBC),同时测定中药与西药联用对病原菌的体外抑菌效果。结果表明,分离的病原菌符合巴氏杆菌的生化特性;中药与西药联用抑菌和杀菌能力均大于或等于单药,恩诺沙星与五倍子联用,恩诺沙星用量为单药的1/4、五倍子用量为单药的1/8即可抑制巴氏杆菌;酒石酸泰乐菌素与夏枯草联用,酒石酸泰乐菌素用量为单药的1/16、夏枯草用量为单药的1/4即可抑菌;酒石酸泰乐菌素与五倍子联合,酒石酸泰乐菌素用量为单药的1/4即能杀菌。 相似文献
108.
鲁承 《延边大学农学学报》2001,23(2):92-97
通过一次实验同时检出传染性萎缩性鼻炎的病原体支气管败血波氏杆菌和毒素源性多杀性巴氏杆菌,PCR扩增后DNA产物为237bp,为检出毒素源性败血波氏杆菌toxA gene而设计的引物位于toxA内部的碱基序列,扩增后的DNA产物为338bp.Multiplex PCR可检出败血波氏杆菌模板DNA至0.1ng,毒素源性多杀性巴氏杆菌模板至0.1ng,从表现呼吸症状的7个养猪场的100-120日龄肥育猪采取的鼻腔棉拭子中检出支气管败血波氏菌46例(85.2%),毒素源性多杀性巴氏杆菌8例(14.8%),同时检出上述两种病原体的为8例(14.8%)。 相似文献
109.
R Jamaludin PJ Blackall MF Hansen S Humphrey M Styles 《New Zealand veterinary journal》2013,61(3):203-207
AIMS: To examine pigs at slaughter in New Zealand for the presence of Pasteurella multocida, and to determine for isolates, their biochemical profiles, somatic and capsular types, and the presence or absence of the HSB and toxA genes, associated with haemorrhagic septicaemia (HS) and progressive atrophic rhinitis (PAR), respectively. METHODS: Swabs from 173 lungs, 158 palatine tonsils and 82 nasal passages of pigs at two abattoirs in New Zealand were cultured for P. multocida using conventional techniques, and isolated colonies were subjected to biochemical tests for identification of biovars. Somatic serotyping was conducted using an agar gel immunodiffusion (AGID) test. Polymerase chain reaction (PCR) assays were used to confirm phenotypic identification of colonies using species-specific primers, capsule type using serogroup-specific primers and multiplex PCR, and to test for the presence of HSB and toxA genes. RESULTS: Pasteurella multocida was isolated from 11/173 (6.4%) lung, 32/158 (20.2%) palatine tonsil and 5/82 (6.1 %) nasal swab samples, a total of 48 isolates from 413 samples (11.6%). Isolation rates per farm ranged from 1–53% of tissue samples collected from pigs 5–6 months of age. On phenotypic characterisation, isolates were allocated to seven main biovars, viz 1, 2, 3, 5, 9, 12, and a dulcitol-negative variant of Biovar 8, the majority (30/48) being Biovar 3. Of the 42 isolates for which somatic serotyping was conducted, 10% were Serovar 1, 79% were Serovar 3, 2% were Serovar 6,1, 2% were Serovar 12, and 7% could not be typed. All 48 isolates were confirned as P. multocida using a species-specific PCR. In the capsular multiplex PCR, 92% of isolates were Capsular (Cap) type A, 2% were Cap D, and 6% could not be typed. None of the samples were positive for the HSB or toxA genes. CONCLUSION: Serovars or capsular types of P. multocida associated with HS or PAR in pigs were not detected. Establishment of species-specific, capsular and toxin PCR assays allowed the rapid screening of isolates of P. multocida, while serotyping provided an additional tool for epidemiological and tracing purposes. 相似文献
110.
旨在阐明贵州某规模化鸭场临床疑似鸭霍乱的病原菌耐药性及毒力特征,通过细菌的分离鉴定、多位点序列分型(MLST)、ERIC-PCR同源性分析、药敏试验、动物回归试验、细菌全基因组测序以及基因组局部比较分析对分离株进行系统研究。结果显示,分离得到5株鸭源多杀性巴氏杆菌(PmCW1~5),均为A:L1 ST128型且同源性较高;分离株均对氨苄西林、阿莫西林、左氧氟沙星和林可霉素4种药物耐药,其中PmCW1还对环丙沙星低水平耐药;对强毒株PmCW1的全基因组数据分析显示,PmCW1中存在β-内酰胺类、喹诺酮类、四环素类、大环内酯类和多肽类等耐药基因,同时存在多药外排泵及多药耐药蛋白基因,耐药表型与耐药基因检测结果基本相符;PmCW1中存在的毒力基因总数为201个,主要是脂寡糖/脂多糖(LOS/LPS)、荚膜、黏附因子等编码基因;此外,还检测到IV型菌毛基因(ptfA、comE、hofB、hofC、vfr)、铁摄取相关蛋白基因(ccmABCEF、hgbBC、fur、hscB等)以及部分外膜蛋白基因(ompP5等)等;PmCW1具有典型的A:L1型多杀性巴氏杆菌的特征。综上表明,本研究分离得到的ST128型鸭源多杀性巴氏杆菌目前鲜有报道,对其耐药性及毒力的研究可为鸭霍乱的临床用药及疫苗研发提供理论依据。 相似文献