携带禽流感病毒DNA疫苗的减毒鼠伤寒沙门菌的免疫效力     

《中国兽医科技》2007,37(2):125-130

  相似文献   

A Classical Live Attenuated Vaccine for Sheep Pox     

Bhanuprakash V  Indrani BK  Hegde R  Kumar MM  Moorthy AR 《Tropical animal health and production》2004,36(4):307-320

A classical live attenuated sheep pox vaccine was prepared using the Ranipet strain of sheep pox virus (SPV) at the 50th passage in a secondary lamb testicular cell system. The TCID50 and RD50 were 10(9.63)/ml and 10(9.51)/ml. respectively. The SID50 of SPV challenge virus was 10(5)/ml. The vaccine was found to have no adverse effects in laboratory animals, and was safe and effective in SPV seronegative lambs. In the field, 660 sheep were vaccinated with an immunizing dose containing 1 x 10(2) TCID50. Randomly selected vaccinated sheep mounted good cell-mediated immunity and humoral responses as measured by glucose utilization test and serum neutralization test, respectively, for the study period of 6 months.  相似文献   

ATR-FTIR技术在小麦籽粒识别上的探索     

曾玉婷  李博  王容  王炳锐  赵林姝  张文英  刘录祥  徐延浩 《核农学报》2021,35(7):1522-1531

为探索衰减全反射傅里叶变换红外光谱技术(ATR-FTIR)在小麦籽粒品种(系)识别和籽粒性状突变体鉴别上的应用,本研究采集了91个小麦品种(系)和576个小麦M₅突变体及235个对照株系籽粒的ATR-FTIR光谱,其中71个小麦品种(系)用于建立小麦籽粒ATR-FTIR识别模型,20个小麦品种(系)用于外部验证;对建模光谱数据进行7种预处理,在3 600~1 000 cm^-1波段内建立小麦籽粒品种(系)识别模型,外部验证检验该模型的准确性;并应用该模型从M₅突变株系中鉴定籽粒性状突变体。结果表明,使用多元散射矫正+Norris平滑(MSC+ND)预处理方法建立的小麦籽粒ATR-FTIR识别模型能完全鉴别71个小麦品种(系)的籽粒,且外部验证也证实了该模型的准确性;应用建立的小麦籽粒ATR-FTIR识别模型,从突变株系中鉴定了4个籽粒性状潜在突变体,突变率为0.69%。本研究建立了小麦籽粒ATR-FTIR识别模型,实现了对不同小麦品种(系)籽粒的区分,并将该模型应用于突变体鉴别,拓宽了ATR-FTIR光谱技术在小麦上的应用领域,同时为筛选小麦籽粒性状突变体提供了新的途径。  相似文献   

嗜水气单胞菌D102致弱菌株的制备和鉴定     

胡扬扬  张雅斌  刘艳辉  王雪发  郑丹丹  冷东泽  李月红 《吉林农业大学学报》2015,37(1):43-46

为研究嗜水气单胞菌D102致弱菌株的制备、OD值变化及其致病性,首先利用细菌在生长过程中毒力不断减弱的特性,对嗜水气单胞菌102正常株进行数次传代培养,得到在血液琼脂平板上没有β-溶血圈的D102致弱株。然后对102正常株和D102致弱株进行OD值测定,发现102正常株在6 h时进入对数生长期,24 h开始进入稳定生长期;而D102致弱株在2 h即开始进入对数生长期,20 h时开始进入稳定生长,对数生长期较正常株提前。鱼体注射0.5 m L的D102致弱株菌液7 d后无发病现象,然后在不发病鱼体上注射强毒性102正常株原菌液。结果表明:80%的鱼正常生长,无发病状态,20%的鱼出现轻微充血后痊愈,D102致弱株对鲤鱼有很好的保护作用;提取不发病鱼的血清进行血清学反应,确定其抗体效价为1∶128。  相似文献   

鸭瘟鸡胚化弱毒株细菌人工染色体的构建与鉴定     

张传健  许梦微  王志胜  侯继波  王继春 《江苏农业学报》2014,(5)

