猪的胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌和副猪嗜血杆菌复合PCR检测方法的建立   总被引：9，自引：0，他引：9  

米丰泉  陈小玲  王翠敏  赵玉军  王凤强 《动物医学进展》2005,26(5):85-88

在已经建立猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)、猪多杀性巴氏杆菌(PM)、副猪嗜血杆菌(HPS)的单项PCR诊断方法的基础上,通过对扩增条件的优化,成功地建立了APP、PM、HPS的复合PCR实验室诊断方法,利用一次PCR反应,即可同时扩增出APP的342bp、PM的457bp和HPS的821bp的特异性片段。该复合PCR能同时检测到100个每种细菌或50pg的APP或HPS的DNA和500pg的PM的DNA。该三重复合PCR的敏感性同已报道的单PCR一致。该方法的建立对临床上进行这3种疾病的鉴别诊断和混合感染的检测都具有重要意义。  相似文献   

多杀性巴氏杆菌检测、鉴定和分型研究进展   总被引：2，自引：0，他引：2  

高明燕  徐步  赵宝华  范建华  龚建森  刘学贤 《动物医学进展》2010,31(1):67-72

多杀性巴氏杆菌(Pm)可以引起多种畜禽疾病,给养殖业造成巨大的经济损失。为了系统的了解Pm检测、鉴定和分型技术的发展,论文主要对Pm的分类地位、鉴定和分型的传统方法以及分子生物学方法,诸如种特异性PCR、荚膜分型PCR、产毒素Pm的PCR鉴定、16 S rRNA基因测序法、DNA杂交、大分子图谱、限制性酶切分析和核糖体分型、随机扩增DNA片段多态性、脉冲场凝胶电泳及其他各种基因分型技术等进行了综述。  相似文献   

应用16S rRNA基因测序法鉴定禽多杀性巴氏杆菌的研究   总被引：4，自引：0，他引：4  

管宇  沈志强  刘吉山  庞万勇  王燕  莫玲 《中国预防兽医学报》2003,25(5):349-352

应用 16SrRNA基因测序法对以疫苗标准强毒株C4 8_1和弱毒疫苗代表株G190E4 0为阳性对照株和分离鉴定的 2株禽源多杀性巴氏杆菌Chicken/guangxi/ 2 0 0 0_1、Chicken/guangdong / 2 0 0 2_1株 ,进行 16SrRNA基因序列分析。结果表明 ,2株分离菌与对照的强弱毒株之间的同源性为 10 0 %。后经Blastn分析Chicken/guangxi/ 2 0 0 0_1、Chicken/guangdong /2 0 0 2_1、C4 8_1、G190E4 0株与已发表 11株多杀性巴氏杆菌同源性高达 10 0 % ,与已发表的 34株多杀性巴氏杆菌同源性均超过 98% ,同时与其它巴氏杆菌种如溶血巴氏杆菌等同源性均低于 96 % ,进一步证实Chicken/guangxi/ 2 0 0 0_1、Chicken/guangdong / 2 0 0 2_1分离株均为多杀性巴氏杆菌。生化实验鉴定表明Chicken/guangxi/ 2 0 0 0_1、Chicken/guangdong / 2 0 0 2_1、C4 8_1、G190E4 0菌株均为subsp .Multocida亚种。  相似文献   

免疫酶组化法对病料中多杀性巴氏杆菌定型的研究     

张以芳 《云南农业大学学报(自然科学版)》1992,(3)

本文采用自制的 B、A、D、E 定型酶抗体及由其组成的全价酶标抗体,以免疫酶直接法染色检查了20株多杀性巴氏杆菌及10株其它对照细菌感染致死小鼠脏器标本触片.并与脏器标本触片的免疫酶间接法染色,常规染色法及细菌分离培养鉴定等方法作了比较.建立了多杀性巴氏杆菌诊断和定型的一种特异快速的方法.  相似文献   

Diagnosis and Treatment of Serotype A Pasteurella multocida Infection in a Dairy Farm     

XIE Qian-ru  TONG Sheng-tao  SHAO Yong-xuan  JIANG Peng  PENG Qing-jie  CHEN Ying-yu  HU Chang-min  GUO Ai-zhen 《中国畜牧兽医》2016,43(3):837-843

The assay was aimed to clarify the reasons why dairy cattle became ill with the symptoms including fever,breathing difficulty,salivation and subcutaneous emphysema at neck or chest in a dairy cow farm at Hubei province,even part of dairy cows were dead for exhaustion.The disease was diagnosed by laboratory methods,and treatment scheme was proposed.The samples from heart,liver,lung or trachea tissues were collected,then M.bovis and pathogenic bacteria were isolated,respectively.Biochemical characteristics,pathogenicity test and drug sensitivity analysis were performed on the isolated pathogenic bacteria.RNA was extracted from bovine serum,then bovine ephemeral fever virus was identified by RT-PCR.The results showed that nothing grew in PPLO medium,and the isolated bacteria could form indole,but did not ferment glycogen and inositol in the biochemical tests.The isolated pathogenic bacteria was conformed as serotype A P.multocida by PCR while bovine ephemeral fever virus of RT-PCR result was negative.The pathogen could kill mice and the pathogenic bacteria could be isolated from heart blood of the dead mice in pathogenicity test.The isolated bacteria was sensitive to cefoperazone or levofloxacin in drug sensitivity analysis.In conclusion,the disease was diagnosed as bovine serotype A P.multocida infection.Some treatments including choosing sensitive antibiotic drugs based on the drug sensitivity tests,holding sick cattle under quarantine treatment and isolating suspected cattle should be taken.Moreover,some complex measures such as keeping the air flowing,cleaning up in time,improving the management,and preventing stress from congestion,cold and long distance transport were very important to prevent and control serotype A P.multocida infection in dairy cows.  相似文献   

