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101.
PCR结合分子杂交法检测鸡传染性支气管炎病毒 总被引：6，自引：2，他引：4
利用逆转录－ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）特异性扩增鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）基因组中Ｍ基因和Ｎ基因之间一段核酸片段。以ｐＵＣ１９质粒载体将此片段克隆，用ＥｃｏＲＩ和ＨｉｎｄⅢ酶切此重组质粒，回收克隆片段后，制成生物素标记的核酸探针。用ＲＴ－ＰＣＲ及生物素核酸探针法分别对ＩＢＶ，ＩＢＤＶ，ＩＬＴＶ，ＭＤＶ及ＮＤＶ进行检测，结果证明该方法为ＩＢＶ特异性检测方法。对人工感染ＩＢＶ的ＳＰＦ鸡口腔棉拭样品进行跟踪检测，证明本方法能在ＳＰＦ鸡接毒后１～１０ｄ内检出ＩＢＶ。 相似文献
102.
用亚硫酸氢钠—乙二胺溶液对B组轮状病毒的ssRNA胞嘧啶修饰和转氨基作用，与生物素e—氨基己酸N—羟基琥珀酰亚胺酯反应，制备探针与样品在硝酸纤维膜上进行点杂交，经亲合素—碱性磷酸酶系统显色，可测出106.25－212.5pg的RNA靶序列，特异性试验表明：B组生物素探针只能与B组核酸杂交，而与无关核酸无杂交信号，用B组探针检测45份仔猪腹泻粪样，检出B组阳性5份，检出率11．1％，明显高于PAGE法，实验结果表明，生物素核酸探针制备简单并且有特异、灵敏、稳定的优点，可用于各组轮状病毒的检测。 相似文献
103.
104.
105.
106.
荧光探针双乙锭、苯胺基萘-8-磺酸镁盐和溴化乙锭对家蚕和柞蚕DNA和RNA的燐光均有猝灭作用。其中溴化乙锭对燐光的猝灭作用最强,双乙锭次之,ANS(苯胺基萘-8-磺酸镁盐)的猝灭作用最小。 相似文献
107.
HRP直接标记属特异性基因探针检测沙门氏菌的研究 总被引：2，自引：2，他引：0
以活化辣根过氧化物酶复合物（ＨＲＰ—ＰＢＱ—ＰＥＩ＋—ＮＨ３＋）直接标记沙门氏菌属特异性ＤＮＡ探针ｐＬＳ２和ｐＬＳ３，探针与靶ＤＮＡ杂交后催化发光底物，经增强型化学发光反应（ＥＣＬ），用普通Ｘ光胶片自显影（ＣＰＤ）检测沙门氏菌。经狭缝杂交（Ｓｌｏｔｂｌｏｔ），该法标记探针均可检测到０．１ｐｇ的纯质粒ＤＮＡ及１０３个未经培养的鼠伤寒沙门氏菌。Ｄｏｔ—ｂｌｏｔ杂交结果证明，ＨＲＰ标记的探针仅与沙门氏菌属细菌杂交，而与试验的其他肠道非沙门氏菌不杂交。本研究表明，ＨＲＰ直接标记基因探针化学发光自显影法检测沙门氏菌，安全、快速、简便，且有高度的敏感性和特异性，是一种有较大应用前景的非放射性标记探针杂交检测方法。 相似文献
108.
109.
席与烈 《华南农业大学学报》1987,(4)
单链模板DNA的制备是基因定序和作杂交探针的基本技术。核酸的定序研究原先只在动物和微生物方面进行。近来在植物的分子遗传研究也开始重视起来。烟草核DNA经噬菌体M13mp9作为克隆载体从细胞释放时含单链DNA,单链只与克隆的DNA两条互辅链之一同源。含大肠杆菌lac操纵子的片段,在感染的细胞中产生β—半乳糖苷酶氨基 相似文献
110.