棉铃虫作供试虫的苏云金杆菌制剂毒力生物测定的研究   总被引：19，自引：0，他引：19  

钟连胜  谢天健  吴继星  黄炳高  尚秀萍  张汉珍 《中国生物防治》1990,(Z1)

本研究采用棉铃虫初孵幼虫为试虫,结果表明:初孵幼虫个体间差异小,测定结果准确性高;36℃下培养48小时,其药剂浓度与供试虫死亡相关系数皆在0.9以上。测定周期仅需2天;供试虫数40头以上,结果重复性好;利用本测定技术,检测100多批试验样品和产品,结果准确可靠,变异系数在20％以下。  相似文献   

高致病性蓝耳病纯化灭活疫苗的研制(英文)     

唐艳林  ;宋睿  ;李静姬  ;苗丽娟  ;何玉友 《农业科学与技术》2014,(6):937-941

[目的]改进和提高现行高致病性蓝耳病(HR-PRRS)灭活疫苗的纯度和效价。[方法]该研究将经Marc-145细胞培养收获的HP-PRRS病毒原液超滤浓缩50倍,灭活后用Sepharose 4 Fast Flow分子筛柱层析,收集完整的病毒粒子,加油佐剂制成纯化HP-PRRS灭活疫苗。[结果]通过纯化可将HP-PRRS病毒与非病毒蛋白分开,纯化后测定病毒蛋白含量收率为76.7%~82.4%,杂蛋白含量去除率均为96%以上,且纯化疫苗的攻毒保护率达到4/5以上,血清抗体检测阳转率达86%以上,均高于未纯化灭活疫苗,差异显著。[结论]HR-PRRS病毒液经浓缩纯化制成疫苗后,增强了免疫效果,并可有效地去除杂蛋白,避免了疫苗的过敏反应和应激反应。  相似文献   

Increased Anti-oxidative Potency of Garlic by Spontaneous Short-term Fermentation     

Sato E  Kohno M  Hamano H  Niwano Y 《Plant foods for human nutrition (Dordrecht, Netherlands)》2006,61(4):157-160

Fundamental anti-oxidative properties of 80% ethanol extract from garlic fermented for the relatively short period of time (40 days at 60–70°C, 85–95% relative humidity) were examined. Superoxide dismutase (SOD)-like activity, scavenging activity against hydrogen peroxide and the polyphenol content of the garlic extract were increased 13-folds, more than 10-folds, and 7-folds, respectively, as compared with those of the control garlic extract. The results indicate that relatively short-term spontaneous fermentation potentiates anti-oxidative properties of garlic in fresh form, which is, at least in part, attributable to the increased level of polyphenols. Since superoxide is the primary upstream radical of the chain reaction with reactive oxygen species and hydrogen peroxide is generated from the scavenging reaction by SOD, the fermented- garlic is suggested to possess desirable anti-oxidative properties.  相似文献   

微生物浊度法测定3种兽用抗生素效价的研究     

高延玲 《中国兽药杂志》2009,43(6):18-21

分别以金黄色葡萄球菌和大肠杆菌为试验菌,抗生素检定培养基Ⅲ号为试验用培养基,制成菌悬液。将硫酸安普霉素、泰乐菌素、硫酸黏菌素稀释成不同的浓度加入菌悬液中,37℃培养3～4h,确立浓度的对数值与相对应的吸光度呈直线相关的线性范围,并对所建立的浊度法进行准确度、精密度、浊度法与管碟法比较及专属性等验证。结果表明硫酸安普霉素、泰乐菌素、硫酸黏菌素的线性浓度范围分别为2．9—7．2、0．6～2．0、44．9～93．2u／mL,相关系数r分别为0．9974、0．9984、0。9978。硫酸安普霉素、泰乐菌素、硫酸黏菌素所建立的浊度法平均回收率及平均可信限率分别为99．82％,2．48％、99．66％,2．80％、99．61％,7．62％。管碟法与浊度法所测结果无显著差异。硫酸安普霉素和泰乐菌素浊度法具有可信限率低、灵敏度高、精密度高、快速等优点;硫酸黏菌素建立的浊度法可信限率与管碟法接近。  相似文献   