禽多杀性巴氏杆菌C48-1株omp基因克隆及序列分析     

陈红梅  施少华  程龙飞  傅光华  彭春香  黄瑜 《福建农业学报》2008,23(4)

根据Genbank中禽多杀性巴氏杆菌的omp（outer membrane protein）基因核苷酸序列设计1对特异性引物,应用PCR方法扩增出禽多杀性巴氏杆菌（5∶A）C48-1株的omp基因全长片段,与克隆载体pmD18-T连接后,转化感受态细胞,对经PCR鉴定和酶切鉴定均为阳性的克隆进行测序。结果表明omp基因全长2 376bp,编码791个氨基酸。序列分析表明该菌株与PBA100株、P52株、EU570212、PM70株核苷酸同源性为48.7%～98.6%,氨基酸同源性为34.8%～99.0%。  相似文献   

3株不同毒力巴氏杆菌外膜蛋白H基因克隆及序列分析     

陈小云  邓永  张敏  康凯 《江西农业大学学报》2009,31(1)

参照GenBank中巴氏杆菌外膜蛋白H(ompH)基因核苷酸序列,设计了一对特异性引物,通过PCR方法,扩增了3株不同毒力猪源巴氏杆菌CA4-1株、679-230株、3397A株ompH全基因.PCR产物克隆至pMD18T载体,进行序列分析,发现3个菌株ompH基因完整的ORF大小分别为1008 bp、1008 bp和1047 bp,分别编码336、336、349个氨基酸,它们的前20个氨基酸均组成信号肽.与已知的15个Heddleston血清型的核苷酸及其推导的氨基酸序列比较,核苷酸同源性在83.3%～99.8%,氨基酸同源性在79.2%～99.4%.序列分析结果表明,ompH基因在不同血清型之间具有较高的同源性.  相似文献   

牛源多杀性巴氏杆菌Oma87基因的分子特征、抗原性及遗传进化分析     

张星星  黄新  何延华  何立雄  韩猛立  张倩  吴桐忠  钟发刚 《中国畜牧兽医》2020,47(7):2200-2206

为研究牛源多杀性巴氏杆菌（Pasteurella multocida，Pm）Oma87基因的分子特征及同源性，本研究对荚膜血清A型（capsular serotype A，Pm8）Oma87基因进行扩增、克隆和测序，利用在线软件对其进行分子特征、抗原性及遗传进化分析。结果显示，Oma87基因全长为2 376 bp，编码791个氨基酸；氨基酸序列分析发现，该蛋白为酸性的亲水性蛋白，稳定性高，具有信号肽结构但不存在跨膜区域；二、三级结构分析发现，该蛋白为无规则卷曲及多段延伸链所形成的"N"字型三维立体结构。遗传进化分析显示，新疆分离株Pm8 Oma87基因与其他不同地域的牛源A型Pm和部分猪源A型Pm的同源性较近，与其他型Pm的同源性较远；通过VaxiJen软件分析发现，Oma87蛋白的保护性抗原的总体预测值为0.5478，高于正常阈值0.4，证明Oma87蛋白可作为免疫原性蛋白，为进一步研究Oma87蛋白奠定了理论基础。  相似文献   

猪多杀性巴氏杆菌病活疫苗（EO630株）生产用合成培养基的研究     

崔水保 《中国兽药杂志》2014,48(5):22-24

为便于猪多杀性巴氏杆菌病活疫苗（E0630株）质量控制和降低生产成本,研制了ZJ-1和ZJ-2两种合成培养基,并进行了两种合成培养基与马丁肉汤的比较试验。结果表明,合成培养基ZJ-1培养活菌数高于ZJ-2和马丁肉汤。用合成培养基ZJ-1培养制备3批疫苗,并分别用兔进行安全检验和小鼠效力检验。3批疫苗对兔均2／2健活,对小鼠的保护力分别为9／10、9110、8／10,符合产品质量标准。本试验表明,运用合成培养基替代传统培养基是可行的。  相似文献   

禽多杀性巴氏杆菌、H9亚型禽流感二联灭活疫苗研制及免疫效力试验     

张敬峰  李银  韩凯凯  刘宇卓  赵冬敏  黄欣梅  游园  周小波  谢星星 《江西农业学报》2012,(10):127-129

采用鸡胚共同增殖禽多杀性巴氏杆菌和H9亚型禽流感病毒的方法制备的抗原中含巴氏杆菌数≥4×1010CFU/mL、H9亚型禽流感病毒含量≥109.38EID50/mL,经灭活后制备3批二联灭活疫苗并进行了相关检验。结果表明,所研制的3批二联疫苗的物理性状、无菌检验以及安全检验均符合相关质量标准;用3批疫苗分别免疫试验鸡和试验鸭,21 d后对禽多杀性巴氏杆菌免疫保护率均为90%以上,对H9亚型禽流感免疫保护率均为85%以上。  相似文献