为了构建鸭瘟鸡胚化弱毒株DEV(atten)的细菌人工染色体(BAC),将转移载体质粒pDEVgC-pHA2DNA和DEV(atten)DNA共转染鸡胚成纤维细胞(CEF)进行重组,通过三轮挑斑纯化,以获得纯化的鸭瘟重组病毒。将纯化的鸭瘟重组病毒的DNA电转化到E.Coli DH10B中,对获得的克隆用酶切、PCR方法进行鉴定并测序。提取阳性克隆的DNA转染CEF,以拯救重组病毒。再通过将带有相同同源臂和UL44(糖蛋白质C,gC)基因的片段和阳性克隆的DNA共转染鸡胚成纤维细胞进行重组,以获得gC恢复病毒。采用0.01感染复数(MOI)感染CEF对亲本病毒、恢复病毒进行多步法生长曲线测定,比较其有无差异。结果显示:成功获得了DEV的mini-F重组病毒,命名为DEV(atten)-mini-F,获得2个阳性克隆S1、S2,将S1命名为pDEV(atten),应用pDEV(atten)拯救重组病毒获得gC恢复病毒DEV(atten)ΔgC-R,生长特性的结果显示亲本病毒与恢复病毒间无显著性差异。表明成功构建的DEV(atten)的细菌人工染色体为全基因组的感染性克隆。  相似文献   

减毒沙门菌介导防御素-3乳腺表达及对乳腺炎主要病原菌的抗菌效果     

陈慧敏  李银聚  张鹏  程相朝  张春杰  余宁  杨惠  王晓利 《兽医大学学报》2014,(7):1169-1175

探讨减毒沙门菌介导的人HNP-3原前肽和前肽基因乳腺表达及其表达产物对牛乳腺炎主要病原菌的抗菌效果。构建人HNP-3原前肽和前肽基因的乳腺表达载体pEGFP-WAP-prepro-HNP-3和pEGFP-WAP-pro-HNP-3,电转化导入减毒沙门菌ΔcrpC78-1,构建重组菌ΔcrpC78-1（pEGFP-WAP-prepro-HNP-3）和ΔcrpC78-1（pEGFPWAP-pro-HNP-3）,重组菌分点注射到怀孕后20~22d母兔腹部乳腺分布区,收集兔分娩后不同时间的泌乳,Western-blot和荧光检测乳中HNP-3融合蛋白表达情况,ELISA检测乳中HNP-3融合蛋白的表达水平,常规方法分离乳腺炎主要病原菌,活菌计数法检测泌乳中HNP-3融合蛋白抑菌效果。结果显示,乳汁中分别在40 000和35 000处有prepro-HNP-3和pro-HNP-3融合蛋白阳性杂交信号,且在488nm处有黄绿色荧光;母兔在分娩后第5dHNP-3融合蛋白表达量最高,分别可达584μg/L和470μg/L,及至第25天表达量仍可达到277μg/L和213μg/L。活菌计数法结果表明分娩后第5d含prepro-HNP-3融合蛋白兔乳对牛乳腺炎主要病原菌大肠埃希菌、溶血巴氏杆菌、无乳链球菌、乳房链球菌、金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌的抑菌率分别为92.0%、54.8%、46.4%、48.8%、86.9%和74.9%;含pro-HNP-3融合蛋白乳的抑菌率分别为84.9%、46.5%、40.6%、40.4%、71.1%和58.4%。结果表明,减毒沙门菌能够介导人HNP-3融合蛋白基因在乳腺上皮细胞中定位表达,表达的preproHNP-3和pro-HNP-3具有较强的生物学活性,对牛乳腺炎主要病原菌具有明显的抑制作用,为乳腺炎的生物防控及生物源性抗菌肽的研究提供了参考。  相似文献   

鸡毒支原体F弱毒疫苗株感染SPF鸡对IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10产生的影响     

林伯全  徐磊  杨慧  林秋敏  赖宝色 《兽医大学学报》2014,(11):1778-1780

为了解鸡毒支原体（Mycoplasma Gallisepticum,MG）F弱毒疫苗株感染SPF鸡对IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10共4种细胞因子产生的影响,本研究分别以活菌浓度为109（A组）、106（B组）CCU/mL的MG F株及生理盐水（C组）点眼接种SPF鸡,采用ELISA方法对免疫前后外周血4种细胞因子的动态变化规律进行研究。结果显示免疫后A、B组的4种细胞因子浓度明显升高;其中IFN-γ质量浓度A组于第7、14天显著高于其他组（P〈0.05）,B组于第7天显著高于C组（P〈0.05）;IL-2质量浓度各组于第3、5、7天差异显著（P〈0.05）,由高至低以此为：A、B和C组;A组与B组IL-4和IL-10质量浓度差异不显著（P〉0.05）,但两组IL-4质量浓度于第5、7、14天显著高于C组（P〈0.05）;且2组IL-10质量浓度于第5、7、14、21天显著高于C组（P〈0.05）。免疫MG F株可较好的提高IFN-γ、IL-2介导的细胞免疫作用和IL-4、IL-10介导的体液免疫作用,且MG F株活菌浓度与接种鸡的细胞免疫作用呈正相关性。  相似文献   