乙型脑炎病毒E蛋白抗原优势区域的鉴定     

闫丽萍  华荣虹  亓文宝  周艳君  李国新  于海  姜一峰  童光志 《中国兽医寄生虫病》2009,17(3):8-13

流行性乙型脑炎（Japanese Encephalitis,JE）是一种人与动物共患的虫媒病毒性疾病,严重危害着人畜的健康。E蛋白是乙型脑炎病毒（Japanese Encephalitis Virus,JEV）的主要结构蛋白,在病毒的吸附、融合、血凝、细胞趋向性、病毒毒力和诱导保护性免疫反应中起重要作用。为了确定该蛋白的抗原优势区域,本研究设计了3对引物,将E蛋白分成3个大段,分别是EF1（1～291aa）、EF2（292～402aa）和EF3（403-500aa）,又将EF1分成4个相互重叠的小片段,分别是EF1-1（1～88aa）、EF1—2（68～155aa）、EF1—3（129～222aa）和EF1—4（202～291aa）,将以上基因片段分别克隆到原核表达载体进行GST融合表达。SDS-PAGE电泳鉴定各融合蛋白均获得表达,各表达产物以包涵体的形式存在。通过Western blot分析表明融合蛋白GST-EF1、GST—EF2、GST—EF1—1、GST-EF1-2、GST—EF1—3和GST—EF1～4均能被阳性血清识别。通过ELISA鉴定,GST-EF2反应性最强,GST-EF1反应性比GST-EF2稍弱,而GST-EF3反应性最弱,GST-EF1-1、GST-EF1—2、GST-EF1—3和GST—EF1—4片段融合蛋白反应性与GST—EF1相似。由此本研究鉴定出1-402aa是E蛋白的抗原优势区域,在此区域内包括了12个Cys的保守区及域Ⅰ、域Ⅱ和域Ⅲ3个主要抗原域。E蛋白抗原优势区域的鉴定,为E蛋白抗原表位的鉴定以及针对于E蛋白诊断试剂的开发奠定了基础。  相似文献   

鸽新城疫病毒的分离及鸽群自然感染状况的调查   总被引：20，自引：3，他引：17  

崔晓萍  郑明 《中国兽药杂志》1997,31(2):6-10

将在北京某信鸽群采集的两只具神经症状的病鸽脑组织悬液接种ＳＰＦ鸡胚后，分离出二株病毒分离物ＰＢ９６０１和ＰＢ９６０２，通过对鸡红血球的血球凝集试验，用已知鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）高免血清任务在球凝集抑制试验（ＨＩ）及２～３月龄鸽的攻毒试验，证明这两个毒株为对鸽呈高致病性的ＮＤＶ。交叉ＨＩ试验表明，鸽ＮＤＶ分离株与鸡ＬａＳｏｔａ株间有很高的血清交叉反应，但也存在着一定抗原性差异。对扬州地区若鸽群中２－  相似文献   

泰万菌素兽用国家标准品的研制     

戴青  杨秀玉  韩宁宁  王轩  赵晖 《畜牧兽医学报》2020,51(8):1985-1992

旨在研制首批泰万菌素兽用国家标准品,用于酒石酸泰万菌素及其制剂中泰万菌素的效价测定。采用精制后的泰万菌素酒石酸盐为原料进行本批泰万菌素标准品的研制,原料分装后按照酒石酸泰万菌素质量标准及《中华人民共和国兽药典》2015年版中的规定对其进行质量检测及均匀性评价,采用紫外-可见分光光度法测定最大吸收波长,60℃减压干燥法测定干燥失重,高效液相色谱法测定泰万菌素A组分,并以原始发明厂的标准品为基准,采用抗生素微生物检定法中三剂量管碟法进行协作标定,对标定结果进行合并计算,作为本批标准品的效价赋值。结果显示,分装后的标准品经60℃减压干燥至恒重后减失重量为2.0%,均匀性评价符合要求,在289 nm的波长处有最大吸收,抗生素微生物检定法测定的泰万菌素效价为822 U·mg^-1。本研究研制的首批泰万菌素兽用国家标准品各项检测指标均符合规定,可作为国家标准品发放,用于酒石酸泰万菌素原料及制剂中泰万菌素的效价测定,便于生产企业和质量检定部门进行酒石酸泰万菌素原料及制剂的质量控制,对于提高和保证兽药质量具有重要意义。  相似文献   

人巨细胞病毒pp150抗原区基因片段的克隆与表达     

李国才  季明春  薛方明  严华  申厚凤 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》2003,24(4):16-18

为了研制人巨细胞病毒(HCMV)核酸疫苗,根据HCMV基质磷蛋白pp150基因序列设计引物,利用高保真PCR从HCMV AD169株基因组DNA中扩增出编码pp150抗原决定簇区域的基因片段.序列分析结果显示其与发表的该段序列同源性为100%.将此基因片段克隆进原核表达质粒pET30a,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达后经SDS-PAGE及Western blotting检测到约35 h的外源蛋白.表达产物免疫小鼠,所得抗体具有低滴度中和作用.  相似文献   

用植物病毒载体表达小球状病毒抗原蛋白的研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

王振东  孙仓 《沈阳农业大学学报》2006,37(1):35-39

将引起人类腹泻主要病原物小球状病毒(Small round structured virus;SRSV)编码抗原蛋白基因的全长序列1605bp,导入来自三叶草黄脉病毒(Clover yellow vein virus;ClYVV)侵染性全长cDNA克隆的侵染性植物病毒表达载体pClYVV/CP/W基因组的NIb/CP基因之间,构建了重组病毒克隆pClYVV-NV1.6。用上述重组病毒克隆接种蚕豆植物,表现了与野生型ClYVV相同的症状。从发病叶中提取总RNA,用反转录PCR(RT-PCR)对上述重组病毒克隆的转录进行了检测,结果表明,外源基因在F4子代病毒基因组中仍然稳定存在。从发病叶中提取总蛋白,用酶联免疫吸附分析(Enzyme-linked immunosorbent assay;ELISA)及蛋白质杂交(Western blotting;WB)对上述重组病毒克隆表达的目的基因产物抗原蛋白进行了测定,结果表明,重组病毒克隆pClYVV-NV1.6之目的基因产物的表达量随寄主植物发病后时间的推移而变化,最大表达是在寄主植物发病后第9天,最大表达量为每克鲜叶可表达160.00μg,这一研究结果为用植物生产抗SRSV口服疫苗提供了有力的基础。  相似文献   

Pharmacokinetics of sulphadimidine in carp (Cyprinus carpio L.) and rainbow trout (Salmo gairdneri Richardson) acclimated at two different temperature levels     

V. J. Th. van Ginneken  J. F. M. Nouws  J. L. Grondel  F. Driessens  M. Degen 《The Veterinary quarterly》2013,33(2):88-96

Summary

The influence of temperature (10° C and 20° C) on pharmacokinetics and metabolism of sulphadimidine (SDM) in carp and trout was studied.

At 20° C a significantly lower level of distribution (Vd_area ) and a significantly shorter elimination half‐life (T _(½>) β) was achieved in both species compared to the 10° C level. In carp the body clearance parameter (Cl_B (SDM) was significantly higher at 20° C compared to the value at 10° C, whereas for trout this parameter was in the same order of magnitude for both temperatures.

N₄‐acetylsulphadimidine (N₄‐SDM) was the main metabolite of SDM in both species at the two temperature levels. The relative N₄‐SDM plasma percentage in carp was significantly higher at 20° C than at 10° C, whereas there was in trout no significant difference.

In neither species was the peak plasma concentration of N_4‐SDM (C_maxN4‐SDM)) significantly different at two temperatures.

The corresponding peak time of this metabolite (T_{max (N4‐SDM)}) was significantly shorter at 20° C compared to 10° C in both carp and trout.

In carp at both temperatures, acetylation occurs to a greater extent than hydroxylation. Only the 6‐hydroxymethyl‐metabolite (SCH₂OH) was detected in carp, at a significant different level at the two temperatures. Concentrations of hydroxy metabolites in trout were at the detection level of the HPLC‐method (0.02‐μg/ml). The glucuronide metabolite (SOH‐gluc.) was not detected in either species at the two temperatures.  相似文献