布鲁氏菌弱毒疫苗鉴别技术研究进展     

南文龙  谭鹏飞  彭大新  陈义平 《中国动物检疫》2014,31(8):32-35

布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的一种重要的人畜共患传染病,不仅给畜牧业造成严重的经济损失,并威胁人类健康。弱毒疫苗免疫是防控布病的重要手段,但弱毒疫苗的使用往往对布病的诊断和监测造成干扰。各国学者利用细菌学、免疫学、分子生物学等技术手段,建立了病原分离鉴定、补体结合试验、利凡诺尔试验、酶联免疫吸附试验、荧光偏振实验、限制性片段长度多态性、PCR、real-time PCR等多种布鲁氏菌弱毒疫苗鉴别检测方法。研究表明,ELISA和FPT以其高通量以及操作方便的优势,在布鲁氏菌弱毒疫苗与野生菌株感染的血清学鉴别诊断方面前景良好;分子生物学特别是PCR、real-time PCR方法目前仍广泛用于布鲁氏菌纯培养物的鉴定。  相似文献   

应用拉曼和中红外衰减全反射光谱测定溶液和土壤中的硝酸盐   总被引：2，自引：0，他引：2  

邵艳秋  杜昌文  申亚珍  马菲  周健民 《土壤》2015,47(3):596-601

为比较拉曼光谱和红外光谱在溶液和土壤中硝酸盐含量定量分析的适用性,采用两种光谱对溶液和土壤中的NO3–-N含量(0~200 mg/L)进行快速测定。结果表明,溶液中硝酸盐的拉曼特征峰在1 047 cm–1处,该特征峰强度与NO3–-N浓度成正比,对1 035~1 060 cm-1波段拉曼光谱峰面积和NO3–-N含量进行线性回归,决定系数R2为0.995 4;溶液中硝酸盐的中红外衰减全反射光谱特征吸收峰在1 350 cm–1,吸收峰与NO3–-N含量成正比,特征吸收区1 200~1 500 cm–1峰面积与NO3–-N含量的决定系数R2为0.991 1,表明两种光谱都可用于溶液中硝酸盐的测定。对于土壤样品,红外光谱在1 250~1 500 cm–1处有硝酸盐吸收峰,且吸收峰与NO3–-N含量成正比,峰面积与NO3–-N含量之间的决定系数R2为0.968 4;而对于拉曼光谱,硝酸盐的拉曼峰因受较强干扰导致吸收峰不明显,峰面积与NO3–-N含量之间的决定系数R2仅为0.000 9,表明中红外衰减全反射光谱可用于土壤中硝酸盐的测定,而拉曼光谱则很困难。因此,拉曼光谱和中红外衰减全反射光谱都可用于溶液中硝酸盐的测定,且前者灵敏度要高于后者;中红外衰减全反射光谱可用于土壤中硝酸盐的测定,而拉曼光谱难以用于土壤中硝酸盐定量分析,这为硝酸盐的快速测定提供理论依据和技术支持。  相似文献   

减毒沙门菌介导的apo-tPA融合基因在鸡体组织的分布与表达     

王晓利  李银聚  程相朝  张春杰  吴庭才  廖成水  胡阿勇 《中国兽医学报》2011,31(4)

探讨以减毒沙门菌为载体,介导外源基因在动物体内的组织分布和表达的可行性。将编码人t-PA功能区的基因片段与鸡VLDLy组装前体apo-B100基因融合,定向克隆到荧光蛋白表达载体SV40启动子下游,构建pApo-tPA-GFP表达质粒。应用电转化法将pApo-tPA-GFP表达质粒转化减毒沙门菌,阳性减毒沙门菌经翅下静脉注入鸡体内,分别于注射后第1、2、3、4、5周随机剖检试验用鸡,无菌取内脏器官,经组织细菌培养、RT-PCR检测各脏器中基因分布,涂片荧光镜检基因表达情况。结果显示,在肝脏、脾脏和十二指肠均分离到沙门菌,PCR鉴定均为减毒沙门菌载体;RT-PCR检测在肝脏、脾脏、十二指肠中有目的基因存在;荧光检测在肝脏、脾脏中有荧光蛋白。结果表明,减毒沙门氏菌能够作为载体将目的基因有效的转入到动物体内,这一方法有望为动物转基因提供便捷、有效的途径。  相似文献